供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 50T |
货号: | BES20794BO |
CAS号: |
产品概述
膜蛋白提取试剂盒(双向电泳用)是一种快速高效的高产膜蛋白提取试剂盒。 膜蛋白提取试剂盒可以从细胞组织样本中提取膜蛋白,可用于纯化膜蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。 提取的蛋白样品中不含盐,可以直接用于等电聚焦、双向电泳等。如下游实验不需要直接用于等电聚焦、双向电泳,可选用 用于Western Blotting、普通蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验的其他试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
双向电泳
适用样本
动物细胞/组织
产品特点
1、 使用方便。
2、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
产品应用
双向电泳
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
使用方法
1. 提取液制备:
每500ul冷的提取液A中加入5ul提取液B 和2ul蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个以上细胞,在4℃,500g条件下离心3-5分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
或者取50mg-100mg组织样本,用冷PBS洗干净,然后用手术剪刀尽可能剪碎,加400ul冷的试剂 A,用组织匀浆机/器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 洗涤后的细胞样品中加入400ul冷的试剂 A,充分混匀。
4. 在2-8℃条件下振荡20-30分钟,至细胞充分裂解,细胞沉淀明显减少。
5. 在2-8℃低温下12000g离心5分钟,取上清。
6. 在37℃水浴10分钟。
7. 在37℃, 1000g离心3分钟。
8. 此时液体分为2层,小心移除上层溶液,留管底部下层,大约50ul液体。
9. 用50ul-200ul膜蛋白溶解液溶解该下层液体,即得膜蛋白样品。
10. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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