供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 100ML |
货号: | BES20853BO |
CAS号: |
产品概述
RIPA裂解液采用优质原料配制,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用,是经典常用的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等下游实验。 本RIPA裂解液成分为25mM Tris•HCl pH 7.6, 150mM NaCl, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS。根据相应实验要求添加自己需要的蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
1年
检测方法
WB、IP等
适用样本
细胞、组织
产品应用
WB、IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.匀浆机/匀浆器
试剂准备
1.PBS缓冲液 (pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
离心管
吸头
一次性手套
使用注意事项
1.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2.整个过程须保持样品处于低温状态。
3.本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
4.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
5.禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
6.最hao使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
7.避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用方法
A. 细胞裂解
1. 取5-10×106个细胞,在4℃,1000rpm条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每5×106个细胞中加入500ul冷的裂解液(每106个细胞,大约10mg或10ul压积,加100ul RIPA裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100ul~150ul,或一个75 cm2培养瓶加1 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果RIPA裂解液不足量,细胞裂解效率将会降低),混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
4. 在4℃,14000rpm条件下离心15分钟。
5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
B. 组织裂解
1. 取100mg组织样本剪碎,加入1ml裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
2. 将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中,在4℃,10000rpm条件下离心5分钟。
3. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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