供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 50ML |
货号: | BES20860BO |
CAS号: |
产品概述
NP-40蛋白裂解液是一种温和的裂解细胞和组织的裂解液。能裂解细胞并充分释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白产物最da限度地保留了蛋白的特性和功能。 NP-40蛋白裂解液裂解的细胞和组织样本,主要用于Western Blot,免疫沉淀和免疫共沉淀、ELISA等下游应用。 用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。 可以提供针对各种不同下游应用的蛋白裂解液。 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
1年
检测方法
WB、IP等
适用样本
细胞、组织
产品特点
1、 使用方便,从细胞,组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2、 提取过程简单方便,将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
5、 总蛋白提取液含多种有效成分,可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白,又可结合释出的蛋白防止沉淀。
6、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
产品应用
WB、IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.匀浆机/匀浆器
试剂准备
1.PBS缓冲液 (pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
离心管
吸头
一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
4.如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
5.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
使用方法
A. 细胞裂解
1. 裂解液制备:
每1 ml冷的NP-40裂解液中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞,在4℃,1000×g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加入500 μl冷的裂解液,混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
5. 在4℃,12000-14000×g条件下离心15分钟。
6. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
B. 组织裂解
1. 裂解液制备:
每1 ml冷的NP-40裂解液加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取100 mg组织样本用手术剪刀剪碎,加入1 ml裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3. 将组织匀浆液在4℃振荡15-25分钟。
4. 在4℃,12000-14000×g条件下离心15分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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