供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 50T |
货号: | BES20956BO |
CAS号: |
产品概述
核糖体是细胞内一种核糖核蛋白颗粒(ribonucleoprotein particle),主要由RNA和蛋白质构成,其惟一功能是按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链,所以核糖体是细胞内蛋白质合成的分子机器。核糖体无膜结构,主要由蛋白质(40%)和RNA(60%)构成.核糖体按沉降系数分为两类,一类(70S)存在于细菌等原核生物中,另一类(80S)存在于真核细胞的细胞质中。他们有的漂浮在细胞内,有的结集在一起。酵母核糖体提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种酵母样品中提取总核糖体。提取过程简单方便。 本试剂盒不能用于冷冻样品的核糖体提取。 本试剂盒需要使用超速离心。如果没有超速离心的条件,可以选择其它货号的试剂盒,采用低速离心提取核糖体。使用超速离心的试剂盒的核糖体纯度高于低速离心的试剂盒,低速离心的试剂盒产品提取时间较长,需要过夜处理。请根据试剂需要选择。 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。可以提供针对不同下游实验应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。 还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.酵母核糖体提取液B长期不用时-20℃保存。避免反复冻融。
2.酵母洗涤液D长期不用时-20℃保存。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
酵母
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 (pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.如果是做核酸类下游应用,实验中所有液体以及器具均应该用DEPC处理。用0.1%的DEPC处理12小时然后高压。
4.下游用于蛋白质类实验的话可以不用DEPC处理。
5.细胞最好采用新鲜收集的,或者收集后立即置于-80℃保存的样本。
6.最好使用标准Dounce匀浆器匀浆,如果没有标准Dounce匀浆器,用普通玻璃匀浆器匀浆也可,但是核糖体回收率可能会下降。
使用方法
1. 酵母培养物,在4℃,1000g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集酵母沉淀。
2. 用PBS洗涤酵母两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每100ul体积或100mg湿重酵母沉淀物中加入400ul酵母核糖体提取液A,混匀后,在30℃条件下保温15分钟。
4. 在1000g条件下离心5-10分钟,收集酵母沉淀。
5. 用300ul酵母洗涤液D重悬细胞,静置10分钟,离心收集酵母。
6. 酵母沉淀物中加入500ul酵母核糖体提取液B,充分混匀。
7. 在37℃或室温条件下轻微振荡60-90分钟。
8. 在2000g条件下离心5-10分钟,弃上清,收集沉淀。
9. 沉淀用300ul酵母洗涤液D洗涤两次。离心收集沉淀。
10. 在沉淀中加入400μl酵母核糖体提取液 C,充分混匀,用Dounce匀浆器匀浆20-30下。
11. 将匀浆液在4℃,1000×g力条件下离心5分钟。弃沉淀,收集上清。
12. 将上清在4℃,20000×g力条件下离心10分钟,弃沉淀,收集上清。
13. 将上清在4℃,100000×g -120000×g力条件下离心60分钟。弃上清,收集沉淀。
14. 弃上清,沉淀即为核糖体。
15. 沉淀用核糖体保存液或其他相应的缓冲液重悬。即得到酵母核糖体样品。
16. 置冰箱备用或直接用于下游实验。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
相关产品
GelstainRedTM 核酸染料, 10,000× in water
Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water
彩色预染蛋白Marker(10-250kDa, 双色)
琼脂糖 A2015
Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)
PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒(10%)
Minerva Super Fusion Cloning Kit(无缝克隆试剂盒)
Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖检测试剂盒
彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
二安替比林甲烷
焦硫酸钾
偶氮甲碱H
硫酸钾
阿拉伯胶
关注
拨打电话
留言咨询