供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 50ML |
货号: | BES21626BO |
CAS号: |
产品概述
随着实验室细胞培养的发展,除了原代培养之外,人工开发出来的细胞系的保存越来越重要。冷冻保存细胞系的优点如下:1、减少基因漂移;2、减缓细胞系的衰老;3、稳定表型;4、减少微生物污染及交叉污染机会等。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得1:10~1:20的稀释,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释10~20倍以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。 细胞冻存液(无血清)主要由培养基、冷冻保护剂等组成,不含血清,是一种经典的无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。细胞冻存液(无血清)采用特别配方,成分明确,无批次间差异,可以有效提高细胞冻存活率和复苏活力。本冻存液不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全,既适用于一般培养细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。 本冻存液是即用型试剂,无需现配,即开即用。可以无需程序降温,可直接放置-80℃冻存,操作简单,无需液氮,置于-80℃冰箱可稳定冻存长达5年。本冻存液可微量、原位冻存,例如杂交瘤细胞的冻存,省时高效。
保存温度
-20℃保存
注意事项
注意微生物污染
有效期
一年
仪器准备
1. 细胞计数器
2. 超低温冰箱或液氮
3. 超净工作台
耗材准备
1. 一次性手套
2. 细胞冻存管
使用注意事项
1. 注意在超净工作台内无菌操作,尽量避免污染;
2. 初次使用融化后可在4℃保存1个月,但应减少反复冻融的次数,以免失效;
3. 杂交瘤细胞冻存时应定期复苏,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性;
使用方法
1. 培养细胞至对数生长晚期,显微镜观察其外观、形态、有无污染等,取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞,用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化,进行细胞计数;如为悬浮生长细胞,进行细胞计数。
2. 500~1000g离心5min,弃上清。
3. 加入适量的细胞冻存液(无血清),重悬细胞,使细胞浓度达到1~10x106/ml,置于冻存管中,密闭,不要拧得太紧,避免弯曲变形。
4. 一般遵循1℃/min的速率进行冷冻。亦可采用4℃ 20min, -20℃ 30min,-70℃ 过夜,zui后置于液氮罐中长期存储。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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