| 供货周期： | 一周 |
| 品牌： | 博尔森 |
| 规格： | 50T/48S |
| 货号： | BES-2136BTK |
| CAS号： |
植物氨态氮含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂一：临用前将试剂三倒入使其充分溶解备用。该试剂溶解后 10 天内有效。
2、 试剂二：临用前加 2 mL 蒸馏水充分溶解。
3、 标准品：10 mg 半胱氨酸，临用前加入 1.157 mL 提取液，得到 1000 μg/mL 氮标准液。
产品说明：
氮素是构成生物体的一种必需元素。氨态氮进入植物细胞后形成氨基酸或酰胺，植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在570nm有特征吸收峰；通过测定570nm吸光度，来计算氨基酸含量。
技术指标：
最 低检出限：5.5847 μg/mL
线性范围：25-300 μg/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、无水乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 提取液）加入提取液，室温匀浆后于 25℃，12000g 离心 10min，取上清待测。
二、测定步骤
1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
2. 将1000μg/mL 氮标准液用提取液分别稀释为300、200、100、50、25μg/mL。
3. 操作表：
混匀后盖紧瓶盖封口膜封口（防止水分散失），置于沸水浴中保温 10min，冷却后反复颠倒 EP 管数次，将测定管 8000rpm 离心 5min 后取上清，于 570nm 测定吸光值。显色后务必在 30min 内测完。计算 ΔA=A 测定管-A 空白管，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。
三、植物氨态氮含量计算
1. 标准曲线的绘制：
以各个氮标准液为横坐标，其对应的ΔA标准为纵坐标，建立标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA带入方程中，得到x（μg/mL）。
2. NH3-N含量的计算：
（1）按样本质量计算：NH3-N含量（μg/g 质量）=x×V提取÷W=x÷W
（2）按蛋白浓度计算：NH3-N含量（μg/mg prot）=x×V提取÷（Cpr×V提取）=x÷Cpr
W：样本质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/mL；V提取：样本提取液总体积，1mL。
注意事项：
为保证实验结果的准确性，需先取1-2个样做预实验，如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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