丙酮酸激酶(PK)活性检测试剂盒微量法_价格_上海博尔森生物科技有限公司

产品详情

丙酮酸激酶（PK）活性检测试剂盒说明书

微量法

注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

规格：100T/96S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

2022060702194816261

溶液的配制：

1、试剂二：临用前在试剂二瓶中加入 17mL 试剂一和 1mL 蒸馏水充分溶解，置于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）水浴 5 分钟，现配现用；

2、试剂三：液体置于试剂瓶内 EP 管中。临用前根据用量按照试剂三:蒸馏水为 17:1000 的体积比例充分混匀，冰上放置备用，现用现配。

产品说明：

PK（EC 2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的最后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP的关键酶之一，因此测定PK活性具有重要意义。

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下测定NADH下降速率，即可反映PK活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1. 细菌或培养细胞：

先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10⁴ 个）提取液体积（mL）为 500-1000：1的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或者 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

2. 组织：

按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为 1:5-10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

3. 血清（浆）样本：直接检测。

二、测定步骤

1、紫外分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2、样本测定：

在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、10μL 试剂三和 180μL 试剂二，混匀，立即记录 340nm处 20s 时的吸光值A1和 2min 20s 后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2。

三、PK 活性计算

2022060702205849851

注意事项：

1．测定过程中试剂三、样本在冰上放置，以免变性和失活。

2．比色皿中反应液的温度尽量保持37℃或25℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。或酶标板放入37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）恒温培养箱中孵育。

3．最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

丙酮酸激酶(PK)活性检测试剂盒微量法信息由上海博尔森生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于丙酮酸激酶(PK)活性检测试剂盒微量法报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应丙酮酸激酶(PK)活性检测试剂盒微量法外，上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供羟脯氨酸(HYP)含量检测试剂盒微量法、土壤蔗糖酶(S-SC)活性检测试剂盒微量法等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。

供货周期：	一周
品牌：	博尔森
规格：	100T/96S
货号：	BES-2288BTK
CAS号：