葡萄糖含量检测试剂盒微量法 微量法

参考价:¥1560
供货周期: 一周
品牌: 博尔森
规格: 100T/96S
货号: BES-2412BTK
CAS号:
上海博尔森生物科技有限公司
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葡萄糖含量检测试剂盒说明书

微量法

规格:100T/96S

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

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溶液的配制:

1、混合试剂的配制:使用前将试剂二和试剂三 1:1 等体积混合,用多少配多少;

2、试剂一:2μmol/mL 葡萄糖溶液。

产品说明:

葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物,而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言,葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯 一能源,而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。

葡萄糖氧化酶(Glucose Oxidase,GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶(Peroxidase,POD)催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在 505nm 有特征吸收峰。

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技术指标:

最 低检出限:0.0188 μmol/mL

线性范围:0.125-8 μmol/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、超声破碎仪、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

1. 组织的处理:按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL蒸馏水),研磨成匀浆,置沸水浴中煮沸 10 min(盖紧,防止水分散失),冷却至室温后,8000g,25℃离心 10min,取上清液备用。

2. 细菌或细胞处理:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 蒸馏水),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),置沸水浴中煮沸 10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,8000g,25℃离心 10min,取上清液备用。

二、测定步骤

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 505nm,分光光度计用蒸馏水调零。

2、 样本测定(在 1.5mL EP 管或 96 孔板中依次加入下列试剂):

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三、葡萄糖含量计算

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注意事项:

如果样本吸光值大于1.2,建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。计算公式中注意乘以稀释倍数。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

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