供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 100T/96S |
货号: | BES-2440BTK |
CAS号: |
血清总铁结合能力(TIBC)检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1、 试剂四:临用前根据用量将 A 液和 B 液按 1:1 混合;
2、 标准品:临用前加入 0.9mL 蒸馏水溶解,得到 40μmol/mL FeSO4•7H2O 溶液。再用蒸馏水稀释至 0.5μmol/mL标准液备用。
产品说明:
血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力,其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。
Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物,在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下,血清转铁蛋白可以与Fe3+结合,剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+,此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关;酸化后,转铁蛋白结合的Fe3+释放,并且进一步被还原成Fe2+,此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。A2减A1与TIBC呈正比。
技术指标:
最 低检出限:第 一次测量的检出限为 0.00098 μmol/mL;第二次测量的检出限为 0.0012 μmol/mL。
线性范围:第 一次测量的线性范围为 1.95×10-3-0.5 μmol/mL;第二次测量的线性范围为 1.95×10-3-0.5μmol/mL。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、EP管、蒸馏水。
操作步骤:
一、测定步骤(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 562nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、样本测定(在 EP 管中加入下列试剂)
二、血清总铁结合力计算:
注意事项:
1. A1 小于 0.1 时,样本适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。
2. 试剂二、试剂四有一定的毒性,操作时请做好防护措施。
实验实例:
1、 取 40μL 用蒸馏水稀释 2 倍的骆驼血清,按照测定步骤操作,测得计算 ΔA1 测=A1 测-A1 空=0.342,ΔA1 标=A1标-A1 空=0.746,ΔA2 测=A2 测-A2 空=0.735,ΔA2 标=A2 标-A2 空=0.550,计算总铁结合能力得:
总铁结合能力 TIBC(μmol/L)=500×(ΔA2 测÷ΔA2 标-ΔA1 测÷ΔA1 标)×2=877.919 μmol/L。
2、 取 40μL 用蒸馏水稀释 2 倍的鹅血清,按照测定步骤操作,测得计算 ΔA1 测=A1 测-A1 空=0.191,ΔA1 标=A1标-A1 空=0.746,ΔA2 测=A2 测-A2 空=0.732,ΔA2 标=A2 标-A2 空=0.550,计算总铁结合能力得:
总铁结合能力 TIBC(μmol/L)=500×(ΔA2 测÷ΔA2 标-ΔA1 测÷ΔA1 标)×2=1074.877 μmol/L。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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