| 供货周期： | 一周 |
| 品牌： | 博尔森 |
| 规格： | 50T/24S |
| 货号： | BES-2482BTK |
| CAS号： |
土壤谷氨酰胺酶（S-GLS）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制：
1、 试剂二：临用前取 1 瓶加入 6 mL 蒸馏水溶解，用不完的试剂 2-8℃保存一周；
2、 试剂三：临用前根据样本量按比例（A:B=1:4）配制，现配现用；若发现变色后则不能再使用；
3、 标准品：10 μmol/mL 氮标准液。取 8μL 10μmol/mL 氮标准液，加入 1016μL 蒸馏水，充分混匀，配制成0.078μmol/mL 的标准液待测。（实验中每管需要 400μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
产品说明：
S-GLS（EC3.5.1.2）存在于某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用靛酚蓝比色法测定氨增加的速率，即可计算其酶活性。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、30~50目筛、研钵、甲苯（不允许快递）、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至630nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在EP管中加入下列试剂）
三、酶活性计算
单位定义：37℃下每g土壤每天催化谷氨酰胺生成1μmol氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS（U/g 土样）=ΔA测定÷（ΔA标准÷C标准）×V酶促÷W÷T=1.872×ΔA测定÷ΔA标准÷W
V酶促：酶促反应总体积，1mL；T：反应时间，1/24d；W：土壤质量，g；C标准：标准液浓度，0.078μmol/mL。
注意事项：
1、 当测定吸光值大于 0.7 时，建议将上清液用蒸馏水进一步稀释后测量。计算时乘以稀释倍数。
2、 离心后若上清液仍含有少量杂质，可将上清液再次 10000g，常温离心 10min 去除。
实验实例：
1、 称取两管 0.1g 土样，分别为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用 1mL 玻璃比色皿测定吸光值。计算ΔA测定=A 测定管-A 对照管=0.552-0.116=0.436，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.216-0.005=0.211，计算酶活得：
S-GLS（U/g 土样）=1.872×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=1.872×0.436÷0.211÷0.1=38.682 U/g 土样。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
相关产品
GelstainRedTM 核酸染料, 10,000× in water
Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water
彩色预染蛋白Marker（10-250kDa, 双色）
琼脂糖 A2015
Super ECL Plus（超敏化学发光检测试剂盒）
PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒（10%）
Minerva Super Fusion Cloning Kit（无缝克隆试剂盒）
Cell Counting Kit-8（CCK-8）细胞增殖检测试剂盒
彩色预染蛋白Marker（10-180 kDa，三色）
FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
二安替比林甲烷
焦硫酸钾
偶氮甲碱H
硫酸钾
阿拉伯胶
关注
拨打电话
留言咨询
