土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒 微量法

参考价:¥1600
供货周期: 一周
品牌: 博尔森
规格: 100T/48S
货号: BES-2496BTK
CAS号:
上海博尔森生物科技有限公司
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产品详情

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书

微量法

注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。

规格:100T/48S

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

QQ截图20220615142154.jpg

溶液的配制:

1、 试剂二:临用前取 1 瓶加入 1.875 mL 丙酮溶解,用不完的试剂 2-8℃保存一周。

产品说明:

S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。

S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最 大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。

QQ截图20220615142154.jpg

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、离心机、水浴锅、研钵、甲苯(不允许快递)、丙酮(不允许快递)、30-50目筛、蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

取新鲜土样自然风干或 37℃烘干,过 30-50 目筛。

二、测定步骤

1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至405nm,分光光度计蒸馏水调零。

2、 加样表:

QQ截图20220615142154.jpg

三、酶活计算公式

QQ截图20220615142154.jpg

实验实例:

1、 称取两管 0.03g 三叶草土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用 96 孔板测得计算ΔA=A 测定管-A 对照管=0.6-0.17=0.43,计算酶活得:

S-LAP 活性(U/g 土样)=0.507×ΔA÷W=0.507×0.43÷0.03=7.267 U/g 土样。

2、 称取两管 0.03g 土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用 96 孔板测得计算ΔA=A 测定管-A 对照管=0.569-0.128=0.441,计算酶活得:

S-LAP 活性(U/g 土样)=0.507×ΔA÷W=0.507×0.441÷0.03=7.4529 U/g 土样。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

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