质谱兼容型蛋白银染试剂盒_价格_上海博尔森生物科技有限公司

产品详情

质谱兼容型蛋白银染试剂盒

储存条件：4℃保存，保质期 2 年。

产品内容：

2022040108030531856

实验准备：（每个溶液均需要新鲜配置）

固定液：400mL/次。自备。

银染步骤：

1. PAGE 电泳（包括非变性 PAGE，SDS-PAGE，尿素-PAGE，2D-PAGE，IEF-PAGE 等）结束后，将 PAGE 胶转移到装有 200 mL 固定液的瓷盘或玻璃盘中，摇晃 30 分钟以去除干扰银染的组分（如甘氨酸、SDS、尿素、DTT、甘油等），倒掉固定液。注：此步很重要，否则银染背景很高。

2. 重复上步一次。

3. 将 PAGE 胶转移到 200 mL 浸泡液 A 中，室温摇晃 30 分钟。

4. 用 200 mL 去离子水漂洗 3 次，每次 5 分钟（不要延长或缩短）。

5. 将 PAGE 胶转移到 200 mL 的染色液 B 中，室温摇晃 20 分钟。

6. 用 200 mL 去离子水漂洗 2 次，每次 1 分钟（不要延长或缩短）。

7. 将 PAGE 胶转移到 200 mL 的显色液 C 中，室温摇晃直到蛋白电泳条带显现（一般需要 10 分钟左右）。

8. 将 PAGE 胶转移到 200 mL 终止液 D 中，室温摇晃终止反应。

9. 用 200 mL 去离子水漂洗 3 次，每次 5 分钟（不要延长或缩短）。

10. 切下条带或胶块进行后续的脱银，原位 trypsin 酶解，多肽沉淀和 MS 分析（略）。

MS 前处理步骤（仅供参考）：

1. 脱银：将切下的银染斑点或条带用脱银液（30 mM K3Fe（CN）3 和 100 mM Na2S2O3 的 1：1 的混合液）处理直到黑色消失。

2. 还原：将胶块或胶条置于 10 mM DTT（溶剂为 50 mM NH4HCO3），56℃处理一小时。

3. 烷化：将胶块或胶条置于 55 mM 碘乙酰胺（溶剂为 50 mM NH4HCO3），室温避光处理 45 分钟。

4. 原位 trypsin 酶解：将胶块或胶条置于 10 ng/uL 测序级别的 trypsin 溶液中（溶剂为 25 mM NH4HCO3）37℃处理过夜。

5. 多肽提取：用 5%三氟乙酸抽提酶解液，再用 2.5%三氟乙酸-50%ACN 混合液抽提酶解液，上清真空干燥，沉淀（多肽）最后溶于 0.5%三氟乙酸中。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

质谱兼容型蛋白银染试剂盒信息由上海博尔森生物科技有限公司为您提供，如您想了解更多关于质谱兼容型蛋白银染试剂盒报价、型号、参数等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应质谱兼容型蛋白银染试剂盒外，上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供亲和层析柱，体积12mL、RIPA裂解液（中强度）等产品，公司有专业的客户服务团队，是您值得信赖的合作伙伴。

供货周期：	一周
品牌：	博尔森
规格：	10次
货号：	BES232068ME
CAS号：