供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 1000 mL |
货号: | BES232079ME |
CAS号: |
超快蛋白银染试剂盒
产品及特点 蛋白质银染的原理是银离子(Ag+)可与蛋白质等大分子有机物形成稳定的复合 物,然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使 Ag+还原成银颗粒,可把蛋白电泳带染成 黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色,其灵敏度比考马斯亮蓝高 100 倍。 但常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等步骤组成,操作十分繁琐, 尤其不适用于大批量实验。为解决此问题,本公司推出本产品,其特点如下:
1. 超快,整个过程只需要不到 60 分钟。
2. 操作简单,只有固定(30 分钟)、染色(10 分钟)和显影(10 分钟)三步。
3. 灵敏度比考马斯亮蓝染色高 100 倍,能检测到 10ng 的蛋白质条带。
4. 三个成分中的两个都是现用现配,可重复性好。
5. 本规格可配制 1000mL 蛋白银染溶液 A(染色液),实际使用次数根据 PAGE 胶大小不同而不同。
规格及成分
运输及保存 常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂 去离子水,乙醇和乙酸。
使用方法 一:配制银染固定液 100 mL (对 mini PAGE 胶)
1. 将自备的40mL 无水乙醇、10mL 乙酸和50 mL去离子水充分混合即可使用。 本试剂盒不含这些成分。
二:配制溶液 A
2. 需要配制的蛋白银染溶液 A(染色液)的体积完全跟 PAGE 胶的大小相关,一 般的 mini-PAGE 胶需要 20-30mL。下面的用量是针对配制 100mL 蛋白银染 溶液 A。如果配制的蛋白银染溶液 A 的体积不是 100mL,则需按比例改变各 成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。蛋白银染溶液 A 需要 新鲜配制。
三:配制蛋白银染溶液 B
3. 需要配制的蛋白银染溶液 B(显色液)的体积完全跟 PAGE 胶的大小相关,一 般的 mini-PAGE 胶需要 20-30mL。下面的用量是针对配制 100mL 蛋白银染 溶液 B。如果配制的蛋白银染溶液 B 的体积不是 100mL,则需按比例改变各 成分用量。在一干净烧杯中加入下列成分搅拌混匀即可。
四:银染
4. PAGE 电泳或 SDS-PAGE 电泳结束后,将胶转移到装有 100 mL 银染固定液 的瓷盘中,摇晃 30 分钟以去除干扰银染的成分(如甘氨酸、SDS、DTT、甘 油等)。注:此步很重要,否则银染背景很高。
5. 用 100 mL 自备的去离子水漂洗 2 次,每次 2 分钟。
6. 将 PAGE 胶转移到适当体积的蛋白银染溶液 A 中,使蛋白银染溶液 A 在轻柔 摇晃过程中能够淹没 PAGE 胶。室温摇晃处理 10 分钟。
7. 倒掉蛋白银染溶液 A,用 100 mL 自备的去离子水快速漂洗 2 次,每次半分钟。
8. 将 PAGE 胶转移到适当体积的蛋白银染溶液 B 中,使蛋白银染溶液 B 在轻柔 摇晃过程中能够淹没 PAGE 胶。室温摇晃直到蛋白电泳条带显现(一般需要 10 分钟左右)。
9. 迅速将 PAGE 胶置于适当背景下照相留存。胶的颜色肯能会逐渐加深,如果有 必要保存胶,可以用自备的 5%的乙酸终止显色。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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