供货周期: | 现货 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 10ml |
货号: | BES27070C |
CAS号: |
DEAE-葡聚糖溶液(10mg/ml)
DEAE-Dextran solution(10mg/ml)
产品规格:10ml
保存条件: -20℃保存,有效期 6 个月。
产品简介:
将 DNA 导入细胞的方法很多,采用 DEAE-葡聚糖转染法主要优点是相对简单、快速、同次试验内和 不同次实验间的重复性较好,该法尤其适用于瞬时转染。
DEAE-葡聚糖溶液(10mg/ml)采用特殊溶剂溶解,经过滤除菌,临用前 37℃保温并充分混匀。
本产品仅用于科研,不宜用于临床诊断或其他用途。
使用方法:
1. 取对数生长期的细胞,制备成细胞悬液。将细胞密度调整到 5×105个/ml 接种至 6 孔板,培养12~24h。
2. 用蒸馏水或TE将质粒DNA稀释,将DNA溶液直接加到转染培养液至其终浓度为0.1~1μg/μl。
3. 将 DEAE-葡聚糖溶液(10mg/ml)预热,加到 DNA/转染培养液使 DEAE-葡聚糖终浓度为100μg/ml,最适浓度需要自行摸索。
4. 将 50~70%汇片的细胞培养物中的培养液轻轻吸出,换上适合体积的补充有 DEAE-葡聚糖/DNA/转染培养液,37℃孵育。
5. 倒置显微镜下观察细胞,细胞内会出现颗粒,有的细胞核出现固缩,有的细胞边缘出现部分破碎。有效的 DEAE-葡聚糖转染常伴有 25~75%的细胞死亡。
6. 换用 100mmol/L 氯喹培养液继续培养,进行下游实验。
注意事项:
1. 某些特点细胞需要较长的转染时间,因为氯喹有细胞毒性,可在转染的最后时期加入。
2. 转染时,摇动细胞可保障转染效率均一,最适转染时间需通过实验确定。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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