供货周期: | 现货 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 50T |
货号: | BES26204C |
CAS号: |
DNA产物纯化试剂盒
DNA Purification Kit
规格:50T
保存条件:
室温干燥可保存一年,4℃保存可更长时间。
产品简介:
胶回收试剂盒利用硅基质材料在高盐缓冲系统对 DNA 高效、专一吸附的原理,配备聚合美自主研发的膜结合液(又称溶胶液)和高性能的硅胶膜离心吸附柱,可在 15 分钟内清除凝胶、核酸染料及其他杂质,高效回收 DNA 片段。本试剂盒配套的膜结合液和离心吸附柱的最大吸附量为 20μg,对 100-10000 bp 线性双链 DNA 片段的回收效率可高达 50-90%,也可用于单链 DNA 片段和质粒 DNA 的纯化。因回收率受 DNA 片段大小、浓度等因素的综合影响,故应尽量加大电泳的 DNA 片段浓度,以提高回收率。回收后的 DNA 片段可以直接用于酶切、连接、测序、标记、杂交和体外转录等多种分子生物学实验。
回收效率
50 bp 回收效率:30-50%
100-200 bp 回收效率:50-70%
200-5000 bp 回收效率:70-90%
5 kb-10 kb 回收效率:50-70%
产品组份
膜结合液(MB):25ml (50T)
膜漂洗液(MW):15ml (50T) 初次使用前请按瓶标说明加入无水乙醇混匀
洗脱缓冲液(EB):10ml (50T)
离心吸附柱及收集管:50 (50T) 室温密闭干燥保存
实验准备
用户需自行准备的材料:无水乙醇,异丙醇,台式离心机。
初次使用本试剂盒,请按瓶标说明向膜漂洗液(MW)中加入相应体积的无水乙醇(用户自备),并在试剂瓶上做标记。
操作步骤
1. DNA 结合:按每 1 μl DNA 样品加入 1 μl 膜结合液(MB)的比例(1:1)加入膜结合液,混匀后转移到插入收集管的离心吸附柱内,室温静置 1 分钟,室温下≥12,000 x g 离心 1 分钟,弃除收集管中的废液,将离心吸附柱重新插回收集管中。离心吸附柱的最大吸附量为 20 μg,每次最多可离心 950 μl 溶液,如溶液体积大于 950 μl,可分批转移到同一吸附柱内,分次离心;若样品体积低于 50μl,可用灭菌蒸馏水或洗脱缓冲液(EB)补足至 50 μl,再加入 50 μl 的膜结合液(MB)。为增加小片段的回收效率,当回收的 DNA 片段小于 300 bp 时,或大于 3000bp 时,可加入 1:1 体积的异丙醇。
2.清洗:加入 700 μl 膜漂洗液(MW,请确认已加入无水乙醇)于离心吸附柱中,室温下≥12, 000 x g 离心 30 秒,弃除收集管中的废液,将离心吸附柱重新插回收集管中。
3.再次清洗:加入 500 μl 膜漂洗液(MW)于离心吸附柱中,重复离心一次。弃除废液后,将离心吸附柱去盖再次离心 1 分钟,彻底去除残余漂洗液。
4.洗脱:小心取出离心吸附柱,将其套入一个新的 1.5 ml 灭菌离心管中。向硅胶吸附膜的中央加入 30 μl 洗脱缓冲液(EB),室温静置 1 分钟后,≥12,000 x g 离心 1 分钟收集纯化的 DNA 片段。为提高回收片段浓度,离心收集后可将洗脱后的溶液再次加入离心吸附柱中重复洗脱一次,可提高约 20%的产量;如必须使用无菌去离子水洗脱,需注意其 pH 值是否接近中性,否则应使用 NaOH 溶液将 pH 值调节至 7.0-8.5 之间。
5.储存:弃除离心吸附柱,获得的 DNA 片段可直接用于后续反应或于-20℃长期保存。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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