供货周期: | 现货 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 50T |
货号: | BES26208C |
CAS号: |
柱式全血基因组DNA提取试剂盒
Blood Genome DNA Extraction Kit with columns (0.1-1ml)
规格:50T 200T
保存条件:
室温干燥可保存一年,4℃保存可更长时间。
产品简介:
本试剂盒适用于各种新鲜及抗凝剂(柠檬酸钠、EDTA等)处理过的全血基因组DNA提取。无需去除红细胞,直接裂解血细胞,DNA特异吸附到硅胶膜上,通过简单漂洗去除杂质,可快速纯化得到基因组DNA。使用本试剂盒得到的血液基因组DNA无蛋白、核酸酶污染,可直接进行PCR、酶切和杂交等分子生物学实验。
产品组份
Buffer GB: 12 ml/50 ml (50T/200T)
Buffer WB1: 13 ml/52 ml (50T/200T)
Buffer WB2: 15 ml/60 ml (50T/200T)
Buffer EB: 10 ml/30 ml (50T/200T)
Proteinase K **: 1 ml/4×1 ml (50T/200T)
Spin Column With Collection Tubes: 50/200 (50T/200T)
** Proteinase K(蛋白酶K):可常温运输,开盖后防止空气及枪头污染;为了保证长期使用,建议将其放入-20℃保存。如果出现絮状物,是因为溶解缓冲液中的钙离子在磷酸盐中可能会产生不溶解性沉淀,离心取上清,不影响使用效果。
自备试剂
无水乙醇、RNase A(可选)。
产品优势
1. 适用范围广:可从抗凝血、白膜层和禽类血等样品中直接提取DNA;
2. 操作简便:无需有机试剂沉淀,可快速获得高纯度的血液基因组DNA;
3. 纯度高:去除污染物和抑制剂彻底,便于下游应用。
注意事项
1. 如Buffer GB和Buffer WB1产生沉淀,可在56℃水浴溶解;
2. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段小,提取量下降;
3. 所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作。
操作步骤
注意:使用前请先在缓冲液Buffer WB1和Buffer WB2中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1. 在1.5 ml灭菌离心管中加入20 ul Proteinase K,200 ul哺乳动物鲜血或抗凝血。
注意:如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液,其红细胞为有核细胞,因此处理量5-20 ul,可加缓冲液PBS或生理盐水补足200 ul后进行下面的裂解步骤,如要去除RNA,可加入4 ul RNase A(100 mg/ml),混匀,静置5 min。
2. 加入200 ul Buffer GB,涡旋混匀15 sec,56℃水浴10 min。
注意:期间每隔一段时间震荡离心管,至溶液变得清亮。
3. 加入200 ul无水乙醇,充分震荡,短暂离心以去除管盖内壁液体。
4. 将吸附柱放入收集管,将上一步所得溶液全部加入吸附柱中,12,000 rpm离心1 min,弃收集管中滤液。
5. 向吸附柱内加入500 ul Buffer WB1,室温12,000 rpm离心30 sec,弃收集管中滤液。
注意:按要求在Buffer WB1中加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。
6. 向吸附柱内加入600 ul Buffer WB2,室温12,000 rpm离心30 sec,弃收集管中滤液。
注意:Buffer WB2是浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。
7. 向吸附柱内加入500 ul Buffer WB2,室温12,000 rpm 离心2 min,弃收集管中废液。
注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组DNA的后续使用。
8. 将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管(自备)中,加入50-100 ul Buffer EB,室温放置2 min,12,000 rpm 离心1 min,离心管底溶液即基因组DNA。
注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液Buffer EB在60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用NaOH调整其pH值在7.0-8.5之间,为了增加回收率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2 min,再次离心收集。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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