古朵分享|牛血清白蛋白的提取方法及用途?
CAS:9048-46-8,又称第五组分,牛血清白蛋白(BSA),是一种常用的PCR扩增增强剂和稳定剂,能够起到稳定扩增酶、降低PCR抑制物的作用,常见于核酸检测试剂中,广泛应用于生物学诸多学科及医、药学各领域。
牛血清白蛋白(BSA)在动物细胞无血清培养中,起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白(BSA)在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot和制备ELISA板中的封闭试剂。牛血清白蛋白(BSA)在生化研究、遗传工程和医药研究,一般作为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,也可用作医药保健食品、调味品。
牛血清中白蛋白(BSA)的制备方法很多,包括盐析法、有机溶剂沉淀法和热激法提取等,但目前的制备方法所得的牛血清白蛋白(BSA)收率或纯度都比较低,存在脂肪酸、蛋白酶、核酸酶以及内毒素等杂质,限制了牛血清白蛋白(BSA)的进一步应用,因此,一种高纯度从牛血清中分离白蛋白的方法十分关键。
CN105017412B公开的制备牛血清白蛋白(BSA)的方法,克服了现有技术的不足,能够从牛血中提取出高纯度、高收率的牛血清白蛋白(BSA),且不含小分子物质以及只含较低浓度的内毒素。包括以下步骤:
首先向牛血清中加入生理盐水或PBS溶液将牛血清稀释;再向稀释后的牛血清中加入适量硫酸铵,2~8℃静置30min以上,离心收集上清液;
第二步,向上清液中加入2~3倍体积的PBS溶液,混匀后进行疏水层析,使用PBS溶液洗脱,收集洗脱液;
第三步,将洗脱液进行分子筛层析,收集不含盐和其它小分子的蛋白峰;所述层析填料为G10-G75葡聚糖;
第四步,使用阴离子交换层析进一步纯化牛血清白蛋白(BSA),通过0.1~1.5M浓度氯化钠进行梯度洗脱,收集精纯的牛血清白蛋白(BSA);
后,经过对病原微生物进行灭活、分子筛层析、超滤浓缩、过滤除菌得到纯度高于99.5%的牛血清白蛋白(BSA)。
这种方法大程度地去除血浆中的杂质,有效提高了牛血清白蛋白(BSA)的纯度,对于其在生化研究、遗传工程和医药研究的应用具有重要价值。
牛血清白蛋白 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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