一、细胞基本属性 |
细胞名称 | 大鼠肺小动脉平滑肌细胞 |
组织来源 | 肺小动脉组织 |
商品货号 | ORCR389 |
种属来源 | 大鼠 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞简介 | 大鼠肺小动脉平滑肌细胞分离自肺小动脉组织;小动脉(smallartery),管径在0.3~ 1m m之间,小动脉包括粗细不等的几级分支,也属肌性动脉。较大的小动脉,内膜有明显的 内弹性膜,中膜有几层平滑肌,外膜厚度与中膜相近,一般没有外弹性膜。小动脉是决定 周围循环阻力大小的主要因素,也是调节微循环灌注量的“总开关”。典型的小动脉,其 管壁的厚度与管径相比约为1∶2。中膜的肌层相对比其他动脉为厚,当平滑肌在神经支配 下强力收缩时,其管腔可以完全闭塞,而使血液不能流入它所分布的毛细血管内,从而增 加了周围血液循环的阻力。如果有许多小动脉同时收缩,可使血压显著上升。反之,当小 动脉的平滑肌舒张时,则可使大量的血液流入毛细血管,外周阻力明显下降,血压降低。 终末小动脉(terminal arteri-ole)的口径为20~30μm;后小动脉(metarteriole),又称毛细血管前小动脉(precapil-lary arteriole)的口径为12~15μm。管壁内均有较 稀疏的平滑肌,在毛细血管前小动脉分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛细血 管前括约肌(precapillary sphincter),其收缩或舒张,可调节真毛细血管的血流量,是调节微循环灌注量的“分开关”。 |
包被条件 |
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培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
传代特性 | 可传2-3 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
方法简介:澳睿赛实验室分离的大鼠肺小动脉平滑肌细胞采用先机械吹打、后胰蛋白酶消化,结合澳睿赛密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:澳睿赛实验室分离的大鼠肺小动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠肺小动脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠肺小动脉平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在澳睿赛技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技
术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
大鼠肺小动脉平滑肌细胞信息由澳睿赛生物技术(上海)有限公司为您提供,如您想了解更多关于大鼠肺小动脉平滑肌细胞报价、型号、参数等信息, 欢迎来电或留言咨询。除供应大鼠肺小动脉平滑肌细胞外,澳睿赛生物技术(上海)有限公司还可为您提供KHOS-240S人骨肉瘤细胞、TCMK-1 小鼠肾小管上皮细胞等产品, 公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。