产品详情
Rhodamine 123染色试剂盒
产品简介:
Rhodamine 123染色液可用于细胞凋亡检测,Rhodamine 123是一种细胞通透性的、阳离子的荧光探针,容易被有活性的线粒体摄取,没有细胞毒性,Rhodamine123由于带阳离子所以当线粒体膜电位存在的时候就会透过细胞膜在活细胞的线粒体内聚集,发出黄绿色荧光,而当膜电位下降的时候,聚集的Rhodamine 123就减少,从而发光强度降低。
Rhodamine 123常与Cy5和 AMCA (Aminomethylcoumarin Acetate)等组合进行多色荧光分析,相互间无颜色交叉;分析细胞凋亡时,可用Rhodamine 123来检测线粒体的膜电位,而用NAO来检测线粒体结构的完整性。
Rhodamine 123可用于对许多种细胞进行染色,包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rhodamine,123的荧光强度之间有相关性,Rhodamine 123也可应用于检测细胞内的ATP。
试剂盒组成:
产品编号 | 产品名称 | 100-200T | 500-1000T |
组份 A | Rhodamine 123染色液A | 1ml | 1ml*5 |
组份 B | 试剂B | 10ml | 50ml |
说明书 | 1 | 1 |
储存条件:
2-8°C避光保存
【注】
l 长期不用可以-20°C保存
l 染色液避免反复冻融。需要长期保存时可以根据使用情况进行小量分装后-20°C保存。试剂拆封后请尽快使用完
l 染色液A为 DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
l 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
有效期:六个月
Rhodamine 123荧光光谱
检测方法:
流式细胞仪
荧光显微镜
激光共聚焦
样本类型:
●悬浮细胞●贴壁细胞
试剂盒以外自备试剂和仪器:
仪器准备:
l 荧光显微镜/激光共聚焦/流式细胞仪
l 离心机
l 移液器
l 冰箱
l 冰盒
试剂准备:
l PBS 缓冲液(pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X))
l 或者HBSS(Hank's Balanced Salt Solution)
耗材准备:
l 离心管
l 吸头
使用方法:
使用注意事项;
l 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
l 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
l 始终保持平衡染液中 pH值的一致性,因为pH值的变化将影响膜电位。
l 与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋白,他们将与部分染料结合,降低染料的浓度,引起假去极化。
l 本染色液可用于培养细胞、细胞涂片。
l 根据样本情况和下游的检测仪器选择合适的染色方法,只要在染色时染色工作液能充分覆盖细胞样本即可。
1、染色工作液的配制:
根据样本数量,用37℃培养箱预热染料稀释液试剂B将Rho123染料10倍稀释。再用相应的培养基或其他缓冲液将Rho123染料进行50-100倍稀释,配制成染色工作液。
【注】:
l 也可以不使用本试剂盒中的试剂B,直接用相应的培养基稀释染料至所需浓度。
l 开始实验前,使用HBSS缓冲液或无血清培养基稀释染料储存液到需要的工作浓度。工作浓度应根据不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度,建议至少在超过10倍范围的浓度下进行测试。一般染色终浓度100-1000倍稀释,200-500倍适合大多数细胞样本。
l 建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,每次使用一管,试剂-20℃避光冻存,一年稳定。
l 工作液现配现用。
l 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
2、细胞染色
收集培养细胞,用PBS洗涤2次,将细胞沉淀重悬于1ml染色工作液中。
3、37℃培养箱孵育30分钟。
4、去染液后用培养基洗涤细胞两次。
5、用培养基重悬细胞。
6、流式细胞仪或荧光显微镜检测。流式细胞仪检测:激发波长505nm,发射波长530nm:荧光显微镜观察:滴加100 ul细胞悬液于载玻片上观察。
注意事项:
l 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验效果。
l 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
l 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
l 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
l 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
l 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
Rhodamine 123染色试剂盒信息由澳睿赛生物技术(上海)有限公司为您提供,如您想了解更多关于Rhodamine 123染色试剂盒报价、型号、参数等信息, 欢迎来电或留言咨询。除供应Rhodamine 123染色试剂盒外,澳睿赛生物技术(上海)有限公司还可为您提供Annexin V-FITC / PI 双染细胞凋亡检测试剂盒、Annexin V-EGFP / PI 双染细胞凋亡检测试剂盒等产品, 公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。