用于流式、免疫组化、免疫荧光的抗体有什么区别？

武汉菲恩生物科技有限公司

用于流式、免疫组化、免疫荧光的抗体都是通过抗体抗原的识别来进行检测的，但是它们在多个方面存在区别，这些区别主要体现在应用原理、抗体特性、实验流程以及结果呈现等方面。

抗原抗体特异性结合

以下是对这三种抗体的详细区别的分析：

1.应用原理

流式抗体：主要用于流式细胞术，通过激光激发抗体上的荧光标记物，使其发出荧光信号，流式细胞仪捕获这些信号并进行分析，以实现对细胞表面或细胞内抗原的定量检测。

免疫组化抗体：利用抗原与抗体的特异性结合原理，通过酶标抗体与底物反应显色，对组织切片中的抗原进行定位、定性和定量检测。

免疫荧光抗体：同样基于抗原与抗体的特异性结合，通常是使用荧光标记的二抗来识别结合了一抗的抗原，通过荧光显微镜观察荧光信号，从而对细胞或组织中的抗原进行定位和检测。

流式抗体用直接法检测抗原，免疫组化/荧光抗体常用间接法识别抗原

2.抗体特性

流式抗体：通常是针对单一种属的直接带荧光标记的单克隆抗体，具有高度的特异性和灵敏度。

免疫组化抗体：可以是单克隆或多克隆抗体，通常不带荧光标记，通过酶标二抗催化底物显色。

免疫荧光抗体：可以是单克隆或多克隆抗体，通常也不带荧光标记，但可通过荧光标记的二抗进行显色。

3.实验流程

流式抗体：将细胞制成单细胞悬液，加入流式抗体进行孵育，然后使用流式细胞仪进行检测和分析。

流式抗体实验流程

免疫组化抗体：需要对组织进行切片、固定、通透等处理，然后加入免疫组化抗体进行孵育，再通过酶标二抗催化底物显色，最后通过显微镜观察结果。

免疫组化抗体实验流程

免疫荧光抗体：实验流程与免疫组化类似，但需要使用荧光标记的二抗进行显色，并通过荧光显微镜观察结果。

4.结果呈现

流式抗体：结果通过流式细胞仪分析得到，以图表或数据的形式呈现，如散点图、直方图等，能够直观地展示细胞群体的分布和抗原表达水平。

流式抗体实验结果

免疫组化抗体：结果以组织切片的形式呈现，通过显微镜观察切片上的颜色变化（如红色、紫色或蓝色）来判断抗原的定位和表达水平。

免疫组化抗体实验结果

免疫荧光抗体：结果同样以组织切片或细胞悬液的形式呈现，但通过观察不同荧光颜色（如绿色、黄色、橙色等）的荧光信号来判断抗原的定位和表达水平。

免疫荧光抗体实验结果

综上所述，流式抗体、免疫组化抗体和免疫荧光抗体在应用原理、抗体特性、实验流程和结果呈现等方面均存在明显的区别。这些区别使得它们在不同的实验场景中各有优势，共同为生物医学研究提供了强有力的支持。

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