Extreme Thermostable RNase HII(极耐热RNase H2)

参考价:¥750
供货周期: 现货
品牌: 雅吉生物
规格: 200U
货号: C5051A
CAS号:
上海雅吉生物科技有限公司
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产品详情

Extreme Thermostable RNase HII(极耐热RNase H2)是一种来源于极端耐热的菌株的内源性 核酸内切酶,它识别RNA/DNA 杂交链并切割RNA链,其对单链RNA切割活性极低,且对dsDNA、ssDNA无 切割活性。该RNase HII 酶在DNA/RNA duplex的单核糖核苷酸残基处从5’端进行切割,切割后 产生一个5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII 酶在 70- 75°C 具有最佳活性,在 50°C 到 75°C 间均具有活性,但其在室温下活性非常低。该酶 极度耐热,在95°C加热30min后仍保留全部活性,因此其与大多数的PCR缓冲体系兼容,可用于 RNase H2依赖性PCR(rhPCR)等实验。与RNase HI 相比,RNase HII可识别单个核糖核苷酸并进行切 割,而RNase HI识别四个连续核糖核苷酸的2'-OH;另外,RNase HII可降解冈崎片段,而Rnase HI没有这个活性。

单位定义

一个单位是指在 60°C 下,15分钟切割 1nmol 含有单个RNA的嵌合DNA/RNA杂交双链体底物所需的酶量。

储存

置于-20°C,可保存2年。


应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。



应用实例3:采用荧光酶活测定法在30℃和60℃条件下测定HotStart Bst 4.2,结果显示与未加入Aptamer的对照比较来看。HotStart Bst 4.2在30℃条件下酶活几乎无活性,而60℃条件下1min内酶活完全释放,恢复100%活性




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