供货周期: | 现货 |
品牌: | 派瑞曼 |
规格: | 50-500T |
货号: | P-PR1335 |
CAS号: |
BCA Protein Assay Kit
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1335-50-500T | 50-500T | BCA Protein Assay Kit |
产品介绍:
描述:BCA 蛋白质定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根 据目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法之一-BCA (bicinchoninic acid)法改良研制而成,该试剂盒具有蛋白 浓度测定的简单性,高稳定性,高灵敏度和高兼容性。本试 剂盒的原理是蛋白质分子中的肽键结构在碱性环境下能与 Cu2+络合生成络合物,将 Cu2+还原成 Cu+,而 BCA 试剂可 敏感特异地与 Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在 562nm 处有最大光吸收值,该复合物颜色深浅与蛋白质浓度 成正比,可根据吸收值的大小来测定蛋白的含量,1 小时内 即可完成蛋白定量检测。本试剂盒含有牛血清白蛋白(BSA) 溶液作为蛋白质标准溶液,测定范围为 25~2000 μg/ml。该 试剂盒可用于 20 次试管检测或 200 次 ELISA 板检测。
操作方法:
1. 标准品的稀释:按下表将 BSA 进行稀释。
管号 PBS
BSA 体积
(来源)
BSA 终浓度
(μg/ml)
A 0 300 μl (母液) 2000
B 125 μl 375 μl (母液) 1500
C 325 μl 325 μl (母液) 1000
D 175 μl 175 μl (B 管) 750
E 325 μl 325 μl (C 管) 500
F 325 μl 325 μl (E 管) 250
G 325 μl 325 μl (F 管) 125
H 400 μl 100 μl (G 管) 25
I 400 μl 0 0
2. BCA 工作液的配置:根据样品数量及测定方法,将 BCA Reagent A 和 BCA Reagent B 按体积比 50:1充分混匀即可。
注意事项:
1. 待测样品浓度在 25~2000 μg/ml 的范围内具有良好的线性关系。
2. BCA 工作液配制后 24 小时内使用效果稳定。
3. BCA 法测定蛋白浓度时,吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或延长孵育时间。
4. 使用普通的分光光度计测定时,需根据比色皿的最小检测体积,适当加大 BCA 工作液的用量,使其不小于最小检测体积,样品和标准品的用量可相应按比例调整。
5. 适用范围
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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