供货周期: | 现货 |
品牌: | 派瑞曼 |
规格: | 100Tx25μl |
货号: | P-PR1246 |
CAS号: |
Bst 4.0 Basic Bead
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1246-100Tx25μl | 100Tx25μl | Bst 4.0 Basic Bead |
产品介绍:
该制品为全体系冻干微球制品,内含恒温扩增所用的反应缓冲液、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,其不包含任何染料,使用时只需要加入引物、模板即可进行核酸恒温扩增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依赖于 RNA 模板的聚合酶活性(逆转录),还具有依赖于DNA 的聚合酶活性,因此无论 DNA 或 RNA 样本均可使用该制品进行恒温扩增。该制品是进行 LAMP 及RT-LAMP 扩增反应的绝佳试剂。
本制品不包含任何显色染料,可自行搭配相关染料或检测手段进行 LAMP 反应,包括搭配 OG 染料管进行橙绿变色、搭配标记 Oligo 进行试纸条检测、搭配荧光染料进行荧光检测、搭配 Molecular Beacon 探针进行荧光检测等方法。
储存:-20℃保存 2 年;室温(25℃)保存>6 个月。
操作方法:
1. 关于 OG 橙绿变色管说明:橙绿变色染料(OG Dye)以烘干的形式预加在8联管盖上。LAMP反应完毕后,将 0.2ml EP 管颠倒溶解 OG 染料后。LAMP的反应产物将与 OG 染料形成绿色肉眼可见变色反应(阳性),而未扩增的 EP 管为深橙色(阴性)。本试剂管常温长期保存。
2. 配制变色 LAMP 反应体系
在 OG 染料管(0.2ml EP)反应管中加入下述试剂
Bst4.0 Basic Bead 1 粒
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、
注意:全部试剂加入完毕后,轻弹 EP 管底部后,再盖上 OG 橙
3. 反应体系配好后,置于 65°C 进行反应 15~30min。(扩增良好的引物组合,通常 20min 即可变色,一般不超过30min)。
4. 观察结果:反应结束后,从加热装置中将反应管取出,室温 2min,使整个反应管冷却下来。再次用力将反应管
注意事项:
(1)关于矿物油的使用,在配制完 LAMP 反应体系后,可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部,以减少气溶胶的污
(2)在使用其它荧光染料时,使用浓度可自行优化,通染料可能导致扩增失败。
(3)本试剂不支持,浊度、pH 变色、HNB 变色反应,请勿尝试。
(4)关于 LAMP 成品试剂的建议, Bst 4.0 Basic Bead冻干球和 OG 橙绿变色管均为室温稳定状态,可长期保存。将扩增引物加入到 OG 橙绿变色管底部,于 70°C 烘干,再加入一粒冻干球即可制备成全体系检测试剂。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
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