| 供货周期： | 现货 |
| 品牌： | 派瑞曼 |
| 规格： | 100Tx25μl |
| 货号： | P-PR1248 |
| CAS号： |
Bst 4.0 SYBR Green Bead
商品属性：
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1248-100Tx25μl | 100Tx25μl | Bst 4.0 SYBR Green Bead |
产品介绍：
描述：
该制品为全体系冻干微球制品，内含恒温扩增所用的反应缓冲液、SYBR Green 荧光染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等，使用时只需要加入引物、模板即可进行核酸恒温扩增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依赖于 RNA 模板的聚合酶活性（逆转录），还具有依赖于 DNA 的聚合酶活性，因此无论 DNA 或 RNA 样本均可使用该制品进行恒温扩增。该制品是进行 LAMP 及RT-LAMP 扩增反应的绝佳试剂。
SYBR Green 系列产品为实时荧光检测的专用试剂，可直接在恒温荧光仪或定量 PCR 以上进行 LAMP 反应扩增。
储存：-20℃保存 2 年；室温（25℃）保存>6 个月。
使用冻干微球进行全扩增体系用品的制备方法：将优化的扩增引物分装于 0.2 ml EP 管底部，于 70-80℃条件烘干1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已经含有干燥的扩增引物，再加入一粒冻干微球即可制备成全扩增体系干燥品，该干燥品无需冷链运输，可长期保存。
反应体系说明：每一个冻干微球为按照 25 μl 反应体系建立，在使用时只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可进行反应。
使用实例，进行 LAMP 荧光扩增
1. 配制荧光 LAMP 反应体系在 0.2 ml EP 反应管中加入下述试剂
Bst 4.0 SG Bead 1 粒
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到液体总量 25 μl
10xLAMP Primer Mix 浓度：FIP/BIP 分别为 16 μM、LoopF/B 分别为 4-8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。
2. 反应体系配好后，置于荧光定量 PCR 仪中于 65°C进行反应 15~30min。1min 收集一次荧光信号。读取扩增曲线进行阴性和阳性判读。
3. 根据荧光扩增曲线判读阳性和阴性。
注意事项：
（1）关于矿物油的使用，在配制完 LAMP 反应体系后，可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部，可以有效的减少气溶胶的污染。实验证明矿物油并不影响机器的荧光数值读取。
（2）关于扩增曲线的异常：由于 LAMP 扩增速度较快，荧光信号读取可能存在矫正计算问题，这与荧光设备的软件算法有管。在有些荧光 PCR 仪上，在相对荧光模式下，表现出曲线飞峰、终点曲线下降的问题。此时调整到原始荧光值模式下观察结果，或致电相应设备供应商进行咨询。
pcr相关试剂实验结果分析：
PCR实验结果的分析涉及多个方面，包括实验操作、试剂质量、实验条件等，这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：
循环次数过多：增加模板量减少循环次数，缩短退火时间及延伸时间，或改用两种温度的PCR循环，可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低：退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，过低的退火温度可能导致非特异性扩增，影响结果的准确性1。
电泳体系问题：包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题，这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题：运输储存不当可能引起试剂盒失效，试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板：使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，影响结果的解读1。
PCR假阴性结果：可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果，需要注意以下几点：
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染，以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析，可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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