Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)

参考价:¥3822
供货周期: 现货
品牌: 派瑞曼
规格: 100T、2000Tx25μl
货号: P-PR1250
CAS号:
上海博湖生物科技有限公司
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产品详情

Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)

商品属性:

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产品名称

P-PR1250-100T

100T

Bst 4.0 Basic   Mix(with UDG)

P-PR1250-2000Tx25μl

2000Tx25μl

Bst 4.0 Basic   Mix(with UDG)

 产品介绍

描述:

该制品为双组分的试剂,Basic Buffer Mix 包含了反应缓冲液、Mg2+、dU/A/C/GTP(不含 dTTP)、冻干赋形剂,酶 Mix 包含 Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶、热敏 UDG。得益于 Bst 4.0 识别 dUTP 底物,反应底物中不包含dTTP,因此扩增产物均为 dUTP 产物,在配合热敏 UDG的情况下,实现防污染性能。在实际测试中,含有 10e5Copies 的污染物的条件下,完全抑制污染扩增。本制品尤其适用于开盖的 LAMP 反应(如试纸条检测)、密封腔体(污染风险较高)的检测试验(如定量 PCR腔体)。

试剂使用特点:

(1)Basic Buffer Mix 中不含染料,可自行添加 SYBR Green、Eva Green 等染料进行荧光检测。
(2)本试剂适用于开盖检测如核酸试纸条检测。
(3)试剂中含有冻干赋形剂,试剂可直接冻干,无需再优化冻干配方。

使用方法:

1. 配制 LAMP 反应体系
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM、LoopF/B 分别为 4~8 μM、F3/B3 分别为 2 μM。
注意:如何应用核酸试纸条进行特异性检测,可来信咨询。
2. 反应体系配好后,室温(25-37°C)放置 2min,以消化去除潜在的核酸污染,随后置于 65°C 进行反应15~30min。
试剂冻干策略(有冻干经验人员操作):
1. 配制 LAMP 冻干体系
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
ddH2O 到体积 1.5 μl
冻干总体积 15 μl
2. 体系配制完毕后,加入 0.2 ml EP 管进行上机冻干。该试剂的冻干体积为 15 μl, 检测反应体积为 25 μl。

特别说明:
(1)本试剂防污染原理为:热敏 UDG 消化去除含有 dUTP的扩增产物,热敏 UDG 在随后 50℃以上迅速失活,并不影响后续 LAMP 扩增。因此,本试剂无法去除采用 dTTP扩增的污染物,也不能消化天然的核酸底物(DNA/RNA)。为避免扩增气溶胶污染,实验室应长期使用本试剂进行实验,一旦使用 dTTP 试剂扩增后,造成实验室污染,采用本试剂不会消除假阳性扩增。
(2)本试剂适用基于 OG 染料变色法、SYBR Green 法、基于 Biotin/FAM 探针的核酸胶体金法( 具有胶体金法特异性使用策略,如需技术支持,请来信咨询)。本试剂不支持 HNB、pH 显色法。其它使用策略自行优化调整。 
(3)基于本试剂, 提供冻干制备服务。八联管起订量 480T,冻干球起订量 2000T。


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pcr相关试剂实验结果分析:

PCR实验结果的分析涉及多个方面,‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等,‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:‌

循环次数过多:‌增加模板量减少循环次数,‌缩短退火时间及延伸时间,‌或改用两种温度的PCR循环,‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低:‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增,‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题:‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题,‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题:‌运输储存不当可能引起试剂盒失效,‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板:‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果:‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果,‌需要注意以下几点:‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染,‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析,‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

公司正在出售的产品:

细胞基质金属(MMP-3)活性荧光定量检测试剂盒

基质金属蛋白酶-8/胶原酶2抗体 MMP8

人分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)elisa检测试剂盒

甲胎蛋白单克隆抗体(检测) AFP(A4)

小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)elisa分析检测试剂盒

1号染色体开放阅读框147抗体 C1orf147

大鼠谷氨酸脱氢酶(GDH)elisa检测试剂盒

凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗体 Apaf1 Interacting Protein

大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)elisa检测试剂盒

多配体聚糖结合蛋白1抗体 Syntenin 1

冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

22号染色体开放阅读框36抗体 C22orf36

整合素连接激酶ILK抗体 Integrin linked ILK

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嗅觉受体5T2抗体   OR5T2

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膜粘连蛋白5抗体   Annexin V

FLJ21963蛋白抗体 FLJ21963

Fas活化激酶结构域蛋白2抗体 FASTKD2

通用型山羊沙眼衣原体(Chlamydia)基因检测试剂盒

KCNH5蛋白抗体 KCNH5

LANCL3蛋白抗体 LANCL3

大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)elisa检测试剂盒

细胞增殖诱导蛋白54抗体 PIG54/SCC112

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细胞色素c氧化酶11抗体 COX11

Bst 4.0 Basic   Mix(with UDG)溶质载体家族25成员34抗体 SLC25A34

β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖转移酶7抗体 GCNT7

人降钙素原单克隆抗体 Human PCT

 


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