供货周期: | 现货 |
品牌: | 派瑞曼 |
规格: | 50T、500T |
货号: | P-PR1407 |
CAS号: |
组织/细胞/毛发微量基因组DNA提取试剂盒
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1407-50T | 50T | 组织/细胞/毛发微量基因组DNA提取试剂盒 |
P-PR1407-500T | 500T | 组织/细胞/毛发微量基因组DNA提取试剂盒 |
产品介绍:
描述:组织微量基因组 DNA 提取&PCR 试剂盒是一种可以快速从组织、小鼠尾部、单根毛发、细胞培养液、唾液、精液等动物组织中提取微量基因组DNA并通过PCR扩增进行检测的试剂盒。使用该试剂盒可以在 12min 内完成基因组DNA 提取,整个操作过程不需要离心、有机溶剂等烦杂抽提步骤。提取的基因组 DNA 可以直接用于 PCR 扩增、定量分析等实验。提取的基因组 DNA 置于 4℃至少保存 3 个月,可用于 50-100 个 PCR 反应。
操作方法:
1. 取 50 μl Tissue-A Buffer 置于 200 μl 的 EP 管中。
2. 取样:不同的组织取样方法不同a.动物组织:以高压灭菌的手术剪取新鲜或冰冻的动物组织1-5 mg,不要超过 5 mg(重要), 立即置于 Tissue-A Buffer中,短暂涡旋务必使 Tissue-A Buffer 覆盖组织。b.小鼠尾部:以高压灭菌的手术剪取小鼠尾部,不要超过 5mg,立即置于 Tissue- A Buffer 中,短暂涡旋务必使 Tissue-ABuffer 覆盖小鼠尾部组织。c. 毛发:取 1-3 根带有毛囊(重要)的毛发,取其根部置于 50μl 的 Tissue-A Buffer 中,短暂涡旋务必使 Tissue-A Buffer覆盖毛发根部。d. 唾液或口腔黏液:吸取 15 μl 的唾液或口腔黏液置于 50 μl的 Tissue-A Buffer 中,短暂涡旋以充分混匀。e. 细胞培养液:吸取 15 ul 的细胞培养液(100-10,000 个细胞)置于 50 μl 的 Tissue-A Buffer 中,短暂涡旋以充分混匀。
3. 将加有样品和 Tissue-A Buffer 的 EP 管置于 PCR 仪上95°C 加热 10min。
4. 加热结束后,加入 50 μl 的 Tissue-B Buffer,然后用移液器 Tip 吹吸混匀,切勿剧烈振荡。
5. 取步骤 4 所得溶液作为基因组模板,应用 2×Super TaqPCR Mix 进行 PCR 扩增,
特征:
操作简单:应用该试剂盒无需离心、酚抽提等复杂步骤,且整个流程只需 12min。
高灵敏度:可用于提取微量样品的基因组,且可直接用于 PCR 扩增。
应用广泛:可从多种动物组织中提取基因组应用于各种相关 PCR 分析。
样品类型 所需数量
组织 1-5 mg
细胞 100-10,000 个
唾液 20 μl
毛发 1-3 根带毛囊毛发
储存若短期使用请置于 4℃可放置 3 个月;若长期保存请置于-20℃,避免反复冻融,可保存一年。
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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