供货周期: | 现货 |
品牌: | 派瑞曼 |
规格: | 1×106 |
货号: | P-X889 |
CAS号: |
细胞基本属性
英文名称 | NCI-H446:NCIH446 | 细胞名称 | |
货号 | P-X889 | 产品分类 | 人细胞系 |
组织来源 | 肺;转移灶:肋膜渗出癌;小细胞肺癌 | 培养基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
商品介绍:
细胞名称:NCI-H446人小细胞肺癌细胞
生长特性 半贴半悬
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 NCI-H446细胞是从一位小细胞肺癌患者的胸水中建立的,NCI-H446细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。NCI-H446细胞是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种,表达神经元特有的烯醇酶和脑部肌酸激酶同功酶。NCI-H446细胞内左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。C-myc DNA序列扩增约20倍,c-myc RNA比正常细胞增加15倍。最初,传代培养基用RPMI-1640(含5%胎牛血清、10nM氢化可的松、0.005mg/ml胰岛素、0.01mg/ml铁传递蛋白、10nM 17-β-雌二醇、30nM亚硒酸钠)。
年龄(性别) 男性;61岁
组织来源 肺;转移灶:肋膜渗出癌;小细胞肺癌
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肺癌细胞
生物安全等级 BSL-1
致瘤性 Yes, in nude mice (The cells form transplantable tumors with non-typical SCLC histology).
保藏机构 ATCC; HTB-171
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
下列是公司正在出售的产品:
血栓素A2受体抗体 Anti-TXA2R | 补体因子H抗体 CFH |
核受体相互作用蛋白2抗体 NRIP2 | 胞粘蛋白4抗体 PSCD4 |
蛛受体2抗体 LPHN2 | 牛白介素22(IL22)elisa检测试剂盒 |
Hanks'(1*HBSS)平衡盐溶液,含酚红500ml | 小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)elisa检测试剂盒免费代测 |
神经肌肉接头蛋白SNTA1抗体 Syntrophin Alpha1 | 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗体 PPARGC1A |
磷酸化RET原癌基因抗体 Phospho-Ret (Tyr905) | 磷酸化动力相关蛋白1抗体 phospho-DNM1L (Ser616) |
小鼠肌营养蛋白(DMD)elisa检测试剂盒 | 细胞单胺氧化酶(MAO)总活性化学发光法定量检测试剂盒 |
植物活性氧(ROS)elisa检测试剂盒免费代测 | 磷酸化真核翻译起始因子4B抗体 phospho-EIF4B (Ser406) |
FAM210B蛋白抗体 FAM210B | 丙烯酰胺溶液49.5%T,6%C 500ml |
视杆细胞相关蛋白MREG抗体 DSU | 磷酸化天冬氨酰氨基肽酶(S109)抗体 phospho-DNPEP (Ser109) |
大鼠微粒体谷胱甘肽S转移酶2(MGST2)elisa检测试剂盒 | 丝氨酸蛋白酶45抗体 PRS45 |
PE标记人CD105单克隆抗体 human CD105/PE | 乳腺珠蛋白2抗体 Mammaglobin B |
B细胞迁移基因2抗体 BTG2 | (TOLUIDINE BLUE)原位染色试剂盒 |
CD79b抗体 CD79b | 抑制转移候选基因3抗体 TSSC3 |
PE标记小鼠Ly-6C单克隆抗体 mouse Ly-6C/PE | 猫白介素2(IL-2)elisa检测试剂盒 |
环指蛋白21抗体 RNF21 | NCI-H446人小细胞肺癌细胞肌管素相关蛋白2抗体 MTMR2 |
14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亚型抗体 14-3-3 Alpha + Beta + Gamma + Delta + Epsilon | 1号染色体开放阅读框54抗体 C1orf54 |
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