供货周期: | 现货 |
品牌: | 派瑞曼 |
规格: | 1×106 |
货号: | P-X824 |
CAS号: |
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
商品介绍:
中文名称 | 生长特性 | 贴壁生长 | |
货号 | P-X824 | 种属 | 人 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 温度 | 液氮 |
细胞基本属性
细胞名称:LOVO/5FU人结直肠癌细胞氟尿嘧啶耐药株
细胞介绍
LOVO/5-FU为由LOVO细胞构建的耐5-FU药物细胞株。
细胞特性
1)来源:人结直肠癌细胞耐药筛选
2)形态:上皮细胞样,贴壁生长
3)含量:>1×106细胞数
4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5)用途:仅供科研使用。
运输和保存:干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞处理
1、收到细胞后,若发现培养瓶破损、漏液及细胞有污染;或冻存管有破损,融化、漏液等,请立即拍照并联系我们。照片包括细胞培养瓶/冻存管外观,显微镜下细胞照片(100倍,200倍各2张);
2、若收到的复苏细胞有少量细胞脱落、飘起,可能由于运输途中导致。请先于37℃恒温细胞培养箱中静置2~3h后,再进行处理;
3、复苏细胞的充液培养基为不含药物的维持培养基,血清浓度较低,收到细胞后请及时更换为培养基;
4、建议收到细胞后,首先进行扩增(至少3代),并冻存部分细胞以备用。
5、初次培养,当细胞汇合度达约80%时,可加入含5-FU的培养基培养至细胞融合后传代。若细胞传代过程中细胞停止增殖,且状态较差,则需降低药物浓度(首次降低一半药物浓度)或使用不含药物的培养基培养,至细胞汇合度达80%左右,且生长状态较好时,再更换为所需的5-FU药物浓度。
6、细胞冻存过程中,不可添加药物,且冻存液中不含药物。
细胞培养试剂的配制
1)5-FU药物的配制及保存
建议将5-FU药物配制成160mM的母液。
注意:可根据用量配制药物,并将药物分装保存,避免反复冻融导致药物失效。
2)冻存液的配制
90%优质胎牛血清+10%DMSO,现用现配。(冻存液中不含药物)
细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
下列是公司正在出售的产品:
磷酸化S6核糖体蛋白抗体 Anti-Phospho-RPS6 (Ser235+Ser236) | KIAA0240蛋白抗体 KIAA0240 |
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G蛋白偶联受体44抗体 GPR44 | 猴子β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)elisa分析检测试剂盒 |
Heme结合蛋白2抗体 HEBP2 | AF700标记人CD62E/CD62P单克隆抗体 human CD62E/CD62P/AF700 |
HumanIL-19ELISAKit | Aβ1-40 ELISA Kit |
磷酸化KB抑制蛋白β抗体 | LOVO/5FU人结直肠癌细胞氟尿嘧啶耐药株Phospho-IKB beta (Ser23) |
PE-Cy5.5标记的兔抗人IgG H&L F(ab')2 | Rabbit Anti-Human IgG F(ab')₂ / PE-Cy5.5 |
培养注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
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