供货周期: | 现货 |
品牌: | 派瑞曼 |
型号: | 1×106 |
货号: | P-X10745 |
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
细胞基本属性
英文名称 | EBTr (NBL-4) | 细胞名称 | |
货号 | P-X10745 | 产品分类 | 牛细胞系 |
组织来源 | 见说明 | 培养条件 | MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 胎牛血清,10% |
商品介绍:
细胞名称:牛胚气管细胞;EBTr (NBL-4)
形态特性 成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 牛痢疾病毒(BVDV)阴性。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养操作:
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
下列是公司正在出售的产品:
小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9 | COS-7 非洲绿猴SV40 转化的肾细胞 |
非洲绿猴肾细胞;Vero E6 人类恶性黑色素瘤,A375细胞 LS 174T(结肠腺癌细胞) | 人胚肾细胞;293 Cells, low passage |
MMP8重组人 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein | SHH Others Human 人 SHH / Sonic hedgehog (aa 1-197) 人细胞裂解液 (阳性对照) |
6T-CEM人T细胞白血病细胞 The 6T-CEM of human T cell leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
CD1B & B2M重组人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白 Protein | 大鼠源细胞 |
SRC重组人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 标签) Protein | NCI-H520(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
小鼠胚胎成纤维细胞;PA317 | MAPK9 Protein Human 重组人 JNK2 / MAPK9 蛋白 (His 标签) |
SERPINB1 Protein Human 重组人 SerpinB1 / ELANH2 蛋白 (His 标签) | FIGF Protein Mouse 重组小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 标签) |
STK4重组人 STK4 / MST1 蛋白 (His 标签) Protein | FGF19 Protein Human 重组人 FGF19 蛋白 |
CL-0422RBL-1(大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞)5×106cells/瓶×2 | PDE3A重组人 PDE3A 蛋白 (His & GST 标签) Protein |
APP Protein Human 重组人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 标签) | CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人细胞裂解液 (阳性对照) |
GPX7 Others Human 人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 人细胞裂解液 (阳性对照) | PSME2重组人 PSME2 / PA28b 蛋白 (His 标签) Protein |
HMEpC Pellet 人类上皮细胞团块 > 1 mio.cells 人髓核细胞cDNAHNPC cDNA | ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人细胞裂解液 (阳性对照) |
HIST3H2A重组人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白 Protein | DNASE1重组人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白 (His 标签) Protein |
CYB5R1 Protein Human 重组人 CYB5R1 蛋白 (His 标签) | 牛胚气管细胞;EBTr (NBL-4)IL17A Protein Human 重组人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 标签) |
CD4 Protein Human 重组人 CD4 / LEU3 蛋白 (His 标签) | PLA2G2D Protein Human 重组人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 标签) |
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