人磷酸组氨酸性磷酸酶1(PHPT1)elisa试剂盒

参考价:¥1300-1900
供货周期: 现货
品牌: 派瑞曼
规格: 48T/96T
货号: PH101098
CAS号:
上海博湖生物科技有限公司
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产品详情

人磷酸组氨酸性磷酸酶1(PHPT1)elisa试剂盒

商品属性:

英文名称

Human   Phosphohistidine Phosphatase 1(PHPT1)elisa Kit

产品货号

PH101098

用途

公司产品仅供于科研实验

分类

Human/elisa试剂盒

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗PHPT1单抗包被于酶标板上,标准品与样品中的PHPT1与单抗结合,加入生物素化的抗PHPT1抗体,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入酶底物TMB,出现蓝色,加终止液硫酸,颜色变黄,在450nm处测OD值,PHPT1浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中PHPT1浓度

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试剂盒组分: 
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标本收集与试剂准备: 

1. 血清、血浆样本收集应使用一次性的无热原,无内毒素试管(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可),血清、血浆避免使用溶血,高血脂标本,标本悬浮物应离心去除,使标本清澈透明。待测样本应尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-80℃)保存,避免反复冻融。

2. 洗涤液配置:用蒸馏水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的蒸馏水)

3. 标准品配制:取7个1.5ml离心管,分别标注1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,blank。从第一至七管中分别加入标准品/样品稀释液200ul。在管中加入标准品溶液200ul,置于漩涡混合器上混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第六管中吸出200ul弃去,第七管为空白对照。

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4. 生物素化抗体工作液配置:使用前20分钟,用生物素化抗体稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×工作液,根据所需用量配置,当日使用,剩余弃之。

5. TMB显色液的配置:使用前10分钟,将TMB显色液A液和B液1:1混合,避光放置备用。

6. 如果您检测的样本中靶蛋白浓度高于标准品最高值,建议重新检测,请根据实际情况,适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数)。

注意事项:

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

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技术提示:

1、混合蛋白溶液时,避免起泡。

2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。

3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。

4、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。

5、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄色。

6、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

7、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。

8、检测必须符合实验室管理规范的规定,严格防止交叉污染,所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。


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