冻存的细胞应该如何开始培养

上海联祖生物科技有限公司

2024/10/14 11:46

原代细胞与细胞系有什么区别?

　　根据传统定义，自组织第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞直接从组织分离，生命周期有限，经数次传代后会逐渐停止生长。原代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的最大生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。相比之下，细胞系则是源自原代细胞，经过筛选、克隆或连续传代培养而建立起的稳定增殖的细胞群体。细胞系不仅具有更长的生命周期，能在体外持续分裂增殖，而且其遗传特性与表型特征在传代过程中相对稳定，这对于实验的可重复性和结果的可靠性至关重要。细胞系的培养条件通常经过优化，以支持其长期生长和维持特定的生物学特性，如特定的细胞形态、代谢活性或功能表达。

此外，细胞系还因其在实验室中的广泛应用而备受青睐。它们被广泛用于生物医学研究、药物筛选、疾病模型建立以及基因功能研究等领域。细胞系提供了可控的实验环境，使研究人员能够深入研究细胞的基本生物学过程、疾病发生机制以及潜在的治疗方法。

冻存的细胞该如何开始培养?

　　(1) 将一管细胞从液氮罐中取出，注意保护手和眼睛。

　　(2) 将冻存管快速的放入37℃水浴中，轻轻握住并旋转，直到管内物体完全融化。

　　(3) 将冻存管立即从水浴中拿出，擦干，转入无菌环境。

　　(4) 用70%的酒精冲洗冻存管，然后擦去多余酒精。

　　(5) 打开盖子，注意手指不要碰到里面的螺纹(注意，由于冻存管有负压，开盖时可能会有少量溢出，这是正常现象)。

　　(6) 用多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。

　　(7) 盖好培养瓶的盖子，轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。

　　(8) 将培养瓶放入培养箱中(37℃，5%CO2，95%空气)

　　(9) 放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基，以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。

然而，值得注意的是，虽然细胞系具有诸多优势，但它们也可能在长时间的培养过程中积累突变，导致表型或功能上的变化。因此，在使用细胞系进行实验时，需要仔细考虑其来源、培养历史以及可能的遗传变异，以确保实验结果的准确性和可靠性。同时，随着技术的不断进步，新的细胞培养方法和工具不断涌现，为原代细胞和细胞系的研究提供了更多的可能性和选择。

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