方案摘要
方案下载应用领域 | 食品/农产品 |
检测样本 | 其他食品 |
检测项目 | 微生物>菌落总数 |
参考标准 | 均质器在食品微生物学检验 菌落总数测定中的作用 |
菌落总数指标主要用来评价食品清洁度,反映食品在生产加工、储存、运输等过程中被微生物污染的程度及卫生质量的重要指标。近年来在市场简单管理总局发布的食品监督抽检微生物不合格中,菌落总数指标不合格占比居于首位。菌落总数即为食品检样经过处理,在壹定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
均质器在食品微生物学检验 菌落总数测定中的作用
(根据中华人民共和国国家标准GB 4789.2-2022)
一、 原理
菌落总数指标主要用来评价食品清洁度,反映食品在生产加工、储存、运输等过程中被微生物污染的程度及卫生质量的重要指标。近年来在市场简单管理总局发布的食品监督抽检微生物不合格中,菌落总数指标不合格占比居于首位。菌落总数即为食品检样经过处理,在壹定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
二、 使用仪器
1. 恒温培养箱
2. 冰箱:2℃~5℃
3. 天平:感量为0.1g
4. 恒温装置
5. 均质器
6. 振荡器
7. 无菌吸管
8. 无菌锥形瓶
9. 无菌培养皿
10. pH计或pH比色管或精密pH试纸
11.菌落计数器
WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器 WIGGENS WH-650 恒温培养箱
WIGGENS D-500Pro 数显均质乳化器 WIGGENS HG400 pro拍打式均质器
三、 分析步骤
1. 样品稀释
(1)固体和半固体样品:称取25g样品置于盛有225魅力,无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌介质杯中,使用WIGGENS D-500Pro 数显均质乳化器8000r/min ~10000r/min均质1min-2min,或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中,用WIGGENS HG400 pro拍打式均质器拍打1min-2min,制成1:10的样品匀液。
(2)液体样品:以无菌吸管吸取25ml样品置于225ml,无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌锥形瓶中,充分混匀,或放入225ml,稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min,制成1:10的样品匀液。当结果要求为每g样品中菌落总数时,按第一步操作。
(3)用1ml无菌吸管吸取1:10样品匀液1ml,沿管壁缓慢注于9ml稀释液的无菌试管中,在振荡器上振荡混匀,制成1:100的样品匀液。按操作,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1ml无菌吸管或吸头。
(4)根据对样品污染状况的估计,选择1~3个适宜稀释度的样品匀液,吸取1ml在 无菌培养皿中,各两个,同时分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌培养皿内做空白对照。
(5)及时将15ml~20ml冷却至46℃~50℃的平板计数琼脂培养基(可放置于48℃±2℃ WIGGENS WH-650 恒温培养箱中保温)倾注培养皿,并转动培养皿使其混合均匀。
2.培养
水平放置待琼脂凝固,平板翻转36℃±1℃培养48h。水产品30℃±1培养72h±3h。
3.菌落计数
(1)可用肉眼观察,必要时用WIGGENS Galaxy 230 菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。
(2)选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板技术菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。
(3)其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无较大片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分步又很均匀,可计算半个平板后*2代表一个平板菌落数。
(4)当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数器
四、得出结论
五、注意事项
1.菌落总数小于100CFU时,按“四舍五入”原则修约,以整数报告。
2.使用仪器时,注意使用规范,严格按照实验手册和实验室规范进行操作。
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