快速简易的全序列新冠病毒测序及新病原体发现

针对新冠病毒开发简单易行,快速可靠的分子生物学检测或监控方法。RT-PCR是目前最主要的方法,针对的分别是新冠病毒的Orf1b区域, E和N基因的特定片段。根据已有的报导,不同的区域或片段可能会导致不同的灵敏度。考虑到新冠病毒随着时间推移可能会发生的变异,不同来源样品(如呼吸道,唾液,血样,粪便等)中病毒量的差异,与呼吸道中其它病毒和细菌的区别或并发感染,以及病毒基因组变异和流行病学研究与监控的需要,我们利用Paragon Genomics公司的超高均一性,单管超高多重PCR技术开发了二款检测或监控方法。其一是将整个新冠病毒的基因组分成241 或343个相互重迭的片段,用多重PCR扩增新冠病毒的cDNA以检测阳性样品中典型峰形,并可进一步经Illumina (241扩增子)或MGI (343扩增子)NGS测序核实。其二为将样品中所有DNA或cDNA扩增成110-150bp的片段,通过NGS测序以达到发现新型冠状病毒或未知病源体的目的。

2750 2020-02-25
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