指纹血定仪

“指纹”（fingerprint）作为鉴定起源于19世纪末20世纪初犯罪学和法医学。人的指纹由于生物学上的原因，存在个体的差异。这种差异表现在人身上，体现为指纹具有唯一性的特点，即每个人的指纹（三种基本模式，拱形、环形、和螺纹形）是不一样的，是有特征的。这种特征并不随时间环境的变化而改变，因此，广泛应用于罪犯的识别，特殊证件的制作等。分子生物学告诉我们，人的基因存在共性，即不同生物种群有其特定的DNA组成，同时个体之间存在差异，这种差异在本质上表现为基因的不同，即DNA组成序列的差异。目前DNA分析技术的日益成熟，用DNA鉴别来判断不同人之间的血缘关系应用已十分广泛，如亲子鉴定，尸体身份鉴别，生物种类判别等。其本质的判别同指纹完全一致，不过由于DNA数目的巨大，相同基因序列数目远比不同基因序列的数目大的多，而且作为生物基本组成的基因，由于其稳定性不可能性有很大的差异。因此其判别选择的对象十分重要，应选择特定的变异性相对较大的DNA片断分析，作为特征性的指纹图谱，实际上是在某个点上判别，这个点的判断不影响整体性。在应用于中药的指纹图谱方面，DNA可以作为种属的鉴别，不同植物之间存在的差异性相对较大，鉴别真假较容易，但动物药相对较难，矿物药则不行。其次，可应用于同种植物间，也就是对不同生物隔离的相同类型植物的鉴别，即产地。不过这二种鉴别是对生物学属性的鉴别，虽不受外界过多的干扰，但植物药的次级代谢产物（多为药用部分），更易受环境的影响，二者之间存在不确定因素。因此，我认为DNA作为指纹图谱可应用于种类的鉴别，但植物类别多，研究不够深入。研发成本非常高，在实际的应用方面有相当的距离。不过从长远看，保护我国中药资源，建立基因库，则有其特殊的作用。在中药的分析和研究的过程中发现，植物药是多种化学成分的混合体，其药效不是单一的组份能说明的，是多种活性组份共同起作用的，因此单一活性组份的测定和评价不能说明中药质量的好坏，而且目前很多检测的指标成分不具唯一性，将西药检测的理念完全应用于中药存在以偏盖全，割离整体作用的问题。因此将指纹这一概念引入中药分析，将某一方面有特征性的某种分析来表征中药成分的特性。在这里，指纹这一内涵已发生变化，它不象犯罪学中的指纹强调的个体的“绝对唯一性”，也不是DNA指纹中那种内在的遗传学的特性（它即可以是个体之间的“绝对唯一性”，也可以是种群之间的“唯一性”），而是用一定的方法（如HPLC，GC，TLC，HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]，GC－MS，FTIR，X－ray，UV等），对特定的对象（如中药材，提取物，饮片，注射液等），包括其过程，得到的有特征性的相对稳定的图谱，其可以作为鉴别和质量控制的参照依据。由于中药材的化学成分多是次级代谢产物，易受到产地的环境，气候，耕作等各种因素的影响，不定因素很多，得到有代表性通用的指纹谱实在不易。同时，对相同的对象，采用不同的方法可以得到不同的指纹谱，不能偏废，因为各个方法都有其局限性，只是在实际中某种方法可能更实用，代表性相对强些。总之，我认为在中药范围内，指纹的内涵还需大家共同探讨，其代表性的图谱（图象）应根据具体对象而定，严格的量化是不切实际的，如何模糊识别才是关键。

英国科学家近日发明一种新奇的侦察技术，只需对构成指纹的脂肪和皮肤细胞进行化验，便可查明遗留指纹的人是否吸烟和吸毒。 据报道，此技术由英国东英格兰大学和国王大学侦察专家联合开发。他们发现，在指纹上，人们消耗的代谢物堆积在毛孔的汗液里。只要用少量含有金纳米粒子的溶液涂在指纹上，金纳米粒子附着的抗体就能和此代谢物结合起来，要辨别它们通过一种荧光染料标识就可以了。如果此指纹的主人是烟民，荧光就会出现在指纹上。如果在犯罪现场采集到的嫌疑指纹没有存档，此技术可以让警察通过识别他们的生活方式，来大大缩小他们怀疑的对象。 最新的犯罪学研究表明，通过指纹其实可以了解到一个人的许多信息。例如，可以确定他是否吸烟。他们已研制出了一种通过指纹快速识别一个人是否为烟民的技术。据介绍，科学家配制出了一种遇到烟草中所包含的生物碱便会发出辉光的液体。在使用时，只需滴少量液体到指纹上便可迅速得到结果。即使一个人洗手后不久，都能检测出来。 目前，研究人员还在对吸毒人员的指纹进行分析。科学家们希望能够在这部分人的指纹中找到类似的痕迹。通过分析指纹同样可以确定一个人使用的化妆品类型。另外，即使是在刮脸过后5个小时，还是能够通过指纹检测出残留的刮胡膏微粒。 在很多犯罪现场，指纹保存的都不是特别完整，使用传统手段很难获取有关犯罪分子的信息。而这项最新技术的出现将有助于弥补上述缺陷。

历史上对微生物尤其是细菌的鉴定，主要是根据其形态、染色和生化特征，进行手工分类鉴定。20世纪70年代以来，随着微生物学和光电、色谱等技术的发展和计算机的广泛应用，微生物鉴定的自动化逐步成为现实。目前常见的微生物鉴定原理有以下几种：　　1． 酸碱反应：细菌代谢碳水化合物，一般产生酸性物质；分解蛋白质或氨基酸，则产生碱性物质，根据不同细菌的理化性质不同，测定细菌的分解底物导致PH值变化而产生的不同颜色，来判断菌种。　　2． 酶谱分析：根据细菌生长产生酶的特性，在测定底物中加入基质。使其与细菌生长过程中的酶结合成荧光物质，可以在较短的时间判定菌种。　　3．高压液相色谱分析：用气相色谱检测细菌在液体培养基中的代谢产物（挥发和非挥发脂肪酸），结果与数据库数据比较后，得出鉴定结果。　　4．代谢指纹法：20世纪80年代初，美国BIOLOG公司开发了一种新的微生物鉴定方法-代谢指纹法，并将其应用于微生物的自动化检测。其原理是根据细菌对碳源（或氮源）利用的差异来区别和鉴定细菌，不同的细菌会利用不同碳源（或氮源）进入新陈代谢过程（称为呼吸），而对其他一些碳源（或氮源）则无法利用，将每种细菌能利用和不能利用的一系列碳源（或氮源）进行排列组合，就构成了该种细菌特定的代谢指纹，由于细菌在利用碳源进行呼吸时，会发生一系列的氧化-还原反应，产生电子，TTC（四唑紫，2，3，5-TriphenylTetrazoliumChloride）在呼收电子后，会由无色的氧化型转变为紫色的还原型，通过肉眼观察或计算机控制的读数仪，将反应结果同数据库中的指纹进行比对，从而得到细菌的鉴定结果。　　BIOLOG公司的基于代谢指纹法原理的细菌鉴定系统，在全球拥有二十多项专利，该系统在在96孔板条上实现95个反应，大大提高了鉴定的准确率，代谢指纹技术的运用，使该系统与传统的酸碱或细菌的生长反应相比。细菌鉴定的范围更为广泛。目前，BIOLOG的微生物鉴定系统不仅能够鉴定常见的肠杆菌、芽孢杆菌、棒状杆菌、嗜血杆菌、厌氧菌、酵母样真菌、丝状真菌等近2000种微生物，几乎覆盖了所有重要的人体、动植物微生物和大部分环境微生物。　　现在，美国半数以上的州立实验室和国家疾控中心（CDC）都在使用BIOLOG公司的产品，十几年来，BIOLOG公司在全球六十多个国家和地区共销售了1700多套微生物鉴定系统********************************************************************（该段有广告内容）。

快速气相色谱指纹分析仪是目前世界上分析速度最快的气相色谱之一,与传统的气谱相比，其最大的优点在于极快速的样品测试过程和简单的数据分析功能。采取resistive heating 对柱温进行控制,它可以提供传统的气相色谱分析，C6-C25石油标样在2分钟内分离完毕;同时采用统计化学计量学的方法来处理数据，大大的降低了数据处理的难度。各种统计分析模型提供了定性、定量的分析方法，为应用气相色谱指纹判断样品品质(如酒类,香精香料等)作判别分析，及产品品质控制,提供有效快捷的方法.快速气相色谱指纹分析仪,你又知道多少呢？1.你使用过这样的气相色谱吗？2.为什么叫指纹分析仪，特殊在哪里？

（一）中药指纹图谱的定义、特点和分类 中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。 中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。 目前，中药指纹图谱技术已涉及众多方法，包括薄层扫描（TLCS）、高效液相色谱法（HPLC）、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法（GC）和高效毛细管电泳法（HPCE）等色谱法以及紫外光谱法（UV）、红外光谱法（IR）、质谱法（MS）、核磁共振法（NMR）和X—射线衍射法等光谱法。其中色谱方法为主流方法，尤其是HPLC、TLCS和GC已成为公认的三种常规分析手段。由于HPLC具有分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、应用范围广等特点；中药成分绝大多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测，且积累较丰富的应用经验。因此高效液相色谱法已成为中药指纹图谱技术的首选方法。随着HPLC— MS和GC—MS等联用技术的应用，中药指纹图谱技术更趋完善。 （二）中药指纹图谱建立的意义 中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，但现行的显微鉴别、理化鉴别和含量测定等方法都不足以解决这一问题，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。这也正好符合中医药整体学说。在此基础上，如果进一步开展谱效学研究，可使中药质量与其药效真正结合起来，有助于阐明中药作用机理。总之，中药指纹图谱的研究和建立，对于提高中药质量，促进中药现代化具有重要意义。 （三）中药指纹图谱研究概况 以指纹图谱作为中药（天然药物）提取物及其制剂的质量控制方法，已成为目前国际共识，各种符合中药（天然药物）特色的指纹图谱控制技术体系正在研究和建立。美国食品药品管理局（FDA）允许草药保健品申报资料中提供色谱指纹图谱；世界卫生组织（WHO）在1996年草药评价指导原则中也规定，如果草药的活性成分不明确，可以提供色谱指纹图谱以证明产品质量的一致；欧共体在草药质量指南中亦称，单靠测定某种有效成分考查质量的稳定性是不够的，因为草药及其制剂是以整体为活性物质。色谱指纹图谱尤其是薄层色谱的鲜明的指纹图谱是很有用的。国外指纹图谱的应用，目的在于解决成分复杂，有效成分不明确的植物药质量检测和产品批次间质量差异的问题。其中德国研制的银杏叶提取物制剂是一个突出的例子。他们应用指纹图谱制定了相应的标准，该图谱体现了制剂所含的33个化学成分（主要为黄酮类和内酯类）和各自的含量。经化学成分和药效相关性研究，发现约24%银杏黄酮和约6%银杏内酯组成的提取物具有最佳疗效。此外，采用“混批勾兑”法，可使最终产品质量稳定，指纹图谱重现性良好，含量浮动范围为5%左右。 20世纪70年代我国已有学者尝试使用TLCS对中成药进行分析，因主客观条件的限制，技术和时机的不成熟，没有得到公认；20世纪90年代《中国药典》增设了中药化学对照品和对照药材，为中药指纹图谱的研究奠定了基础。随着色谱技术的迅速发展和检测能力的显著增强，为指纹图谱的研究和应用提供了良好的技术保证。目前我国已对中药注射剂做出了必须用指纹图谱进行检测的规定，同时提出了具体的技术要求；在中药材规范化生产实施过程中指纹图谱亦有较广泛的应用。 但是作为一项新技术，中药指纹图谱在实际应用中还面临许多问题，只有进一步加强中药材种植加工和中成药生产贮存的规范化；中药化学成分和中药药理研究的系统化和标准化；以及技术上多学科的渗透，才能保证中药质量的稳定，进而保证中药指纹图谱的建立

[align=center]中药指纹图谱技术[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]安平中心：王媛[/align]1 色谱指纹图谱色谱指纹图谱表现出同一种药材的相似性，经过色谱测定后得到的指纹图谱，是不同产地的某种中药或是其制剂所共有的、与其他中药相比，独有的组分，经色谱测定得到的特征图谱，是中药质量评价模式之一。它包括薄层色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url](GC)等指纹图谱。目前，色谱指纹图谱在中药研究领域中应用广泛[sup][/sup]。近几年来，色谱研究不断深入，同时，联用色谱技术得到发展应用，由于其高效、高速、高分辨率、分析自动化及微量检测的性能和技术，从而在药学领域中具有很好的应用前景[sup][/sup]。2 光谱指纹图谱光谱指纹图谱根据不同中药材所含成分的差异，光谱性质也会有所差异。红外光谱指纹图谱是对整个化合物分子的鉴别，如果中药材中的各种化学成分的质和量均相对稳定，同时，样品处理方法得当，那么它的IR也应当是相对稳定的。郑春松等[sup][/sup]采用衰减全反射－傅里叶变换IR法，建立了川芎、白芍等成分的红外线，该方法能直接、快速地测定样品的FTIR图谱，从而也能够直观地表现出二者配伍后的化学特征。陈小康等[sup][/sup]在中药注射剂的快速鉴别和热稳定性研究中，也采用了荧光指纹图谱法。3 核磁共振氢谱核磁共振氢谱(1H－NMR)能够体现出该有机化合物特有的结构信息，在对各化合物简单的结构鉴定以及核磁共振氢谱谱图的研究之后，可对中药材的1H－NMR指纹图谱进行解析[sup][/sup]。4 X射线衍射法当某一物质受到X射线照射时，会产生不同程度的衍射现象。该物质会产生其特有的X 射线衍射图谱，X 射线衍射图谱能反映出其晶型、组成等特征，目前，在当归、鹿角等的质量评价的研究中均有应用[sup][/sup]。5 分子生物学法伴随着分子生物学的深入发展，已有文献报道可使用DNA指纹图谱作为中药材质量评价的方法[sup][/sup]。近些年来RAPD分子标记技术已广泛应用于中药材的鉴别中[sup][/sup]。另外，在中药有效成分的提取、分离等方面，超临界流体色谱技术也在逐步地发展

中药的质量是其疗效的关键所在。长期以来，人们多是凭借经验，从药材的外观形态、气味以及一些简单的物理、化学现象来判断其真伪。虽然起到一定的作用，但常常有很大的主观性和片面性。随着现代分子生物学技术的发展，中药材指纹图谱技术在中药材质量控制中显示了越来越广阔的应用前景。那么指纹图谱技术在其质量控制中的作用到底有多大？

摘要：目的：采用高效液相色谱法建立白茅指纹图谱，并进行分析比较。方法：应用HPLC法测定白茅饮片的指纹图谱，用Kromasil Ｃ18(46×150ｍｍ,5μｍ)色谱柱,0.05%冰醋酸溶液—甲醇为流动相,采用梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长320nm。结果：初步建立了白茅饮片的指纹图谱，其精密度、重现性、稳定性试验中共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%。结论：该方法简便、准确、重复性好。关键词：白茅;指纹图谱 白茅为禾本科植物白茅（Imperata cylindrica Beauv. var. major(Nees) C. E.Hubb.）的干燥根茎，是常用中药，自魏代沿用至今，始载于《神农本草经》并列为草部中品，味甘，性寒。主劳伤虚嬴，补中益气，除瘀血，血闭寒热，利小便。常用于血热妄行的多种出血证，热淋。目前，人们对白茅研究在质量控制方面比较肤浅，2010版《中国药典》也没有明确给出白茅的含量测定方法，生品与炮制品皆缺乏质量控制标准和行之有效的检测手段，本实验对白茅的指纹图谱进行初探，并进行了相似度数据计算，为充实其质量标准研究提供有关资料。1.方法学研究1.1仪器与试药Waters515高效液相色谱仪,Waters 2487双波长紫外检测器（Waters 2487 Dual λ Absorbance Detector），2002 Waters公司 Empower pro 工作站（美国Waters公司），KQ-500B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），色谱柱:中科院大连化学物理所，C18柱：Kromasil C18(4.6×150mm，5μm)，乙腈为色谱纯（美国Tedia公司， 批号：040702），甲醇（色谱醇，江苏汉邦科技有限公司，批号：004072166）。娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）；冰醋酸为分析纯(AR级) （广东•汕头市西陇化工厂）；绿原酸对照品（供含量测定用，批号：110753－200413）,购自中国药品生物制品检定所；白茅饮片均购自不同产地见表1。 表1 十批不同产地的白茅序号产地白茅饮片编号1安徽生12湖北生23湖南生34江苏生45浙江生56河北生67山西生78[/

开展中药指纹图谱研究的五大领域中药指纹图谱的研究内容和实际应用主要包括以下五大领域： 　　一、中药指纹图谱测试 　　针对中药材、炮制品、饮片，以及各类中药复方制剂，研究不同的样品制备方法及有效组分的切割方法。运用包括色谱、光谱以及多维、联用分析技术，全面开展指纹图谱测试，建立具有普适意义的、规范化的中药指纹图谱。 　　１、中药有效组分提取及分离方法研究及其规范化。 　　２、色谱分离分析条件优化技术研究。 　　３、多维、联用分析新技术方法学研究。 　　４、指纹图谱中活性成分分析与鉴定。 　　５、中药指纹图谱分析方法规范化研究。　 　　二、指纹图谱鉴别方法研究 　　１、中药指纹图谱化学特征信息的提取方法研究。 　　２、同一分析方法不同检测方式及不同分析方法获得的多源检测数据间的相关性。 　　３、指纹图谱相似度计算方法。 　　４、中药指纹图谱的快速处理方法。　　　　 　　５、建立中药指纹图谱鉴别计算方法体系。 　　三、中药药效组分筛选及检测方法学 　　针对研究药材、方剂的功效和所涉及的有关作用靶位或靶点，开展从整体、器官、细胞和分子生物学等不同层次和水平药理学研究，寻找能够较准确反映方剂药效或功能主治，并具备快速、准确、样品用量小的活性筛选指标，在建立快速中药体内外组分检测方法的基础上，寻找中药的药效组分群，并建立中药药效指纹图谱，从而总结形成一套完整的中药药效组分快速筛选体系和方法。 　　１、中药药效组分靶细胞动态高密度培养技术和模型的建立。 　　２、中药药效组分细胞反应器计算机控制及在线检测的研究。 　　３、中药药效组分快速筛选方法关键技术研究。 　　４、中药复方体内组分的多指标检测方法学研究。 　　四、中药指纹图谱组效学 　　在中药化学指纹图谱、药效物质成分鉴定和中药药效活性测定的基础上，充分利用现代化学与生物信息学研究的成果，开展指纹图谱信息与药效活性信息的相关性研究，以实现中药化学指纹图谱向中药药效组分指纹图谱的转化，从而建立中药指纹图谱组效学研究体系。　 　　五、中药指纹图谱质量控制 　　将中药指纹图谱应用于中药材的真伪鉴别及质量评价、中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价、中药新药开发研究　　　１、中药指纹图谱在中药材的真伪鉴别及质量评价中的应用。　 　　２、中药指纹图谱在中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价，提出采用中药指纹图谱来实现从药材、半成品到最终产品的全过程质量控制方法。 　　３、中药指纹图谱在中药新药创制中的应用研究。

[B]一、中药指纹图谱测试 [/B]　　针对中药材、炮制品、饮片，以及各类中药复方制剂，研究不同的样品制备方法及有效组分的切割方法。运用包括色谱、光谱以及多维、联用分析技术，全面开展指纹图谱测试，建立具有普适意义的、规范化的中药指纹图谱。 　　１、中药有效组分提取及分离方法研究及其规范化。 　　２、色谱分离分析条件优化技术研究。 　　３、多维、联用分析新技术方法学研究。 　　４、指纹图谱中活性成分分析与鉴定。 　　５、中药指纹图谱分析方法规范化研究。 　　[B]二、指纹图谱鉴别方法研究 [/B]　　１、中药指纹图谱化学特征信息的提取方法研究。 　　２、同一分析方法不同检测方式及不同分析方法获得的多源检测数据间的相关性。 　　３、指纹图谱相似度计算方法。 　　４、中药指纹图谱的快速处理方法。 　　５、建立中药指纹图谱鉴别计算方法体系。 　　[B]三、中药药效组分筛选及检测方法学[/B] 　　针对研究药材、方剂的功效和所涉及的有关作用靶位或靶点，开展从整体、器官、细胞和分子生物学等不同层次和水平药理学研究，寻找能够较准确反映方剂药效或功能主治，并具备快速、准确、样品用量小的活性筛选指标，在建立快速中药体内外组分检测方法的基础上，寻找中药的药效组分群，并建立中药药效指纹图谱，从而总结形成一套完整的中药药效组分快速筛选体系和方法。 　　１、中药药效组分靶细胞动态高密度培养技术和模型的建立。 　　２、中药药效组分细胞反应器计算机控制及在线检测的研究。 　　３、中药药效组分快速筛选方法关键技术研究。 　　４、中药复方体内组分的多指标检测方法学研究。 　　[B]四、中药指纹图谱组效学[/B] 　　在中药化学指纹图谱、药效物质成分鉴定和中药药效活性测定的基础上，充分利用现代化学与生物信息学研究的成果，开展指纹图谱信息与药效活性信息的相关性研究，以实现中药化学指纹图谱向中药药效组分指纹图谱的转化，从而建立中药指纹图谱组效学研究体系。 [B]五、中药指纹图谱质量控制 [/B]　　将中药指纹图谱应用于中药材的真伪鉴别及质量评价、中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价、中药新药开发研究。 　　１、中药指纹图谱在中药材的真伪鉴别及质量评价中的应用。 　　２、中药指纹图谱在中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价，提出采用中药指纹图谱来实现从药材、半成品到最终产品的全过程质量控制方法。 　　３、中药指纹图谱在中药新药创制中的应用研究。

高速逆流色谱法分离纯化丹参并尝试制订中药指纹图谱顾铭* 欧阳藩 苏志国（中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室，北京，100080）摘要 用国产高速逆流色谱（HSCCC）分离纯化中草药——丹参，选用正己烷-乙醇-水体系，固定相保留率达到78.8%。采用分步洗脱，3个产地丹参各分离得到12个洗脱组分，经高效液相色谱仪和紫外光谱仪检测证明3张HSCCC洗脱图谱中对应洗脱峰为同一组分。HSCCC洗脱图谱不包含非共有峰，并且对应洗脱峰保留时间的相对标准偏差RSD3%，符合国家标准关于制订指纹图谱方法学考察资料的技术参数。因此，HSCCC作为制订指纹图谱的方法之一具有可行性。关键词 高速逆流色谱（HSCCC），中药指纹图谱，丹参中图分类号 R917仪器TBE-300半制备型高速逆流色谱仪（深圳同田生化技术有限公司，中国）。聚四氟乙烯管缠绕在3个水平轴上形成螺旋管（管直径2.6mm，分离体积300mL），进样圈20mL。高速逆流色谱配备了柱塞式泵（S系列，北京圣益通技术开发有限责任公司，中国），紫外检测仪（8823A，北京新技术应用研究所，中国），记录仪（3057型，四川记录仪器厂，中国）。

中药指纹图谱理论和实际应用 罗国安 王义明 曹进 杨学东（清华大学药物研究所，北京，100084）http://www.cbcf.org.cn/jsjl/061.htm1. 引言中医药是中华古老文明的灿烂结晶，它为我国各族人民的身体健康作出了巨大贡献。随着科学的发展，中药现代化成为当前中药产业和新药研究领域的迫切需要，其关键科学问题之一是建立中药现代质量评价体系。中药指纹图谱是目前能够为国内外广泛接受的一种中药质量评价模式。作为中药质量控制方法，国内外对指纹图谱的研究方兴未艾。由于国情和传统的原因，不同国家的应用方法和思路有某些差异。日本把采用地道药材按饮片配方煎煮得到的煎汁作为标准提取物，标准提取物的指纹图谱即为标准指纹图谱，以此对生产的原料、配方和工艺作严格控制，使成品指纹图与标准指纹图谱一致。法国和德国的植物药制剂大多以"标准浸膏"投料，减少了以植物药为直接原料带来的不稳定性，然后严格控制生产工艺的各个过程，保证成药指纹图谱的稳定性。美国FDA也开始接受指纹图谱，在申报IND（Investigational NewDrug）的CMC(Chemistry ,Manufacture and Control)资料时，植物药物质（BotanicalDrug Substance）和植物药产品(Botanical Drug Product)的质量控制可以采用指纹图谱。此外，英国、印度以及WHO等都采用指纹图谱技术进行植物药（草药）的质量评价。在国外对植物制剂的指纹图谱研究中，主要是针对单味药材提取物而言，在植物制剂的整体性作用和药效相关性方面缺乏理论依据和相应的理论指导，并不适用于中药材及中药制剂的质量评价。 国内中药指纹图谱研究开始仅作为一种指纹性对比，用于鉴定中药材的种属。自从国家药品监督管理局对中药注射剂提出了建立质量控制指纹图谱的要求以后，开展了较多的指纹图谱研究工作，成为当前各方面关注的研究热点。近期在分析方法上使用了各种手段，如HPLC、GC、CE、IR等以及一些联用技术。但是研究仍处于起始阶段，对指纹图谱在质量控制方面的全面认识仍较为浅显，仅把它作为一种简单的质量鉴别项目，大多数研究者侧重于研究指纹图谱获取方法，缺乏理论深度。这样所建立的中药质量指纹图谱往往既缺乏方法学依据，又缺少足够的科学数据证明其可靠性。因此，尚存在许多关键问题，如中药指纹图谱的建立仅仅考虑其化学成分，没有以药效作为指纹性的依据。这极大地影响了中药指纹图谱的深入发展，并在一定程度上阻碍了中药走向国际的进程。因此，中药指纹图谱的研究是中药整体提升的关键，也是中药现代化的瓶颈，充分重视中药指纹图谱的应用，开展中药指纹图谱应用基础研究，将建立我国中药乃至创新药物的重要理论和实践基础。 2. 药指纹图谱理论及其重要意义我们认为，中药指纹图谱具有整体、宏观和模糊分析等特点，特别适应于中医药传统理论的需要。它是使用多学科交叉综合技术手段对复杂物质组成体系质量稳定性进行评价的计算机辅助分析检测方法，同时中药指纹图谱研究是分析科学、中药学、分离科学以及化学和生物信息学等二级学科（内含多个三级学科）交叉、综合应用的研究课题。因此需要多学科研究人员的协同攻关。目前为止，在中药生产和流通中，还没有一种质量控制手段能够全面的、综合的反映出中药产品的质量变异，可以有效地进行全过程的质量控制，中药指纹图谱的研究和建立正是为了解决药品质量控制和监督的这一关键问题而采取的一种方法。它从药材的生产、粗加工、贮存；制剂的原料、中间品、成品、流通样品等等各个角度和方面，进行中药样品的理化分析，通过相似性和相关性对比，发现质量变异和缺陷，从而全面、特异地把握住中药的质量命脉。另外，从中药新药的角度，中药指纹图谱又为之带来了一种崭新的研究模式，它从药材、成方入手，通过把握其中有效部位或有效组分的理化特性，直接将化学物质基础与药效相结合，形成既充分吸收中医用药理论精华，又蕴含现代药物活性特征，从整体综合的角度把握住了药物作用的针对性，为新药产生和快速筛选提供了思路和方法。具体的方面，中药指纹图谱是通过寻找有效部位或有效组分的图谱与活性效应之间的组效学特征来指导新药研究和筛选，它不同于西药研究中的药物构效关系，因为中药指纹图谱研究的是一个活性成分群的整体特性，而并不仅仅限于某个或几个成分；另一方面，也不同于较前提出的谱效关系，这里指纹图谱是直接针对有效成分群而设立的，而不仅仅限于物质成分的理化表征。因此从多维联用分析技术、药效检测和信息处理三个方面入手，多学科协同攻关，开展中药指纹图谱理论和实践研究，以发展形成先进实用的中药指纹图谱分析技术。从中药物质基础的角度出发，运用现代分离分析科学的手段，获取中药化学指纹图谱；并结合药效研究和相关物质成分的分离鉴定，经组效关系研究，获取中药有效组分指纹图谱；将中药化学指纹图谱和中药有效组分指纹图谱用于中药材、中间体和中药复方制剂的质量控制，以及药物创新等实践中。最终解决中药质量评价的科学性等中药质量关键科学问题，建立完备的中药质量评价体系，为中药走向国际市场、推进中药现代化事业的发展打下坚实的基础。3. 药指纹图谱的研究内容和实际应用3．1中药指纹图谱测试针对中药材、炮制品、饮片，以及各类中药复方制剂，研究不同的样品制备方法及有效组分的切割方法。运用包括色谱、光谱以及多维、联用分析技术，全面开展指纹图谱测试，建立具有普适意义的、规范化的中药指纹图谱。A、中药有效组分提取及分离方法研究及其规范化。B、色谱分离分析条件优化技术研究。C、多维、联用分析新技术方法学研究。D、指纹图谱中活性成分分析与鉴定。E、中药指纹图谱分析方法规范化研究。3．2指纹图谱鉴别方法研究A、中药指纹图谱化学特征信息的提取方法研究。B、同一分析方法不同检测方式及不同分析方法获得的多源检测数据间的相关性。 C、指纹图谱相似度计算方法。D、中药指纹图谱的快速处理方法。E、建立中药指纹图谱鉴别计算方法体系。3．3中药药效组分筛选及检测方法学针对研究药材、方剂的功效和所涉及的有关作用靶位或靶点，开展从整体、器官、细胞和分子生物学等不同层次和水平药理学研究，寻找能够较准确反映方剂药效或功能主治，并具备快速、准确、样品用量小的活性筛选指标，在建立快速中药体内外组分检测方法的基础上，寻找中药的药效组分群，并建立中药药效指纹图谱，从而总结形成一套完整的中药药效组分快速筛选体系和法。A、中药药效组分靶细胞动态高密度培养技术和模型的建立B、中药药效组分细胞反应器计算机控制及在线检测的研究C、中药药效组分快速筛选方法关键技术研究D、中药复方体内组分的多指标检测方法学研究3．4中药指纹图谱组效学在中药化学指纹图谱、药效物质成分鉴定和中药药效活性测定的基础上，充分利用现代化学与生物信息学研究的成果，开展指纹图谱信息与药效活性信息的相关性研究，以实现中药化学指纹图谱向中药药效组分指纹图谱的转化，从而建立中药指纹图谱组效学研究体系。3．5中药指纹图谱质量控制将中药指纹图谱应用于中药材的真伪鉴别及质量评价、中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价、中药新药开发研究。3．5．1中药指纹图谱在中药材的真伪鉴别及质量评价中的应用。3．5．2中药指纹图谱在中药制剂生产工艺全过程的质量控制和最终产品的质量评价，提出采用中药指纹图谱来实现从药材、半成品到最终产品的全过程质量控制方法。3．5．3中药指纹图谱在中药新药创制中的应用研究。4. 总结中药的质量一直是中药产业化进程中的一个瓶颈问题，同时随着中国进入WTO，中国的医药市场必然会受到来自全球医药大市场的冲击，直面困难，发挥中国本身具有的医药创新特色，走自己的路，发展具有现代化水平的，自主创新的新型医药研发和质量控制评价体系，是当今中国医药研究人员的目标和必然途径。 中药指纹图谱的提出和深入的研究，将为中药质量控制、中药产业化、中医药体系的研发提供素材和研究思路，为中药最终走向国际，成为保障人类健康的有益资源，发挥出自己应有的光和热。参考文献王义明,罗国安,曹进. 2002. 中药指纹图谱理论和实际应用.中药现代化杂志，待发表曹进，罗国安等. 2001.中药注射剂指纹图谱分析，世界科学技术--中药现代化3（4）：20罗国安，王义明，曹进. 2000.多维多息特征谱及其应用.中成药,22（6）：395罗国安，王义明. 1999.中药复方物质基础和药效相关性研究.世界科学技术-中药现代化杂志， (1):11-15罗国安，王义明. 1999.中药材的质量标准.中药研究与信息,(6):21-23罗国安，王义明. 1999.中药复方的化学研究体系.世界科学技术--中药现代化杂志, (1):16-19罗国安，王义明，饶毅. 2000.中药中成药现代化进

一）中药指纹图谱的定义、特点和分类 中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。 中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。 目前，中药指纹图谱技术已涉及众多方法，包括薄层扫描（TLCS）、高效液相色谱法（HPLC）、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法（GC）和高效毛细管电泳法（HPCE）等色谱法以及紫外光谱法（UV）、红外光谱法（IR）、质谱法（MS）、核磁共振法（NMR）和X—射线衍射法等光谱法。其中色谱方法为主流方法，尤其是HPLC、TLCS和GC已成为公认的三种常规分析手段。由于HPLC具有分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、应用范围广等特点；中药成分绝大多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测，且积累较丰富的应用经验。因此高效液相色谱法已成为中药指纹图谱技术的首选方法。随着HPLC— MS和GC—MS等联用技术的应用，中药指纹图谱技术更趋完善。 （二）中药指纹图谱建立的意义 中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，但现行的显微鉴别、理化鉴别和含量测定等方法都不足以解决这一问题，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。这也正好符合中医药整体学说。在此基础上，如果进一步开展谱效学研究，可使中药质量与其药效真正结合起来，有助于阐明中药作用机理。总之，中药指纹图谱的研究和建立，对于提高中药质量，促进中药现代化具有重要意义。 （三）中药指纹图谱研究概况 以指纹图谱作为中药（天然药物）提取物及其制剂的质量控制方法，已成为目前国际共识，各种符合中药（天然药物）特色的指纹图谱控制技术体系正在研究和建立。美国食品药品管理局（FDA）允许草药保健品申报相关信息中提供色谱指纹图谱；世界卫生组织（WHO）在1996年草药评价指导原则中也规定，如果草药的活性成分不明确，可以提供色谱指纹图谱以证明产品质量的一致；欧共体在草药质量指南中亦称，单靠测定某种有效成分考查质量的稳定性是不够的，因为草药及其制剂是以整体为活性物质。色谱指纹图谱尤其是薄层色谱的鲜明的指纹图谱是很有用的。国外指纹图谱的应用，目的在于解决成分复杂，有效成分不明确的植物药质量检测和产品批次间质量差异的问题。其中德国研制的银杏叶提取物制剂是一个突出的例子。他们应用指纹图谱制定了相应的标准，该图谱体现了制剂所含的33个化学成分（主要为黄酮类和内酯类）和各自的含量。经化学成分和药效相关性研究，发现约24%银杏黄酮和约6%银杏内酯组成的提取物具有最佳疗效。此外，采用“混批勾兑”法，可使最终产品质量稳定，指纹图谱重现性良好，含量浮动范围为5%左右。 20世纪70年代我国已有学者尝试使用TLCS对中成药进行分析，因主客观条件的限制，技术和时机的不成熟，没有得到公认；20世纪90年代《中国药典》增设了中药化学对照品和对照药材，为中药指纹图谱的研究奠定了基础。随着色谱技术的迅速发展和检测能力的显著增强，为指纹图谱的研究和应用提供了良好的技术保证。目前我国已对中药注射剂做出了必须用指纹图谱进行检测的规定，同时提出了具体的技术要求；在中药材规范化生产实施过程中指纹图谱亦有较广泛的应用。 但是作为一项新技术，中药指纹图谱在实际应用中还面临许多问题，只有进一步加强中药材种植加工和中成药生产贮存的规范化；中药化学成分和中药药理研究的系统化和标准化；以及技术上多学科的渗透，才能保证中药质量的稳定，进而保证中药指纹图谱的建立

一、什么是指纹图谱 指纹图谱是指中药材〔或中成药)经过适当的处理，应用一定的分析手段所得到的能够标示该药材(或成药)特性的共有峰的图谱。形象讲，指纹图谱就是中药的身份证，该药材(或成药)的主要化学信息都能体现在指纹图谱上，指纹图谱使中成药一药一图，决不棍淆。指纹图谱是目前控制中药真伪，保证质量稳定世界所公认的一种手段。 中药指纹图谱，包括中药材和中成药两类指纹图谱，中成药现阶段只要求注射剂做指纹图谱。

中药是中华民族的宝贵财富，它的疗效已为世人所瞩目。然而众所周知在我国中药材的质量极不稳定，市场也较为混乱。中药的质量问题已成为中药现代化、国际化的一大障碍。 多年以来中药材质量控制基本上是以传统的性状鉴别和显微鉴别确定真伪，以理化鉴别评价优劣。前者属于定性分析且需要鉴定者具有丰富的实践经验，人为影响因素较大，后者只考虑众多复杂成分中的个别“活性成分”，而忽略了中药材诸多成分间的协同作用。随着现代分析技术的发展，把已知的主要或有药效作用的成分，作为指标予以检测控制，比过去有了很大进步．但是从传统中医药理论的观点来看，指标成分的控制难以真正控制中药的质量。国际上已认可用中药指纹图谱来作为控制中药质量的质控模式。用中药指纹图谱监控中药质量，并不要求指纹图谱中的每一个组分都清楚，也不要求对每一个组分都精确测定，但要求图谱具有指纹特征，即要求专属、稳定、实用。中药指纹图谱研究包括中药材或中成药指纹图谱的获得和指纹图谱的分析、应用两方面。本文以近年来国内外在指纹图谱的构建和解析方面的研究为材料，综述了构建和解析指纹图谱的各种方法，并比较了它们的适用范围。 1指纹图谱的构建 目前获得指纹图谱的主要手段是色谱法和光谱法，其中比较常用的有以下几种 1．1 薄层色谱法 薄层色谱法常用于中药中各种成分的鉴定。薄层扫描图谱比目测的层析图谱更为客观准确，具有更好的指纹鉴别意义。运用薄层扫描法已获得了黄连、黄芩等中药的指纹图谱，还获得了高良姜中黄酮类成分的指纹图谱，同时薄层扫描法还可用于成药的分析，如六味地黄丸中各味药的鉴定。但由于薄层板的质量和开放式层析系统等外界因素的影响，会引起一定的实验误差。 1．2 高效液相色谱法 高效液相色谱法是构建指纹图谱的主要方法之一。由于中药成分的复杂性，构建指纹图谱一般采用梯度洗脱，因为逐步提高流动相洗脱能力可获得较多色谱峰，提供更多指纹信息。 配置紫外检测器的高效液相色谱在指纹图谱构建中较为常用，如贾晓斌等采用梯度洗脱制定了复方人参注射液的指纹图谱；赵燕燕等进行白茅根氯仿提取液的指纹图谱研究，由指纹图谱可判定其正伪，但对目前所知的白茅根药材中保肝利尿的主要有效成分葡萄糖和钾盐则无法检测，因此其指纹图谱只能用于定性鉴定其正伪，而不能确定其质量的优劣。应用光电二极管阵列检测器(DAD)构建指纹图谱的研究也较多，如黄芩中黄酮类成分指纹图谱的确定；侯艳鹏等在不同来源旋覆花药材指纹图谱研究中还发现仅比较色谱峰的保留时间是不够的，还需校对峰的紫外光谱是否一致。对于无紫外吸收的中药或其制剂可改用其它检测器，如蒸发光检测器(ELSD)等。如注射用七叶皂甙钠用HPLC分离，用ELSD检测，得到的指纹图谱直观准确地反映了产品质量，但ELSD的使用受样品组分和流动相挥发性的影响。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]技术可提供大量信息，符合解决中药复杂体系的要求，已用于指纹图谱的构建中，如桂枝汤A部分指纹图谱的确定及比较；张尊建等采用HPLC-UV-MS法对丹参药材、丹参注射液中间体及丹参注射液进行指纹图谱研究，得到了分离度好的指纹图谱。但由于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url]价格昂贵，推广应用有一定的困难。 液相色谱具有重现性好、稳定性好的优点，适宜于构建指纹图谱。由于药材和成药不能直接进样，需经提取纯化，在考察条件时要避免只对“指标成分”予以考虑，而忽视“非指标成分”，对于中药注射剂应尽量采用直接进样、梯度洗脱，以避免上述偏差。又由于药材中各种成分的吸收波长及对不同检测器的响应不同，在构建指纹图谱也需要加以考察。 1．3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法适合于挥发性药材及制剂的指纹图谱研究。构建指纹图谱时一般使用质量型检测器—氢火焰离子化检测器(FID)。苏薇薇等对中成药乌鸡白凤丸石油醚提取物进行了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析，获得的指纹图谱可作为乌鸡白凤丸质量评价的标准。钱浩泉等用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法建立了高良姜及其近缘植物挥发油成分的指纹图谱。赵陆华等用挥发油提取器对降香进行提取，用十四醇为内标，建立了降香药材的指纹图谱。在中药复方制剂上，冯毅凡等对华佗再造丸及其主要药味的石油醚提取液进行了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析，获取其[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]指纹特征，可作为成药及其原料药真伪鉴别的依据。而GC-MS联用，不仅具有GC的高分离效能，而且兼备了MS鉴定的高灵敏性和准确性。苏薇薇等对45个细辛样品进行了GC-MS分析，经PRIMA法处理，实现了计算机对多种细辛的分类鉴别；魏刚等采用GC-MS法对不同产地广藿香、组织培养广藿香以及超临界提取广藿香、广藿香对照品共21个样品进行主成分分析，并建立了指纹图谱。 1．4毛细管电泳技术 毛细管电泳已用于中草药中生物碱、黄酮／黄酮苷、酚酸、香豆素、醌类、强心苷、葡萄糖异硫氰酸盐等物质的分析。龙虹等报道了金银花、银黄口服液和双黄连的毛细管电泳图谱，均含较多未知峰，指纹特征好；赵霞等以毛细管区带电泳模式，用内标法分析了9种贝母药材中生物碱的含量；王刚力等采用HPCE的MECC分离模式对18个卷柏属植物样品的乙酸乙酯提取物进行测定，建立了18个样品的指纹图谱。由于指纹图谱构建中样品的预处理以获得尽量多的指纹特征为前提，而毛细管电泳可以对大小分子、解离非解离分子同时分析，故适宜中药指纹图谱构建。 1．5红外光谱法 红外光谱法研究指纹图谱可用于药材鉴定，如甘草、延胡索与全叶延胡索、苍耳子与东北苍耳子、粉葛与野葛等药材的鉴别。红外光谱法还用于成药的鉴别，如田进国等对同仁乌鸡白凤丸与消栓再造丸红外指纹图谱的研究，结果两样品都具有独特而稳定的红外指纹图谱，可作为质量控制和真伪鉴别的依据。矿物类中药可直接压片测定其红外光谱，禹余粮有褐铁矿结核和普通褐铁矿两种，两者的化学成分相同，光学性质相似，而其红外光谱有很大区别。红外光谱是由分子的振动—转动跃迁引起的，确定其专属性和特征性有较大困难。 1．6紫外光谱法 紫外光谱是电子光谱，形状变化不大，有时不同的化合物有相似的图谱，专属性差。故紫外光谱法较少应用于指纹图谱的构建中。 1．7分子生物学方法 不同生物体有各自相对稳定的DNA序列，因而可以利用现代分子生物学技术构建DNA指纹图谱。限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)技术和随机扩增多态DNA(RAPD)是目前最常用的构建DNA指纹图谱的方法。但RFLP技术繁琐，要求的DNA量大，实验材料必须新鲜，因此其应用受到限制；而RAPD法可以在特异DNA序列尚不清楚的情况下检测DNA的多态性，具有灵敏度高、多态性强的优点，同时分析的是基因型而非表现型，结果不受材料来源、环境因素、样品形态等影响，为干燥药材鉴定提供了更加准确的手段。罗志勇等E361采用RFLP技术，分析了人参、西洋参基因DNA指纹图谱。刘塔斯等采用RAPD方法对3个产地玉竹及其2种混淆品进行分析，准确区分了正品与混淆品。但RAPD法的重复性差等问题引起了许多争议。而且，色谱法与DNA指纹图谱相比其优点在于：不但有特征的体现(各种化学成分的个数和相对位置一保留时间)可作定性鉴别使用，还可体现量的概念。 2指纹图谱的解析 对两张色谱指纹图谱仅靠人们的主观比较很难客观、公正、科学地判断它的相同、相似或不同，往往由于人为的主观误差可能做出不同判断，缺乏科学的评判标准。

高速逆流色谱法分离纯化丹参并尝试制订中药指纹图谱顾铭* 欧阳藩 苏志国（中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室，北京，100080）摘要 用国产高速逆流色谱（HSCCC）分离纯化中草药——丹参，选用正己烷-乙醇-水体系，固定相保留率达到78.8%。采用分步洗脱，3个产地丹参各分离得到12个洗脱组分，经高效液相色谱仪和紫外光谱仪检测证明3张HSCCC洗脱图谱中对应洗脱峰为同一组分。HSCCC洗脱图谱不包含非共有峰，并且对应洗脱峰保留时间的相对标准偏差RSD3%，符合国家标准关于制订指纹图谱方法学考察资料的技术参数。因此，HSCCC作为制订指纹图谱的方法之一具有可行性。关键词 高速逆流色谱（HSCCC），中药指纹图谱，丹参中图分类号 R917仪器TBE-300半制备型高速逆流色谱仪（深圳同田生化技术有限公司，中国）。聚四氟乙烯管缠绕在3个水平轴上形成螺旋管（管直径2.6mm，分离体积300mL），进样圈20mL。高速逆流色谱配备了柱塞式泵（S系列，北京圣益通技术开发有限责任公司，中国），紫外检测仪（8823A，北京新技术应用研究所，中国），记录仪（3057型，四川记录仪器厂，中国）。*通讯作者。Tel: 86-10-82627061；Fax: 86-10-62558174；E-mail: rainbow_gm@sina.com

中药指纹图谱是指 某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。 目前，中药指纹图谱技术已涉及众多方法，包括薄层扫描（TLCS）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和高效毛细管电泳法（HPCE）等色谱法以及紫外光谱法（UV）、红外光谱法（IR）、质谱法（MS）、核磁共振法（NMR）和X—射线衍射法等光谱法。其中色谱方法为主流方法，尤其是HPLC、TLCS和GC已成为公认三种常规分析手段。由于HPLC具有分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、应用范围广等特点；中药成分绝大多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测，且积累较丰富的应用经验。因此高效液相色谱法已成为中药指纹图谱技术的首选方法。 中药指纹图谱1、可以鉴别药材的真伪2、考察商品药材及成药的质量3、区分药材不同部位4、追踪制剂工艺过程及某些化学成分变化5、监测原料与成品之间、成品批间质量的一致性和稳定性 随着现代分析技术的发展，指纹图谱技术是当今国际公认的控制中药质量的质控模式。它能从原药材的栽培、引种，中成药生产工艺的规范与优化，到产品质量标准的制定提供全方位的质量保证。近年来国外对草药产品的质量评价也在提倡指纹图谱随着各种分析技术的创新和提高以及计算机应用技术的不断发展，世界各国对天然药物的了解和研究在不断深入，中药指纹图谱技术在国内外已成为一种发展趋势,其研究的方法和技术更趋成熟完善，成为国际公认的控制中药和天然药质量最有效的方法和手段。

近日，我国海事系统设计尺寸最大、溢油回收能力最强的专业化溢油回收船“海巡041”轮在湖北武汉成功下水。[img=1.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202402/wycimg/4c5bbeb7-1b55-4d88-a229-bf3ed3e8e9cc.jpg[/img][align=center]图源：中国海事[/align]记者了解到，“海巡041”轮肩负着维护海洋清洁、处置海上溢油的重要使命，成为集溢油收回、应急值守和综合指挥功能为一体的海上应急指挥平台，可应对大规模海洋污染事故。按照计划，该船将在今年6月下水列编，建成后将进一步提升全国海事系统船舶污染监视监测和溢油应急处置能力。近年来，随着海洋石油开发、船舶运输及沿海石油化工业的迅速发展，海上溢油等突发环境事件多发，严重威胁海洋及海岸带生态环境的安全。而海洋环境中的溢油来源主要有海域采油、海上运油、陆源漏油，以及沉船等其他因素。[color=#ff0000]那么，当海上发生溢油事故时，如何识别并判定溢油来源呢？记者就此采访了国家海洋环境监测中心高级工程师刘星。[/color][align=center][img=2.png]https://img1.17img.cn/17img/images/202402/wycimg/bc464876-1d01-4eba-9843-cdb8a4e29f28.jpg[/img][/align][size=18px][color=#ff0000]海上溢油可依据“油指纹”溯源[/color][/size]“我们知道公安可以依据指纹锁定嫌疑人，执法人员可以依据水质指纹找到水体污染源，而海上溢油也可以根据‘油指纹’查找污染来源。”刘星告诉记者。如何分析溢油样品，鉴别出相应的“油指纹”，成为锁定溢油“真凶”的关键。而刘星所做的工作便是对“油指纹”进行分析与鉴定。油品的基本组成元素是碳和氢，碳含量约占83%—87%，氢含量约占11%—14%；还有少量的硫、氧、氮等非金属元素和镍、钒、铁等金属元素。“不同条件或环境下产出的油品具有明显不同的特征，通过各种分析检测手段获得油品化学成分的光谱、色谱信息，可反映油品的组成特征和化学特征，而光谱、色谱图的复杂性如同人类指纹一样具有唯一性，故称为‘油指纹’，这也是油指纹分析理论的基础。”刘星继续介绍，通过将溢油油品的“油指纹”与油指纹库中的数据信息进行比对鉴定，即可判定溢油油品种类和来源。而“油指纹库”则是利用统一的分析方法获取的油品化学组成信息数据库。“一般来说，油指纹库收录的样品信息越多，覆盖面越广，鉴别成功率越高。”[img=3.png]https://img1.17img.cn/17img/images/202402/wycimg/232d111d-e4d3-4ef6-89ce-863bc3abd1cc.jpg[/img][align=center]刘星供图[/align]刘星介绍，针对多次海上溢油污染，通过油指纹鉴定及时完成了海面溢油来源的判断分析。“2022年，我们还使用油指纹库对某海域无主漂油进行检索，大幅缩小了可能来源的调查范围，为执法人员登检巡查提供了明确方向。”此外，刘星补充道，“通过油指纹分析与鉴定不仅可以缩小调查对象范围，确定溢油来源，确定责任归属，为事故调查处理提供科学依据，还可以为溢油环境损害评估提供参考。通过研究油品风化和降解周期，可推断溢油对环境的影响时间；通过组分分析和生物毒性试验，可判断溢油对环境生物和生态的影响程度。”[size=18px][color=#ff0000]油指纹库已基本全覆盖所有石油平台[/color][/size]作为提升海上溢油事件应急响应能力的重要内容之一，2019年，生态环境部与中国海洋石油集团公司建立战略合作，由国家海洋环境监测中心负责建设覆盖全海域的国家海洋石油勘探开发油指纹库，完善海洋环境应急响应能力。中国石油、中国石化、中国海油积极配合涉海石油平台原油样品采集。截至2023年12月，已累计接收3222个原油样品。其中，中海油1426个、中石油584个、中石化1212个。已初步完成对石油平台的全覆盖，已分析原油样品入库工作同步进行，为相关来源的油指纹分析奠定基础。“没有这些原油样品，后期的分析溯源工作也无从开展。”刘星告诉记者。原油样品的分析尤为重要，而当海上发生溢油事故时，溢油样品采集也更为重要。采样工作听起来简单，但实际困难重重。如何能在短时间内完成油品采样，这考验着现场应急人员的能力。应急人员赶赴溢油现场后，对溢油区域及外围海域进行走航采样，“采集的溢油样品应覆盖不同的溢油区域和风化状态，应采集所有可疑溢油源样品，且采样过程需避免样品受到溢漏或储存环境、采样器具、样品容器及其他可能的人为污染。”刘星介绍。由于油指纹分析需依靠大型分析仪器，目前采集的油样无法在现场得出分析结论。“当某海域发生溢油事故时，采集的溢油样品需送至国家海洋环境监测中心，也就是我们实验室这里进行检测分析。”刘星讲述，“国家海洋油指纹库已规划远程鉴定功能，未来可结合沿海各地相关能力，实现不同海域溢油样品的在线分析。”[size=18px][color=#ff0000]加强国家级油指纹库建设，提高应急响应速度[/color][/size]2024年全国生态环境保护工作会议提出，加强海洋生态环境保护的基础能力建设，其中就包括油指纹库建设和溢油鉴别技术的推进。刘星提到，未来的工作重点将放在提高油指纹分析的准确性上，这需要开发抗干扰能力更强的分析方法。同时，引入基于大数据和人工智能的机器学习方法，以优化油指纹鉴别技术。油指纹库包含大量原油基础数据，基于大数据和人工智能的机器学习方法在科研领域广泛应用，如何在油指纹鉴别技术中引入上述技术是未来需要考虑的主要发展方向。一是国家级油指纹库建设仍需加强，在进一步丰富补充石油勘探开发平台油样的基础上，推动对进口原油、船用燃料油等源头进行分析入库，持续推进不同油品的指纹比对工作，提高应急响应速度。二是提升标准化建设和技术能力，逐步健全油指纹库建设相关技术规范，积极研发相关标准物质、标准方法等工具包，应用云数据和区块链技术构建智能溢油鉴别系统，基于最新分析设备开发油指纹检测方法，不断提升溢油鉴别技术研发与应用水平。三是加强油指纹鉴别领域合作交流，逐步建立在海上石油勘探开发、船舶运输、原油炼化等领域油样获取及相关信息的共享机制，及时更新和扩展油指纹库，积极参与溢油鉴别国际合作交流，推动相关方法的国际比对等事宜。总而言之，海上溢油事故的及时有效应对，离不开科学准确的“油指纹”分析和不断完善的油指纹库建设。通过提升标准化建设和技术能力，强化国内外合作交流，我们能更好地保护海洋环境，维护生态安全，确保公共利益不受溢油事故的威胁。参考文献：中国环境APP. 海上溢油如何溯源？“油指纹”了解下！[size=14px][color=#707d8a][ 来源：我要测 ][/color][/size][size=14px][color=#707d8a][i]编辑：涂润林[/i][/color][/size]

最近做了很多指纹图谱方面的工作，做过单味药材的，也做过大复方中药的，单味药材的一般比较简单，很多都有很成熟的方法，即使没有，新建一个方法也比较容易，但是复方中药一般很少有成熟的方法，所以很多条件下都需要自己建立，复方中药往往成分复杂，不但成分数量多，种类也很多，这给建立一个好的方法带来了一定的难度！ 那么，到底何谓指纹图谱？什么样的指纹图谱才符合要求？做指纹图谱的样品应该怎样前处理呢?! 首先，我们看看其定义：中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。 从定义中可以看到几个要点：1.样品经适当处理，2.“整体性”3.“模糊性”。后两个是指纹图谱的特点，可以理解为其虽然可以整体地反应出样品，但这种反应又是较为模糊的！而第一个要点，在很大程度上决定了指纹图谱的结果，因为处理方法直接决定了最后样品中的成分！ 所以，适当的处理样品成了指纹图谱的关键！那么，我们到底应该怎样对样品进行前处理呢？是尽可能全面地反应样品的成分呢？还是通过一些方法除去一些非特征性成分以获得良好的分离度和尽量短的分析时间？那又什么样的才是特征性成分（含量大的往往并非药材中的有效成分）？ 欢迎大家赐教、讨论，我们共同学习！

红外光谱在中药指纹图谱中的应用一直不被人们所重视，原因有很多，但我觉得主要是由于传统观念认为红外光谱的专属性差而不足以起到鉴别真伪的作用。在这里我想谈一下现阶段的理论突破，希望能引起足够的重视。中草药的发展历史是以中国药剂学独特的、内在的整体理论为基础的，它倡导的是药物的总体治疗效果。因此，研究药物的单一成分不足以判断药物的功效。像质谱和HPLC等现代分析手段已经大大促进了中药鉴定和区分药物有效成分的能力。然而这些技术的应用往往只着眼于特定化学成分的研究，因此违背了将存在相互作用的多种成分混合在一起来分析的整体观念。20世纪80年代后期曾出现过红外光谱法鉴别中药的某些报道，但由于光谱总体解析知识的贫乏、思路上的保守和缺乏交叉学科的相互渗透，其进展并不显著。。20世纪90年代后期以来，出现了将红外光谱法与计算机辅助解析技术有机的结合应用于中药鉴定的若干报道。二维相关红外分析通过交叉计算获得高分辨的“指纹图谱”作为中药宏观质量判别的依据。虽然各种中草药常常都是由数以百计的成分所组成，但由于各自所含化合物的组成不同，各种化合物的比例也有差异，其红外指纹图谱就不可能相同。将红外光谱技术应用于中药的全面质量控制是一种思路上的创新。今后我将就红外光谱在中药（包括药材和制剂）指纹图谱研究中的应用作更多的论述，希望大家能踊跃交流。红外指纹图谱反映的是中药整体质量信息，体现了中药作用的整体性和模糊性。由清华大学化学系分析中心孙素琴副教授等所承担的国家中医药管理局中医药科技重大项目"中药材光谱法快速检测系统的研究"，于2月9日在北京通过了由国家中医药管理局组织的专家组验收。　　该课题组首次将经典的红外光谱法进行了深层次拓展，创建了中药红外宏观指纹方法，并对野生与栽培、不同产地、不同生境、不同药用部位及不同等级的白芷和丹参药材的735个样品直接进行了分析测试。实验结果表明，在相对保证药材的真实性、道地性和代表性的前提下，凭借红外光谱法的可重复性和可靠性等特点，采用对各种中药材不经分离提取而直接进行检定，并以强有力的计算机辅助解析技术和模式别系统，对来自不同产区的栽培白芷样品的近红外谱图和中红外谱图进行模式识别系统分析研究，达到了分类识别的目的，且识别率达到了90％。同时对来自六省的栽培丹参样品和3省的野生样品进行模式识别系统研究，同样达到了分类识别的目的，对野生与栽培的丹参样品识别率也达到了90％。此外，该课题组还对280种中药材、400多种中药配方颗粒以及20种中药注射剂进行了较为深入的系统研究和分析，大量的实验数据证明，每一味中药，正如每个人都有指纹而且指纹各不相同一样，即具有一定的相似性，又显示出自身的特性。借助与计算机和模式识别技术，可以将中药的特性描绘出来，使每味中药都拥有如人的指纹一样的标准图谱。 根据这些标准谱图，可鉴别药材的道地性、生长环境；并可针对不同生产批次和不同生产厂家的同一产品在物质组成上的差异性评价其真伪优劣，从而非常直观地进行鉴定、鉴别与质量控制。　　专家们一致认为：该课题组经过攻关所建立的无需对中药进行提取分离等繁杂的化学处理而直接进行红外光谱分析检测的方法是目前中药材及其制剂最直接、快速、准确的鉴定鉴别和质量控制方法。该方法强调中药的整体性，不丧失其原本性、配伍性，符合中药中医辩证施治原则，以综合的、宏观的、非线性的分析理念和质量控制模式来评价中药的真伪优劣，以一定的量化指标（辅料的添加量或中药的特征峰峰强比）评价中药产品的稳定性和一致性，基本解决了质量标准化的问题。在现代中药宏观质量（整体）控制技术上取得了重大突破，为中药内在质量的宏观可控建立了一个适用性很强的监控方法。 浙江大学的程翼宇教授也做了相关的研究

转载：红外光谱在中药指纹图谱研究中的应用红外光谱在中药指纹图谱中的应用一直不被人们所重视，原因有很多，但我觉得主要是由于传统观念认为红外光谱的专属性差而不足以起到鉴别真伪的作用。在这里我想谈一下现阶段的理论突破，希望能引起足够的重视。中草药的发展历史是以中国药剂学独特的、内在的整体理论为基础的，它倡导的是药物的总体治疗效果。因此，研究药物的单一成分不足以判断药物的功效。像质谱和HPLC等现代分析手段已经大大促进了中药鉴定和区分药物有效成分的能力。然而这些技术的应用往往只着眼于特定化学成分的研究，因此违背了将存在相互作用的多种成分混合在一起来分析的整体观念。20世纪80年代后期曾出现过红外光谱法鉴别中药的某些报道，但由于光谱总体解析知识的贫乏、思路上的保守和缺乏交叉学科的相互渗透，其进展并不显著。。20世纪90年代后期以来，出现了将红外光谱法与计算机辅助解析技术有机的结合应用于中药鉴定的若干报道。二维相关红外分析通过交叉计算获得高分辨的“指纹图谱”作为中药宏观质量判别的依据。虽然各种中草药常常都是由数以百计的成分所组成，但由于各自所含化合物的组成不同，各种化合物的比例也有差异，其红外指纹图谱就不可能相同。将红外光谱技术应用于中药的全面质量控制是一种思路上的创新。

关于元素指纹技术，我看了一些介绍,不过不是太明白,他的指纹依据是什么?也就是说他检测的什么东西是指纹.

全世界几十亿人中，还没有发现相同的指纹.。人出生后至6个月，形成 完整指纹而至死不变。因此指纹显示是刑侦破案的重要手段。罪犯作案时留下的指纹印是无法用肉眼看出的，但指纹印上总会留下手指表面化的微量物质，如油脂、盐份和氨基酸等。由于指纹凹凸不平，其微量物质的排列与指纹呈相同的图案。因而只需检测这些微量物质，就能显示出指纹。一、碘蒸气法：用碘蒸气熏，由于碘能溶解在指纹印上的油脂之中，而能显示指纹。这种方法能检测出数月之前的指纹。二、硝酸银溶液法：向指纹印上喷硝酸银溶液，指纹印上的氯化钠就会转化成氯化银不溶物。经过日光照射，氯化银分解出银细粒，就会象照相馆片那样显示棕黑色的指纹，这是刑侦中常用方法。这种方法可检测出更长时间之前的指纹。三、有机显色法：因指纹印中含有多种氨基酸成份，因此采用一种叫二氢茆三酮的试剂，利用它跟氨基酸反应产生紫色物质，就能检测出指纹。这种方法可检出一、二年前的指纹。四、激光检测法：用激光照射指纹印显示出指纹。这种方法可检测出长达五年前的指纹。五、将铅笔芯磨成极细的粉末，用软毛笔轻轻地刷在要显示指纹的地方，也可以显示出来的哦，只是要显示的指纹不能相隔时间太长了。

非线性化学指纹图谱智能分析仪是属于光机电一体化领域的高性能智能化仪器仪表/科学分析检测仪器中特定领域的专用仪器。本项目的关键技术是：一种基于非线性化学反应理论、利用不同化学成分对非线性化学反应的不同影响、通过测定化学反应体系的非平衡信号来获取复杂样品图谱实现定性鉴别和定量分析的技术;智能分析的软硬件设计技术;智能分析的检测条件优化技术。项目产品采用了高性能的精密恒温电极传感系统和微机技术，主要由精密恒温系统、非线性化学反应系统、搅拌系统、配以自行设计制作的精密恒温电极的电位检测系统、数据采集转换系统和微机系统等组成，使得项目产品性能稳定、结构合理、实用简便、快速、准确度高。

[size=16px][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]目的[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333] 采用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url](HPLC)法建立50批紫草药材指纹图谱及6个成分含量测定方法。 [/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]方法[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333] 采用HPLC法对50批紫草进行测定,采用Agilent 5 TC-C[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]18[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333](2)色谱柱,以乙腈-体积分数0.05%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1 mLmin[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]-1[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333],检测波长275 nm,柱温30 ℃,并对左旋紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素、[/color][/font][i]β[/i][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰阿卡宁和[/color][/font][i]β,β′[/i][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]-二甲基丙烯酰阿卡宁等6个萘醌类成分进行含量测定。采用HPLC指纹图谱检测并结合“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)”建立紫草药材的指纹图谱,进行相似度评价和共有峰确认。 [/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]结果[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333] 方法学结果表明,6个成分在相应的浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,6个成分的含量分别为0.006%~0.237%,0.009%~1.759%,0.001%~0.129%,0.002%~0.625%,0.011%~609%,0.016%~1.712%,建立了紫草HPLC指纹图谱,共标定了9个共有峰,采用中药指纹图谱软件进行相似度拟合,发现50批紫草的相似度差异较大。 [/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333]结论[/color][/font][font=Arial, 'Microsoft Yahei'][color=#333333] 该研究建立的紫草HPLC指纹图谱和同时测定6个成分含量的方法简便、稳定、准确可靠、重复性好,可为紫草药材的质量研究提供参考依据。[/color][/font][/size]