质谱细菌仪

生物质谱在鉴定细菌方面的特点有哪些，希望得到指点！

生物质谱在鉴定细菌方面的特点有哪些，希望得到指点！

[color=#444444]请问样品该怎样制备呢？用什么培养基来培养细菌？质谱是不是不能进盐？谢谢大家！[/color]

我想做光合细菌的拉曼光谱。看了文献，发现关于光合细菌中细菌叶绿素的拉曼光谱研究很少，都是年限很久以前的。。想问一下，细菌叶绿素不容易做拉曼光谱呢？有什么特征的拉曼光谱吗

大家是用什么方法抑制色谱柱内的细菌生长？

[color=#444444]我想做水样里所有可培养细菌的鉴定分型，请问用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]可不可以啊？[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]做细菌的鉴定分型可以做到什么程度？比如说属、种、亚种？[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法在这方面比生化检测有什么优势?大家要帮帮我啊[/color]

一、细菌的分布： 微生物种类繁多，繁殖迅速，分布广泛，不论自然界的空气、土壤、水，生活中的食物、各种物体和器械表面，以及动物和人的皮肤粘膜、与外界相通的腔道中都广泛存在着数量极其庞大的各种微生物，其中以细菌、放线菌最多。因此，了解微生物在自然界及正常人体的分布，对于在医疗实践及某些科学实验中树立无菌观念有着重要的意义。 （一）空气中细菌的检查（设计性实验选题） （二）水中细菌的检查（设计性实验选题） （三）人体皮肤表面细菌的检查（设计性实验选题） 【附录】细菌菌落的计数方法 ①选择生长均匀，无片状菌苔生长的平皿观察。一般先用肉眼观察，用记号笔在平板底上进行点数（以免遗漏），然后再持放大镜检查有无遗漏的微小菌落。 ②如菌落多而密集，可用分区法或菌落计数器计数。分区法是用记号笔在平皿底部通过圆心做垂直线，分为http://www.bbioo.com/bio101/UploadFiles/200611/20061113123705956.gif四区，再分别选择菌落密集和稀疏的两个区，再做平分线，使每一小区为平皿面积的1／8 或1／16，然后再分别挑选菌落稀疏和密集的两小区 进行计数，所得数乘以8或16，即为该平皿的菌落总数。（图４-1） ③简易的菌落计数器是一块玻璃板上刻划有144个面积为1平方厘米的正方形小格。将长有菌落的培养皿放上，计算10个小方格内的菌落数，如为30个，则平均1小方格为3个菌落。若培养皿直径是9厘米，则半径为4.5厘米，整个培养皿上的菌数是3个×3.1416×（4.5）2=191个菌落。二、外界因素对细菌的影响微生物和外界环境有密切的关系，当外界环境适宜就能进行正常的新陈代谢生长繁殖；当外界环境条件发生巨大改变，可导致微生物的主要代谢活动发生障碍，生长停顿，甚至死亡。在医学上常用人工的方法造成对微生物不利的环境，来抑制或杀灭微生物，以达到消毒灭菌的目的。其方法大致可分为物理、化学和生物三大类。 （一）物理因素对细菌的影响 1、温度对细菌的影响2、紫外线杀菌试验 （二）化学因素对细菌的影响 化学消毒剂的杀菌作用（三）生物因素对细菌的影响 噬菌体的特异性裂解细菌试验 【材料】大肠杆菌、痢疾杆菌的肉汤培养物、痢疾杆菌噬菌体、普通肉汤、普通琼脂平板。 【方法】 （1）将琼脂平板划分成三等份，注明1、2、3。 （2）分别以接种环取菌后，在1、3处涂布痢疾杆菌，2处涂布大肠杆菌。http://www.bbioo.com/bio101/UploadFiles/200611/20061113123903343.gif（3）分别沾取一接种环的痢疾杆菌噬菌体加于1、2处中央，（注意不要交叉污染），另取一接种环的肉汤放于3处中央。 （4）置37℃孵育24小时后取出，观察噬菌斑出现的位置（见图4-2），并记录之。 （四）细菌对抗生素的敏感性试验---纸片扩散法 　　又称Bauer-Kirby法。是将干燥的浸有一定浓度抗菌药物的滤纸片放在已接种一定量某种细菌的琼脂平板上，经培养后，可在纸片周围出现无细菌生长区，称抑菌圈。测量抑菌圈的大小，即可判定该细菌对某种药物的敏感程度。体外药敏结果可作为病人治疗选用药物的参考。 【材料】金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌18～24小时培养物、普通琼脂平板、小镊子；含有青霉素、庆大霉素、红霉素、复合磺胺、链霉素等抗生素的干燥滤纸片。 【方法】 （1）将金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌培养物密集均匀地涂布整个平板。 （2）将含有抗生素药物的滤纸片用烧灼灭菌的镊子分别贴于平板表面，相互间应间隔一定距离。 （3）37℃培养24小时后，观察结果。 【结果】 根据药物纸片周围抑菌圈直径的大小来判断该菌对各种药物的敏感程度。判断标准见表4-1 （五）中草药对细菌的抑菌作用测定

[size=4] 我们对现今应用较为普遍的VITEK-AMS鉴定系统中报告“不能鉴定细菌”(UIO)菌株作了进一步分析，探讨其发生原因、处理方法，以期建立一套切实可行的仪器与手工方法相结合的细菌鉴定方法。[/size][size=4]　　[b]一、材料与方法[/b][/size][size=4]　　1. 仪器与试剂：VITEK-AMS 60型全自动细菌鉴定仪及其配套GNI、GPI、YBC试验卡（生物梅里埃公司产品)。[/size][size=4]　　2. 试验菌株：1 025株本院1999.10.21-2000.3.3临床标本分离的菌株进行了Vitek- AMS鉴定，其中应用GNI 卡631例、GPI卡334例、YBC卡60例。[/size][size=4]　　3.VITEK-AMS鉴定法：根据细菌表型特征，选择相应GNI+、GPI、YBC卡，严格按仪器操作说明进行，孵育后当检验地带网仪器报告结果为UIO时，挑取生长对照孔(GPI卡第1孔、GNI+卡第3孔、YBC卡第24孔)悬液于非选择性培养基上重新分离，观察是否纯培养，若是，分别按同法及以下两法鉴定。否则， 经纯培养后重新上机鉴定。[/size][size=4]　　4. 双歧检索鉴定法：根据Vitek全自动微生物分析系统技术资料提供的双歧检索表，依生化结果检索至属或种。[/size][size=4]　　5. 常规鉴定法：按照全国临床检验操作规程［1］进行，并经API系统(生物梅里埃公司) 复核鉴定至种。部分菌株鉴定依据文献［2］进行。 [/size][size=4]　　[b]二、结果[/b][/size][size=4]　　1. UIO发生机率：总共1025株细菌鉴定中，共出现UIO 44株，占4.3%。其中GPI卡334株，出现UIO16株，占4.8%；GNI+卡631株，出现UIO 24株，占3.8%；YBC卡60株，出现UIO4株，占6.7%。[/size][size=4]　　2.UIO发生原因：在44株出现UIO中，9株（0.9%)为待检细菌不纯，3株(0.3%)为浊度不合要求，2株(0.2%)为接种物孵育时间过长（超过48h），2株(0.2%)为超出试验卡鉴定范围（均为臭鼻克雷伯菌），1株(0.1%)为菌悬液不乳化（粘液型绿脓假单胞），其他如冲液时气泡过多，或其他原因不确定者27株（2.6%）。[/size][size=4]　　3.处理：（1）9株不纯菌株，经纯培养后，重新上机，均能成功鉴定。（2）35株纯培养但报告UIO菌株中，18株(1.8%)可通过双歧检索法获得结果，并与常规分类法结果完 全一致。3株（0.3%）浊度不合要求者经调整浊度后重新上机获得结果。 2株(0.2%)接种物超过48h菌株，经重新孵育后得以鉴定。1株(0.1%)为悬液不乳化菌株经|检验地带网|配制3个麦氏单位菌悬液，然后低速离心1～2 min(1 000r/min)，取上清液比浊并调节到所需的浓度后，得以鉴定。(3)余下11株(1.1%)菌中，仅2株(1株为大肠埃希菌，另1株为臭鼻克雷伯菌)不能从双歧检索表中查出结果，其他9株(主要为洋葱假单胞菌、琼氏不动杆菌、木糖产碱氧化杆菌等)，虽能从双歧检索表获得结果，但与常规鉴定法结果不相符合，或出现矛盾的生化结果，需增加试验项目，按常规鉴定方法及 API系统报告结果。[/size][size=4]　　[b]三、讨论[/b][/size][size=4]　　实验表明95.7%的临床分离菌株可通过VITEK-AMS正确鉴定，仅4.3%菌株无法一次性成功鉴定。细菌不纯是产生这部分菌株的主要原因（占近1/5），其他如待检菌菌龄、菌液浓度也是关系鉴定成败的关键。由于仪器本身原因（如对于罕见生物型、新种或不典型菌株无法鉴定）也不可忽视。正确处理这部分菌株，有重要的临床意义。实际应用自动化仪器时，必须挑取纯培养菌落，可提高鉴定率，对确认为纯培养而无法鉴定者，可通过传统分类法，参照双歧检索表能成功鉴定将近一半菌株，因此合理应用双歧检索表不失为一种较好的辅助方法。但仍有占总数1.1%菌株需用常规方法或其他方法如API系统重新鉴定。[/size][size=4]　　参考文献[/size][size=4]　　1，叶应妩，王毓三，主编. 全国临床检验操作规程. 第2版. 南京： 东南大学出版社,1997.5.[/size][size=4]　　2，Patrick R. Manual of clinical Microbiology (7th Edition). Washington DC: American Society for Microbiology, 1999.316-647. [/size]

[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406241014302662_4223_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]　　在现代科技的快速发展下，生物检测领域也迎来了诸多创新与突破。其中，ATP细菌检测仪作为一种先进的生物检测仪器，凭借其独特的优势，在食品安全、医疗卫生、环境监测等领域发挥着越来越重要的作用。以下，我们将深入探讨ATP细菌检测仪的众多优点。　　首先，ATP细菌检测仪具备出色的快速性。相比传统的细菌培养方法，ATP细菌检测仪能够在短时间内迅速得到检测结果。传统的培养方法通常需要数天甚至更长时间才能观察到细菌的生长和繁殖，而ATP细菌检测仪则能够在几分钟到几十分钟内完成检测，大大提高了检测效率。这种快速性对于需要及时响应和处理的场合尤为重要，如食品加工行业、医疗机构和公共场所等。　　其次，ATP细菌检测仪具有高度的准确性。ATP是生物体内普遍存在的一种高能化合物，是细胞活动不可或缺的能量来源。ATP细菌检测仪通过检测样品中ATP的含量，可以间接推算出活菌的数量。由于ATP只存在于活菌中，因此ATP细菌检测仪可以直接测量活菌的数量，而不需要依赖于细菌的繁殖和计数。这种直接测量的方式使得检测结果更加准确可靠，避免了传统培养方法中可能出现的误差和干扰。　　再者，ATP细菌检测仪的灵敏性也是其一大优点。它能够检测到极低浓度的细菌，甚至可以达到每毫升几万个细菌的数量。这种高灵敏度使得ATP细菌检测仪能够及时发现潜在的微生物污染问题，为食品安全、医疗卫生和环境监测等领域提供了更加有效的保障。　　此外，ATP细菌检测仪还具有简便易用的特点。其操作过程简单易懂，不需要过多的技术和经验，只需按照说明书进行简单的操作即可。这使得ATP细菌检测仪能够广泛应用于各个行业和领域，为不同用户提供了方便和实用的检测手段。　　　综上所述，ATP细菌检测仪作为一种先进的生物检测仪器，在食品安全、医疗卫生和环境监测等领域发挥着重要作用。其快速、准确、灵敏、简便易用等优点使得它成为了一个多功能的生物检测工具。然而，在使用过程中仍需注意一些事项以确保检测结果的准确性和可靠性。随着科技的不断发展和进步，我们有理由相信ATP细菌检测仪将在未来的生物检测领域发挥更大的作用。

普通光学显微镜可以观察细菌菌毛，是否正确，为什么，最好举例说明。

用细菌杀死细菌病菌对抗生素产生了耐药性怎么办？或许可以用另一种细菌来杀死它。新加坡研究人员利用合成生物学手段，通过基因改造使大肠杆菌分泌专门的毒素，成功杀死绿脓杆菌。 绿脓杆菌是一种生存能力很强、对多种抗生素和消毒剂有耐药性的细菌。 不同类型的绿脓杆菌之间因生存竞争而存在“内战”，它们会分泌称为绿脓菌素的毒素，彼此攻击。每种绿脓菌素只对特定菌株起作用。新加坡南洋理工大学的研究人员利用这种特性，给大肠杆菌植入基因，使其分泌可杀灭感染人类的绿脓杆菌菌株的毒素。 在这种大肠杆菌作用下，实验室中培养的绿脓杆菌只有1％能够存活，绿脓杆菌形成的生物膜也比正常情况下稀薄得多。生物膜是由细菌及其分泌的物质形成的膜状物，毒性和耐药性比单个细菌更强。 不过这一方法目前还有缺陷，离实用尚有距离。研究小组正在设法改进这种方法，并在培养另一种大肠杆菌菌株,用于杀灭霍乱弧菌。

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=18px]　　细菌检测仪工作原理，细菌检测仪的工作原理主要基于荧光素酶作用的ATP检测试剂，通过检测样品表面的ATP含量来判断细菌的数量。以下是细菌检测仪工作原理的详细解释：　　荧光素酶反应：细菌检测仪利用荧光素酶与ATP检测试剂反应，将样品表面的ATP转化为荧光素。这一过程中，荧光素酶起到催化作用，使得ATP与试剂中的荧光素结合。　　发光特性测定：转化后的荧光素在荧光素酶的催化下会发光，细菌检测仪通过测量这种发光的强度来判定样品表面的ATP含量。由于ATP是所有活细胞的基本能量单位，因此其含量可以间接反映细菌的数量。　　快速、准确测量：这种基于荧光素酶反应的测量方法非常快速且准确。一般来说，整个检测过程不超过30秒，使得细菌检测仪成为一种高效的工具，特别适用于需要快速检测细菌数量的场合。　　应用领域广泛：细菌检测仪广泛应用于食品、医药卫生、日化、造纸、工业水处理等多个行业。在食品行业中，它常被用于检测食品表面的微生物污染情况，以确保食品安全。　　综上所述，细菌检测仪通过荧光素酶反应的ATP检测技术，能够快速、准确地测量样品表面的细菌数量，为保障公共卫生和食品安全提供了重要的技术支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406250932573396_8825_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

据台湾《联合晚报》报道，台湾“中央研究院”院长翁启惠和基因体研究中心副研究员马彻共同领导的研究团队，成功解构了细菌的保护屏障，突破了苦恼全球科学家２０年的“细菌谜团”。　　长久以来，医药界一直以转胜肽酶为标的，设计出一系列对抗细菌的抗生素，其中最有名的就是盘尼西林；然而，随着细菌抗药性的增加，这类抗生素的威力大不如前，人类在遭受各种细菌的强大威胁时，也逐渐面临无药可用的窘境。　　马彻说，虽然科学家清楚知道透过抑制转醣酶来开发新一代抗生素，但因对转醣酶的结构及作用机制不清楚，２０年来进展有限。“中研院”基因体研究中心近年来针对转醣酶进行一系列研究，成功利用Ｘ光绕射方法，清晰解构出金黄色葡萄球菌细胞壁上转醣酶及其受质的复合结构。今后只要设计出可阻断转醣酶继续作用下去的小分子药物，就能开发出可杀死细菌的新一代抗生素。 据报道，这项重要的研究发现，发表在“美国国家科学院期刊”最新一期刊物中，引起全球科学界高度重视。翁启惠认为，这是未来解决具抗药性细菌的利器，很有前景。

细菌的实验室检测方法进展——金黄色葡萄球菌的鉴定方法摘要：金黄色葡萄球菌广泛分布于自然界，多存在于人和动物的鼻腔、咽喉、皮肤及与外界相通的腔道。能引起人和动物机体局部、脏器的化脓性感染，重者可引起败血症、脓毒血症等全身感染。金黄色葡萄球菌也是国内外最常见的细菌性食物中毒病原菌之一，在我国由金黄色葡萄球肠毒素引起的食物中毒占细菌性食物中毒事件的前几位。典型的金黄色葡萄球菌为球型，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌肠毒素被分为7 个血清型，A、B、C（C1、C2、C3）、D、E。目前实验室对金黄色葡萄球菌的检验有传统培养法，金黄色葡萄球菌肠毒素的检测方法，脉冲场凝胶电泳检测分型方法和聚合酶链式反应（PCR）技术对金黄色葡萄球菌的检测方法。

[size=3]一种令人恐惧的细菌、一个颇具争议的命名、一场喋喋不休的争论、南亚“超级细菌”事件被全球媒体热炒，既让人惊心，又让人匪夷所思。“超级细菌”真的来了，但它真的如洪水猛兽么？有关答案并不简单。在对“超级细菌”保持时刻警惕的同时，我们不得不对本次事件重新做一番审视。细菌抗药性超强说本次事件让人惊心，是因为英国医学杂志《柳叶刀》１１日刊登研究报告称，英国医院发现一类新的超级耐药细菌，感染者曾在印度和巴基斯坦接受过外科手术。这种细菌抗药性极强，研究显示，这些“超级细菌”对替加环素和多黏菌素之外的所有抗生素都有抗药性，目前已感染英国、美国、瑞典、荷兰、澳大利亚个别居民，人数达３０多人。英国卫生部就此发布了警告。命名争议使事态扩大说本次事件让人匪夷所思，是因为它有争议的命名，以及当事各方难以说清的利益纠葛。随着事态发展和事件的放大，人们前所未有地对“超级细菌”表示出恐惧，一时间，全球各地的有关专家纷纷出来“灭火”，安抚人心。让事态迅速扩大的首先就是命名问题。这份研究报告将这类细菌携带的超级抗药基因命名为“新德里金属蛋白酶－１（ＮＤＭ－１）”，从而给印度戴上了“超级细菌”大本营的帽子。印度对此的反应可想而知，从官方到专家纷纷高调声讨这样的命名。实际上，医学界的确有把一些新发现的病菌和基因以发源地来命名的做法，但前提是必须证明细菌和基因确实源于这一地区。本次争议正在于此。印度从官方到专家均认为，“超级细菌”可能因国际旅行而得以传播，引用孤例声称新发现的“超级细菌”源自印度，有失妥当。难怪对本次事件，世卫组织都没有任何明确评价。此外，自然界存在多种“超级细菌”，希腊、以色列、美国、英国、巴西等国都曾发现过，比如耐药性金黄色葡萄球菌这种“超级细菌”，在不少国家都出现过，但并没有以个别国家和地区名字命名。况且，本次发现的一类“超级细菌”在印度、巴基斯坦等南亚国家都出现过。在没有彻底搞清来源地之前，以“新德里金属蛋白酶－１”命名抗药性基因，印度自然难以接受。 [/size]

引言 通常细菌的分类工作是根据细菌的形态学和生物化学反应来进行的。然而，这些测试工作比较耗费时间，而且需要专业知识及专门的培训才能完成。通过检测细菌的红外光谱然后进行化学计量学分析显示出了很大的优越性( 包括在测试速度及结果的一致性方面 )。20 世纪 50 年代末首次尝试了这种方法，并取得了一些成果，但是在仪器以及数据后处理工具方面也暴露出一些局限性。 傅立叶变换红外光谱 (FT-IR) 的出现使细菌的红外光谱分析工作在上个世纪 80 年代又复兴了起来。FT-IR 光谱的高信噪比，良好性能，加上计算能力的大大进步，使其在细菌分析方面的应用非常可行。Hopinson 和 Naumann 小组是应用 FT-IR 进行微生物鉴定和鉴别的先驱。最新研究表明这种方法对病原菌和非病原菌的分析也非常有效。

细菌分类主要研究细菌分类的理论和方法。主要包括分类、命名和鉴定。 分类是人们认识事物的方法，是指根据细菌的相似性和亲缘关系，将细菌归入不同的分类类群，命名是根据国际细菌命名法规给细菌分类单元以科学名称，鉴定则是确定一个新的分离物质属于已经命名的分类单元的过程。

[size=16px][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b]ATP荧光检测仪可以检测什么细菌[/color][/font]ATP荧光检测仪是一种专门用于检测微生物代谢活性的仪器，其原理是基于细菌在代谢过程中会产生一种荧光物质——ATP。当细菌接触到荧光染料时，ATP会被荧光染料标记，随后被检测器检测到，从而确定细菌的数量和代谢活性。具体来说，ATP荧光检测仪可以快速检测各种食品样品（包括肉类、海鲜、蔬菜、水果等）中的微生物数量，如葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌等。此外，它还可以用于检测土壤、水体和生物体内的细菌、真菌、原生动物和藻类等微生物的数量和代谢活性。除了食品安全领域，ATP荧光检测仪还广泛应用于医药卫生、环境监测等领域。例如，在医院内部环境的卫生检测中，使用ATP荧光微生物检测仪可以对手术室、病房、器械等进行快速检测，及时发现和消除卫生隐患，保护患者的健康。总之，ATP荧光检测仪是一种功能强大的微生物检测工具，其应用范围广泛，对于确保食品安全、环境卫生和医疗安全等方面具有重要意义。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403151353381095_7818_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

香港城市大学研究显示，每张人民币平均含菌量17.8万个，5角、1元、1角面额的纸币，每张附带的菌数更高达1800万个，在亚洲众多币种中“鹤立鸡群”。人民币在流通过程中接触人员众多，层次复杂，已成为致病细菌传播的重要途径之一。人民币上常见的细菌：大肠杆菌:钱币上的大肠杆菌多来自粪便，会随着钱币的流通进行繁衍和传播，造成致病性感染。多数大肠杆菌与人体是互利共生的关系。只有在机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激等特殊情况下，大肠杆菌才会致病，移居到肠道以外的地方，例如胆囊、尿道、膀胱、阑尾等地，造成相应部位的感染。金黄色葡萄球菌：金黄色葡萄球菌是钱币上的另一类重要菌类。金黄色葡萄球菌在自然界中广泛存在，如空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可检测到。钱币流通性强，与环境接触广泛，沾染金黄色葡萄球菌的可能性极大。金黄色葡萄球菌就是致病力较强的一种细菌，它能通过创口感染，引起化脓和毛囊炎，肺和血液感染，甚至引起败血症、脓毒症等。绿脓杆菌：人吐出的痰液里往往含有绿脓杆菌，这些痰液一旦沾到钱币上，绿脓杆菌就很容易通过钱币的流通进行传播。绿脓杆菌是一种致病力较低但抗药性强的细菌。绿脓杆菌感染可发生在人体任何部位和组织，常见于烧伤或创伤部位、中耳、角膜、尿道和呼吸道，也可引起心内膜炎、胃肠炎、脓胸甚至败血症。沙门氏菌：不干净的食物中，往往含有沙门氏菌，人们在购买这些食品时，很容易将食品上的沙门氏菌沾到钱币上。沙门氏菌有的专对人类致病，有的只对动物致病，也有对人和动物都致病。致病沙门氏菌能引起人体肠胃食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒。 庆幸的是，这些细菌只有在人体抵抗力弱的时候才能乘虚而入，正常情况下是不会因为这些细菌发生疾病的请大家养成勤洗手的习惯哦！！！！！！！！！！！！！！！！！！！

近日有报道称，一些赴印度接受治疗的患者感染了一种新型超级细菌，其含有一种叫NDM-1的基因。这种细菌对现有的绝大多数抗生素都“刀枪不入”，甚至对碳青霉烯类抗生素也具有耐药性，而碳青霉烯类抗生素通常被认为是紧急治疗抗药性病症的最后方法。　　目前，这种变种超级细菌已经传播到英国、美国、加拿大、澳大利亚、荷兰等国家，并有可能在全世界范围内进一步蔓延。本月13日，比利时医疗人员证实，一名比利时人死于这种据信源自南亚的超级细菌，成为该菌致死“第一人”。　　“超级细菌的出现，是滥用抗生素的最直接恶果，而中国是全世界滥用抗生素最严重的国家。”广东省地中海贫血防治协会会长、南方医院儿科主任李春富表示，正常人体内有许多共生菌群，抗生素特别是广谱抗生素的不合理应用，打破了其平衡。每一种抗生素投入使用，没有被杀灭的细菌会迅速产生对这一抗生素的抗体，成为耐药菌。抗生素的滥用，使得细菌的抗药性越来越强，这类细菌统称为“超级细菌”。　　据统计，2007年我国门诊感冒患者约有75%应用抗生素，外科手术则高达95%，而超级细菌的出现是滥用抗生素最直接的恶果　　羊城晚报记者 张小磊 实习生 张莉 李翌　　新型超级细菌中含有ＮＤＭ—1基因，ＮＤＭ—1意思是“新德里金属蛋白酶—1”，是一种超级抗药性基因。这种脱氧核糖核酸结构可以在同种甚至异种细菌之间“轻松”复制。　　超级细菌研究人员认为，抗生素诞生之初曾是杀菌的神奇武器，但细菌逐渐进化出抗药性，近年来屡屡出现能抵抗多种抗生素的超级细菌。由于新型抗生素的研发速度相对较慢，对付超级细菌已经成为现代医学面临的一个难题。　　研制一种抗生素大约需要10年时间，而产生耐药菌素却在2年之内，抗生素的研制速度远远赶不上耐药菌的繁殖速度。许多大的制药公司越来越不愿意为研发抗生素埋单，其原因除了抗生素开发到一定程度后，再开发新的品种所需的研发费用越来越高外，更重要的是快速的失效使医药公司的巨大投入得不到产出补偿。　　现状　　探因　　中国每年有20万人死于药物不良反应，其中因抗生素滥用造成的死亡占到40%　　世界医学界流传着一句话：“美国枪支容易买到，抗生素很难买得到，而中国恰恰相反。”据2007年统计，我国的门诊感冒患者约有75%应用抗生素，外科手术则高达95%。世界卫生组织调查显示，中国住院患者抗生素药物使用率高达80%，其中联合使用两种以上抗生素的占58%，远高于30%的国际水平。　　复旦大学附属儿科医院的统计数据显示，该院每年销售收入排序前三位的药物均为抗生素。2001年，15种最畅销的药物中抗生素药品就占了11种。此外，静脉注射已经成了滥用抗生素的新途径。每天1000个呼吸道感染的门诊患者里，有将近2／3会接受静脉注射治疗。儿科医院静脉应用抗生素呈现出逐年增多的趋势：1996年注射用抗生素消耗金额占全部抗生素消耗金额的比例为46.7%，而2001年上升到53.6%。　　据统计，仅超前使用第三代头孢菌素，全国一年就多花费7亿多元。滥用抗生素的直接恶果就是耐药性的日渐严重。以中国细菌耐药性最为严重的地区之一上海为例，上海人群感染的金黄色葡萄球菌中，80%已经产生了对青霉素G的耐药性。一些药品的有效率已经跌到了20%。在一些地方，预防结核病的卡介苗的有效率只有30%。　　有一组数字，或许能说明问题：中国每年有20万人死于药物不良反应，其中，因抗生素滥用造成的死亡要占到40%。我国7岁以下儿童因为不合理使用抗生素造成耳聋的数量多达30万，占总体聋哑儿童的30%至40%，而一些发达国家只有0.9%。在住院的感染病患者中，耐药菌感染的病死率为11.7%，普通感染的病死率只有5.4%。　　李春富说，滥用抗生素的直接副作用是，患者体内的病毒会对抗生素产生抗体，之后重复使用抗生素，就会无效。“抗生素的副作用往往潜伏期长，要多年后才能表现出来。可推断，未来的10—20年内，抗生素滥用对人体的肾脏、肝脏等产生的副作用会慢慢明朗起来。现在可确证的是，很多三四十岁的‘黑牙’人群，就是因为多年前滥用四环素这种抗生素引起的副作用。”　　探因　　患者数量庞大，医疗投入不足，部分医生经验欠缺，患者“急功近利”等造成“滥用”　　抗生素为何如此疯狂滥用？这是中国国情、国家经费投入、医生自身、患者四方面综合博弈的结果。　　就我国国情而言，中国是人口大国，每天走进医院的患者自然不少。“和外国情况不一样，我们每天一个上午就常常要诊断几十个病人，在如此短的人均诊断时间里，我们根本没精力对每个患者进行详细观察、询问、讨论甚至病情跟踪。”李春富说，加之，国家在医疗方面的投入不足，医生的工资跟不上经济发展的速度，很多方面的福利都只有靠医生自己。因此部分医生为了牟利，便不断给病人开抗生素。“从这方面讲，医生只有好好看病，与钱无关，才可能避免”。　　同时，不少医生临床经验和判断力不足，加之怕承担风险，常常为了稳妥起见，采用普遍使用的抗生素进行治疗，形成诊断的惯性。因而，临床经验比较足的医生，对抗生素的依赖会有所减少。广东省人民医院儿科主任林晓源谈到一个病例，某位患者找到其之前，已经去过多家医院，开了很多药，吃了都不见好转。林主任诊断后，只给他开了6块钱的药，患者起初一直对此表示怀疑。但按照医嘱服药两天后，药到病除。“当时他的病情恰恰不是用大量价格贵的抗生素能够治好的”，林主任说，我结合自己多年的临床经验观察后，才敢这样下药，但一般医生不太敢冒险选择这样做。　　滥用抗生素另一个“元凶”是患者“急功近利”的就医心情。一般说来，感冒发烧是上呼吸道病毒感染，无需使用抗生素，通过患者自身抵抗就能治好，但不能在一两天内就马上痊愈。“我们遇到的许多患者往往也求愈心切，看到短时内发烧症状不消，就会抱怨医生，甚至质疑其医术。医生有理说不清，干脆应患者所需，采用抗生素，早早解除症状了事。”林主任说。　　另外，抗生素属于处方用药，国家对这类药品是有着严格的要求的，没有医生的处方，药店是绝对不可以卖给顾客的。但是，现实情况中，我们在全国的大街小巷都可以任意购买抗生素，相关部门的监管存在明显漏洞。虽然任何一家药店或者药房都非常醒目地写着“RP”凭医生处方购买等字样，但实际上，任何人到任何一家药店，根本无须医生处方便能买到抗生素（包括任何针剂）等处方用药。甚至，很多药店还配有护士，就在药房里面直接地为买药者进行静脉注射，致使药房里打针致死命案时有发生。　　求解　　落实相关规定，明确使用界限，扶持“私人医生”跟踪治疗，减少使用抗生素　　“普通感冒我从来不开抗生素。”中国工程院院士钟南山教授曾经在“世界哮喘病日”义诊活动中指出，目前广东人因滥用抗生素造成的后果相当严重，使用抗生素一定要慎重。　　有个中国人讲述他在美国生病治疗的经历时说，当时他开车在纽约到孟菲斯的路上，忽然觉得肚子很痛，便电话求救。美国急诊室医生赶到后，做完相关检查，没给他开任何药，只让他拼命喝水便离开了。到目的地后，医生打来电话询问病情，之后第二天早上、中午、下午，医生又分别电话询问病情，几天后，患者好了。　　“像国外一样，多做检查，多观察，多跟踪，少用药，是避免抗生素滥用的最佳方法。”李主任说，但是目前我国条件根本达不到。那么，呼吁中国大医院采取患者人数限制，培养扶持“私人医生行业”，将更多的患者分流到家庭和个人，才是解决问题的好办法。　　2004年，卫生部出台《抗菌药物临床应用指导原则》，这是针对我国抗生素临床应用的第一部指导性意见，它规定了抗生素需凭处方销售，哪些抗生素可以口服，哪些抗生素可以注射，以及哪些抗生素不能同时使用等，以最大限度防止抗生素滥用。　　但是，如何避免条文流于空泛？对此，相关部门应将笼统的规定落实化，由医疗界开展学术研讨，将抗生素的使用界限定清楚，达成如何使用，何种情况下使用的共识。“有了这个共识，门诊和临床的工作人员才可能改变滥用抗生素的惯性做法，有方向，有目标，规范去做。”李春富说。

[font=Arial,Helvetica,sans-serif]　最普通洗手皂和沐浴皂都含有化学成分,如酒精或氯,能杀死细菌。标示“抗菌”的香皂，含有额外的杀菌物质,如三氯苯氧氨酚或三氯卡班。密歇根大学公共卫生学院几个实验室研究表明,在使用了含三氯苯氧氨酚成分肥皂后，细菌对抗生素出现某种耐药性。经常使用含额外杀菌成分肥皂的人和使用普通肥皂的人相比，在防止传染病和降低疾病细菌水平上有效性较低。 　　该研究的作者呼吁美国食品及药物管理局(FDA)做进一步评估,对在广告中声称抗菌产品,特别考虑缺乏长期健康益处所使用的含三氯苯氧氨酚的肥皂，应用普通肥皂取代。 [/font][font=Arial,Helvetica,sans-serif] 根据疾病控制和预防中心(CDC)指出,脏手传播疾病的问题,并不是因为没有使用含额外杀菌成分的肥皂，而是因为公众洗手不充分。大多数人花在洗手上的时间不超过5秒，没有足够的时间来杀死细菌。摆脱有害细菌最好的办法是用温水洗手，并保持较长的时间。 　　“非常仔细洗手——用力搓手背、手掌和手指，是去除细菌和手上脏物最有效的方法。”新泽西口腔医科大学预防医学系副教授和社区小儿科健康的专家温格彼得说，“人体需要某些细菌帮助消化,同时抵御有害细菌。并非所有在你的手上的细菌都是有害的,你的身体需要细菌的平衡,保持一个对皮肤有益的健康环境。”[/font]

大家过年好！请问，有哪位老师知道同一水样细菌总数和大肠杆菌有什么关系是不是细菌总数一定高于大肠杆菌。谢谢指教。

请问大家有没用过细菌检测仪来检测化妆品中的细菌？哪个牌子的好呢？购买时应注意哪些参数？请大家介绍下。。

据美国媒体8月12日报道，在印度、巴基斯坦等南亚国家出现的一种新型细菌变种基因有可能在全球蔓延，拥有这种基因的细菌乎对所有的抗生素都有耐药性。有报道称，这种变种基因目前已经传播到英国、美国、加拿大、澳大利亚、荷兰等国家。抗生素耐药性领域的医学专家将这种变种基因命名为NDM-1，最早出现在印度、巴基斯坦等南亚国家，后来有不少英美等国的游客前往这些南亚国家接受价格低廉的整形手术，使得这种基因得以传播。美国疾病控制和预防中心今年1月至6月间在美国发现3例这种病例，并建议医生们对在南亚接受过手术的病人特别加以关注。医学专家对NDM-1的出现感到“担忧”，担心它会在全球蔓延。不过也有医学专家持乐观态度。他们认为，尽管世界上存在多种对抗生素具有耐药性的细菌，但是其中并没有任何一种能够真正成为“超级细菌”和“食肉细菌”。纽约大学朗格尼医学中心负责人表示：“这些对抗生素具有耐药性的细菌无疑是带有危害性的，但NDM-1超级细菌比耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）更令人担忧吗？现在作出判断还为时过早。”MRSA是一种可以抵抗所有抗生素和药物的病菌，能够感染伤口和褥疮，引起各种感染，令免疫力弱的人死亡。MRSA呈多重耐药，是临床重点耐药性监测的多重耐药菌之一。===============================================这种超级细菌就是带有NDM-1的细菌，所谓NDM-1就是“新德里金属β内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase 1，简称NDM-1)”，这种酶存在于大肠杆菌等不同细菌DNA结构的一个线粒体上，并让这些细菌变得威力巨大，对几乎所有的抗生素都具备抵御能力。 去年，卡迪夫大学的研究者蒂莫西沃尔什首次在一名瑞典病人感染的大肠杆菌和肺炎杆菌中确认了这种酶的存在，并将之命名为NDM-1。[b]那我们怎么才能检测？假如大肠杆菌带有这种酶，怎么检测？用什么方法？用什么仪器？[/b]

问:分离的细菌如何鉴定?答:细菌的传统鉴定 1. 形态特征及染色结果 ①革兰氏染色 ②鞭毛染色 ③荚膜染色 ④细胞壁染色（NaCl法：1.取1d25%NaCl溶液于洁净的载玻片上。2.挑一环培养6h的细菌在25%的NaCl中涂匀，自然凉干。3.滴加0.01%的结晶紫于其上，30s后水洗干燥，油镜观察。） ⑤抗酸染色 2. 培养特征观察取菌龄24-28h的菌3.6接种于PDA平板，PDA斜面，营养肉汤中培养24h，进行琼脂柱，明胶穿刺培养，30℃培养24h。 3. 生理生化实验需氧性测定和运动性测定：将斜面培养24h的待测菌用接种针穿刺到培养基管底，3d后观察变化。如果菌落沿培养基表面生长，表明为好氧菌，反应为阳性，如果菌落沿穿刺线生长，反应为阴性。培养基成分：蛋白胨0.2g，NaCl0.5g，K2HPO40.2g，琼脂0.5-0.6g，葡萄糖1.0g，水100ml。 4. 生长温度测定在肉汤培养基（外加1%葡萄糖）中用接种针接种，在恒温水浴锅中不同温度下（[c

适用于细菌、真菌和霉菌的快速检测仪器，求推荐！

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是20世纪80年代发展起来的一种新型软电离有机质谱, 作为一种新兴的蛋白质组学检测技术, 现已广泛应用于生命科学及相关领域。同时作为一项新兴的微生物鉴定技术, 受到了国内外的广泛关注。与传统的生化表型鉴定方法和分子生物学方法相比, MALDI-TOF MS具有操作简单、快速、准确和经济的特点。早在1975年, ANHALT等[1]利用质谱仪结合高温裂解技术第1次完成了细菌的鉴定, 从此拉开了质谱鉴定细菌的“ 序幕” 。随着质谱检测技术的不断完善和发展, 近年来, MALDI-TOF MS已经成功应用于微生物的鉴定, 显示了其在细菌、酵母菌等鉴定方面均具有良好的应用价值。众多的研究表明, MALDI-TOF MS技术对培养出的纯菌落进行菌种鉴定具有很高的稳定性及准确性, 对常见细菌和酵母菌的属的鉴定率能达到97%~99%, 种的鉴定率也能达到85%~97% 另外, MALDI-TOF MS大大缩短了细菌鉴定的时间, 而且其成本也较常规鉴定方法低[2, 3]。除此之外, MALDI-TOF MS已经能够成功地用于部分微生物亚种水平的鉴定和细菌耐药性的检测, 但这种方法在大多数情况下是应用于培养出的纯菌落的鉴定[3]。　　如果能够从临床样本中直接检测细菌/真菌, 突破细菌/真菌培养阳性率低、培养时间长的瓶颈, 为细菌/真菌感染性疾病的诊疗提供更快、更准确的病原学依据, 将对临床及时控制细菌/真菌感染性疾病起到更大的作用。国内外学者已尝试将质谱技术应用于临床样本的直接检测, 并取得了显著的进展。本文就MALDI-TOF MS技术在临床样本的直接检测应用作一综述。一、MALDI-TOF MS检测原理　　MALDI-TOF MS技术用于微生物鉴定的实质就是检测具有属、种或亚型特异性的生物标志的质量信号, 主要是微生物菌体内高丰度、表达稳定和进化保守的核糖体蛋白。MALDI-TOF MS 仪器主要由基质辅助激光解吸离子源(MALDI)和飞行时间质量检测器(TOF)两部分组成。MALDI的原理是用一定强度的激光照射样本与基质形成的共结晶薄膜, 基质从激光中吸收能量而汽化, 并迅速降解, 使样本分解吸附, 基质和样本之间发生电荷转移从而使样本分子发生电离 TOF的原理是带有电荷的样本分子在电场作用下加速飞过飞行管道, 因为离子的质荷比与离子的飞行时间呈正比, 所以不同质量的离子因达到检测器的飞行时间不同而被检测, 以离子峰为纵坐标、离子质荷比为横坐标形成特征性的质量图谱。将不同种属微生物经MALDI-TOF分析所形成的质量图谱与数据库中的参考图谱进行比较, 从而实现对目标微生物种或菌株的区分和鉴定[2]。二、MALDI-TOF MS直接检测临床样本的流程　　临床样本直接检测的流程主要包括3个部分:临床样本的预处理、样本上机检测和对比蛋白质指纹图谱数据库得出鉴定结果。由于目前报道最多的临床样本是阳性血培养瓶和中段尿样本, 下面将以这二者为例介绍其直接检测的流程, 其它临床样本的检测流程与之类似。(一)临床样本预处理　　MALDI-TOF MS直接用于临床样本的检测有2个基本的要求:(1)临床样本中细菌的量。为了得到准确的鉴定图谱, MALDI-TOF MS技术对置于靶板上的细菌的最低检测限约为(1× 104)~(1× 106)cfu/mL。若要直接检测拟似血流感染的血液样本以及拟似泌尿系统感染的中段尿等临床样本中的病原菌, 首先必须富集细菌 (2)临床样本的质。由于血液和血培养瓶中的大分子成分如血红蛋白和其它蛋白成分、尿液中的白细胞等有机成分会干扰细菌的谱峰, 所以直接检测前需要采取预处理措施去除这些干扰因素。1.阳性血培养瓶直接检测 直接检测阳性血培养瓶的细菌浓度常常需要1× 107 cfu/mL[2, 4]。由于在血流感染患者血液中的细菌量常常很低(最低可 1~10 cfu/mL), 因此对血样本的直接检测需要一个增菌的过程, 即采用血培养瓶增菌。目前已报道的阳性血培养病原菌预处理程序各不相同, 但预处理过程主要包含了以下2个步骤:(1)将细菌从血细胞中分离出来。先应用温和去污剂(如吐温-80、十二磺基硫酸钠、皂素等)将血液中的血细胞溶解, 然后通过不同的流程(离心、洗涤)去除其它的干扰因素, 纯化要鉴定的细菌样本 (2)将菌体中的蛋白质抽提出来。最常用的是混合溶剂处理法, 使用甲酸/乙腈溶液对样本进行处理来抽提蛋白, 利用2种溶剂的混合作用将菌体表面的蛋白和存在于细胞内的低相对分子质量的高丰度蛋白提取出来, 实现对菌株的鉴定。虽然至今尚没有规范化的处理程序, 不过目前市场上已有商品化的阳性血培养瓶预处理试剂盒Sepsityper kit(Bruker)可以提高鉴定分数和鉴定准确率, 但是花费比较高, 处理程序也费时较长[5]。另外, HAMMARSTR? M等[6]建立了一种基于声学捕捉和集成选择性富集目标(integrated selective enrichment target, ISET)的新方法用于富集样本中的细菌, 快速、准确并且简化了人工操作, 有望替代传统的以离心为基础的分离方法。2.中段尿样本 要取得一个较高的鉴定成功率, 直接检测中段尿样本中病原菌至少需要的细菌数量是1× 105 cfu/mL[7, 8]。对尿样本的预处理程序较为简单, 主要有下面几个步骤:低速离心去除白细胞, 高速离心收集细菌, 沉淀, 经过洗涤、离心之后进行蛋白质的提取(常用的是甲酸、乙腈), 经高速离心后取1 μ L上清涂布到MALDI的靶板上, 在室温下干燥后即可进行检测。