紫外核酸仪

话说无论是初接触分子生物学的新手，还是久经考验的“老鸟”，都知道EB染料的有害性，这种有害性表现在三个方面：接触致癌性，紫外观测的诱变性，以及麻烦的后处理。但是要说到EB的替代品，好像又都不是那么合心意，比如SYBR类染料在紫外下不稳定，容易降解，一些像是GelRed之类的染料虽然毒性低，但是价格却不亲民。想要避免EB的影响，又不想影响实验的效果，许多实验人员常陷入两难中，另一方面，经典的凝胶成像系统一般都是采用的紫外成像，在这种波长下，EB的灵敏度和价格都是比较合适的，而其它的染料又存在不稳定性这一瓶颈式缺点，所以导致了虽然知道EB的有害性，但许多实验室还是采用EB染料的现状。国内生物技术自主研发着名企业：百泰克公司2009年推出了新一代的凝胶透射仪，可用于核酸和蛋白质电泳凝胶样品的观察、处理、分析和拍照。这种凝胶透射仪：UltraPowerTM采用的是可见光光源，如果配合新一代核酸染料UltraPowerTM或者其他花菁类荧光染料，可检测出几十pg的dsDNA，灵敏度比紫外凝胶透射仪配合EB染料高10-25倍。这是由于花菁染料具有摩尔吸收系数大和荧光量子产率高的优点，通过共轭链长度的调节，花菁的光谱可以从可见光区一直延伸到近红外区，采用红区测量可有效地排除背景干扰，获得更为理想的分析灵敏度和选择性。花菁染料的光谱对外界微环境的变化极为敏感，非常适合生物及环境样品的分析研究。除此之外，UltraPowerTM可见光凝胶透射仪还可以用于多数荧光染料，比如SYBR Green I、绿色荧光蛋白（EGPF）等（具体染料见附表）。这可以算得上是一套多色荧光成像分析系统，而且UltraPower可以采用普通数码相机拍照，从而摆脱了高昂造价得黑白CCD时代，可以拍出多姿多彩的电泳图片来。

ZHD型紫外蛋白核酸检测仪使用说明 一、系统简介 蛋白核酸检测仪是层析分析的主要装置，配上层析柱、恒流泵、部分收集器（根据需要选配）和电脑打印设备即构成一套完整的液相色谱分离系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质（样品）对紫外光有明显吸收的特征，实现对样品成份含量比对分析，以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。然而，目前国内生产的蛋白检测仪虽然种类繁多，但均采用记录仪描谱且预热时间较长。 ZHD型紫外蛋白核酸检测仪的研制成功，为科研和实验人员利用电脑系统实现核酸蛋白检测和分析提供了一种先进的手段，其特点是系统稳定、操作简便、电脑显示谱图、数据分析和打印谱图。 二、系统特点 本系列检测仪有别于其他检测仪，主要有以下特点： 1、预热时间短，一般做实验只要预热10分钟左右。 2、稳定性高，预热后每小时漂移一般小于0.001。 3、操作简洁，开机后仪器自动调整透光率（T）到100%，吸光度（A）调整到0.000。 4、透光率（T）和吸光度（A）对应准确，点两者误差小于1%。 5、双数据显示，仪器适时显示吸光度（A）和透光率（T）。 6、仪器带有电脑接口和记录仪接口（吸光度0—200mv）。 7、工作软件提供谱图采集、分析计算、保存、打印等功能，可将谱图插入文档（word）文件中。 8、一台电脑可配多台检测仪（由电脑有效端口数决定）。 三、 技术性能 1、通过测量选择菜单，在电脑屏幕上可描出吸光度（A）谱图，透过率（T%）谱图以及A-T%谱图。 2、通过图形平移、复读伸缩和压缩选择等菜单，可对谱图并进行幅度、宽度调整和谱图参数计算，预览满意后打印输出。 3、在描谱过程中，电脑会自动将图形左移（也可人工调整），电脑描谱最长时间为20小时。 4、采集数据自动保存。 四、主要参数： 1、波长：254nm，280nm（可根据用户需要调配）。 2、样品池100ul，光程3mm。 3、量程：吸光度（A）：0--2.000 透光率（T）：1%—100%。 4、分辩率：吸光度（A）：0.001 透光率（T）：0.1%。 5、电脑分析参数：峰高、峰宽、峰面积、峰面积比、保留时间、面积含量（归一化）、层析柱分辩率等。 6、电源220V±10%，50HZ。 7、主机重量：约3.5Kg。 五、系统安装与操作步骤 1、将仪器背板上的输出端通过一根串行口连接电缆与电脑主机的COM1或COM2串行口相连。 2、打开紫外蛋白核酸检测仪电源，仪器预热10分钟左右。 3、打开电脑后，将应用软件（ZHD.exe）复制到硬盘上。钦一下仪器面板上的复位按钮，待仪器显示0.000A和100%T后，双击ZHD.exe启动应用软件，系统进入采集（分析）状态。 4、在“测量选择”菜单下，用鼠标选择检测项目。 5、在“检测操作”菜单下点击“测量开始”，电脑开始采集。 6、要停止采集，点击“检测操作”下的“测量结束”菜单，然后关闭紫外蛋白酸检检测仪。 六、层析普工作站软件使用 1、 对硬件的基本要求： a、电脑在简体中文Windowsxp操作系统上运行； b、显示器分辩率为1024*768，小字体，256色配置； c、图形打印机； d、电脑系统必须正常工作，并保证串行口（COM2或COM1）有效； 2、系统连接无误后先让检测仪工作，再执行应用软件ZHD.exe； 3、 点击文件操作菜单下的“打开谱图”，出现文件操作对话框，打开随机盘上的数据文件(.ran)，图形被打开，熟悉菜单操作。菜单介绍如下： a、“文件操作”菜单下有打开谱图、保存谱图、打印谱图、打印预览等； b、“检测操作”菜单下有测量开始、测量结束(测量结束后,系统在应用程序目录下生成“文件名.TXT”文件,此格式文件可在Excel软件中打开,并可转贴到Word文档中使用)； c、“灵敏度选择”菜单下有A、T%、A-T%选项； d、“谱图平移”菜单后有向左慢移动 []和向右快移动[]； e、“谱图重绘”菜单：从起始点描谱；清理屏幕；释放压缩； f、“谱图全貌”菜单：在屏幕上观察全部谱图。 g、“参数选择”菜单:可对谱图进行参数分析计算。方法如下：在吸光度状态下，点击鼠标左键选取基线及时间范围（第一次点击选取第一点，第二次点击选取第二点），点击“选择参数”下拉菜单的峰高、标准差、半峰宽、峰底宽、峰面积、峰面积比、面积含量及保留时间等参数进行计算，还可间接计算出层析柱分辨率；双击鼠标左键，即可取消本次计算。 ｈ、在吸光度(A)或透光率(T%)状态下，单击鼠标右键，屏幕显示该鼠标点的数值；双击鼠标右健，擦除屏幕显示数值。 七、注意事项： a、 更改波长方法：打开样品池挡板后，可见到滤光片的燕尾型支架和印字（245或280代表当前所使用的波长），用手将其轻轻抽出，换向后插入原位，再将样品池挡板装上，拧紧固定螺钉即可。 b、 在检测仪和电脑正常工作后才能运行应用软件； c、 应用软件执行后，十秒钟后不出现采集分析界面，说明电脑未收到数据，需检查系统连接是否正常； d、 在A—T%描谱过程中，开始1小时内，T%谱以实蓝线表示；1小时后（或点击“图形重绘” ），已描过的T%谱会以虚蓝线表示； e、 测量开始后（特别是出峰以后）不要按复位按钮。 f、 要停止采集，请点击“测量结束”后，先点击“EXIT”，再关闭检测仪。 g、 开始测量时，屏幕会弹出保存文件对话框，要求输入数据文件名及存放路径；之后，电脑自动保存数据。 I、基线选取要保证基线与所选峰必须要有两个焦点，并与其他峰无焦点。

紫外分析仪按照用途不同可以分为三大类，有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列，他们之间有区别，也有不同的用途。 三用紫外分析仪具有消耗功率小、热量低、可以长时间连续使用等特征，三用紫外分析仪可应用在科学实验工作、药物生产和研究、染料涂料橡胶、石油等化学行业、纺织化学纤维、粮油、蔬菜、食品部门、地质、考古等行业。 暗箱式紫外分析仪是提供白光和紫外光照射的装置，具有重量轻、灯管启辉快、无频闪的优点。暗箱式紫外分析仪主要用于蛋白质电泳观察和照相。 可照相紫外分析仪是提供紫外光照射的装置，该仪器选用电子镇流器，具有重量轻、灯管启辉快、无频闪的特点。可照相紫外分析仪可用于核酸电泳凝胶样品的观察、照相等方面。

新一代双光束紫外检测仪产品隆重上市一、双光束紫外检测仪研发的背景 　　双光束、单光束紫外检测仪都是液相色谱中的一种紫外检测仪，它是用来监视生物化学、分子生物学、制药、食品等行业在柱层析在分离分析时必不可少的设备，目前在市场中多数的产品为“核酸蛋白检测仪”该仪器基本上是七十年代生化所转让的产品，鉴于当时受技术水平、市场元器件等限制，因此虽试制成功，但还存在许多问题，如基线漂移、换档零点不准等，为此当时市场上虽有十几家生产厂家，但它们几乎是同一产品，同一面孔，同一性能，无法满足用户的需求。而进口的仪器如法玛西亚等价格昂贵。而国产的核酸蛋白检测仪却大大落后于市场，许多急待改进部分却很少有制造商厂家进行研究改造，20年来除了面目稍有改进，内部结构几乎不变。　　不足之处： 　　1、该仪器光源，因为核酸蛋白检测仪器里用的是汞灯，它的特定谱线是253.7nm，而在生化等行业里检测核酸用的波长为260nm，在检测浓度高的样品中问题不大，但在进行少量宝贵样品中而浓度又比较稀的情况下，得出的结果偏差就大了。　　2、在光电转换中核酸蛋白检测仪用的是光电倍增管，我们知道光电倍增管体积大，占地大，并且还需要高压电源支撑，高压电源稳定度直接影响到整个仪器稳定度，做的好不好非常关键，再加上光电倍增的暗流，随温度变化等不确定性，是造成仪器不容易做好根本原因之一，现在市场上进口仪器基本上都是用光敏二极管来做转换器，体积小（只有一只三极管之大），性能稳定，暗流小，如此先进的技术核酸蛋白检测仪却弃之不用。　　3、现在市场上的核酸蛋白检测仪看上去具有254nm、280nm波长可测定，实质上在用254nm测定核酸时还可以（真正核酸测定是260nm），但在用280nm去测蛋白时，却有些牵强因为此时它们的能量很弱，进口的仪器在用汞灯作光源测蛋白时，它们280nm波长取得是采用荧光将254nm通过荧光转换为280nm，然后再用280nm滤光片取得280nm波长去检测蛋白的，而在国产核酸蛋白检测仪器中，因无此类技术（荧光粉有毒不好做，也没这门手艺）所以省去此道工序，就只能用280nm滤光片取得280nm波长。结果因为汞灯的特征谱线为254nm，280nm波长是该谱线的延伸段，与254nm相比光强度几乎是它的1/10，因此虽然用280nm滤光片但因254nm能量太强，它照样能透过滤光片进入测量系统，结果测出峰为：254nm、280nm波长的共同吸收峰，因此该种仪器如作教育工具还可以，在科研领域研究中，在制药行业中是非常非常不利的。　　4、市场上核酸蛋白检测仪在线路设计上有问题，比如在无样品时灵敏度换档时在记录仪反映的基线会有很大变化，这样对操作者很麻烦，如果在监视过程中发现峰形太大或太小时，想要改变灵敏度得到合适峰时，因基线基准点变化，峰值就受影响，结果就不准确，在灵敏度＞1OD时，仪器零点与记录仪零点偏差极大，以其无法工作。　　5、现在市场上还有一种紫外检测仪器是用元素灯作为光源的，虽然该灯的谱长比较汞灯来说单色性较好，但元素灯寿命短，一般2000小时，不宜作为长时间监测，经常更换灯成本高。　　另外市场上核酸蛋白检测仪基本上都是灵敏度换档时，不仅记录仪基线变，表头读数也会跟着变，实际上灵敏度换档对一个样品的浓度不会变化的，变的是记录仪峰值大小，浓度读数是恒定的。　　鉴于看到市场上核酸蛋白检测仪存在种种问题，及它们给科研工作者、给制药业等行业带来不利后果，也为了填补国内空白，因此决定试制颇有难度的双光束紫外检测仪。通过生化所专业技术人员两年的研发新一代UV-DETECTORⅢ双光束紫外检测仪目前已推向市场，经各大院校、科研所、生物药业等单位应用证明，可达到LKB等进口仪器的同等效果。　　二、双光束紫外检测仪与其他紫外检测仪的比较 　　1、紫外光源 　　双光束紫外检测仪用的光源为无电极放电灯，该灯在国内为空白，在国际上只有瑞典LKB公司生产，该灯通过专业人员查资料查文献，不断试制最终获得成功。　　2、线路设计 　　双光束紫外检测仪的光电转换器用光敏二极管，这是跟上时代步伐要求，省去高压以及高压带来影响仪器不稳定因素。在线路上采用双光束形式，一路为样品光束，另一路为参考光束，参考光束转换为电压后，用来产生反馈，抑制光源随温度变化而引起的变化，这样整个机器稳定，不会像单光束那样因温度等影响，一路慢慢漂移不止。　　3、温度控制 　　灯室采用恒温控制。众所周知，一般光源都会随温度发生变化，采用恒温形式不仅能稳定光源，还会延长灯的寿命，而且也适合仪器在冷室中长期使用。　　采用无电极放电灯，体积小只有手指大小，起动灯源的供电部分用微波激发，整个激发光源板只有手掌大小，结构简单，功耗＜3W，该灯寿命长，理论上100,000小时，说明书上保守写2万小时，可不关机长期连续使用，完全适合生化等领域长期监视，　　双光束紫外检测仪特点： 　　1、仪器稳定时间短，开机后半小时内足以稳定。 　　2、仪器外壳设计防腐、防锈、美观、轻巧，市场上尚未见同类产品。 　　3、线路设计先进合理，除采用反馈等技术外，该仪器在改变灵敏度时，记录仪上的零点基线基本上保持不变，并且面板表上的读数不随灵敏度变化而变化，实验结果正确可靠。　　4、因为光源采用无电极放电灯，各波长214nm、230nm、260nm、280nm、214nm、340nm等强度均匀，用滤光片取出波长，单色性好，不会给操作者、研究者等带来波长间互渗混乱效果。　　与进口LKB公司仪器比较，我们采用了它们的先进技术，但又作了改进，像无电极放电灯，它们260nm、280nm要用2个滤光片，2个灯来获得，而我们只要用一个灯就可获得5个波长，这样可适应不同人需要，应用范围更广。进口仪器不设面板表，而我们采用面板表这样更直观，并随时从表头上获得监视样品信息，甚至仪器不接记录仪也可用，双光束紫外检测仪比进口仪器更稳定，尤其在高灵敏度区域内。

最近有一家叫SCINCO的韩国厂商到我们这推荐一种氙灯的紫外，体积挺小巧的，说是专门快速测量核酸和蛋白质含量的，说的天花乱坠的。。。。。看参数也不怎么样！说是价格比较实惠。。。不知道各位知不知道生物测量这块什么仪器测量最简便？紫外应用的多吗？简介：专业的生物紫外可见分光光度计优化生化分析，预设的程序和LabPro®生物软件使得核酸和蛋白质的测量变得非常简单，微量比色皿和多点比色皿可以减少实验样品用量，这款仪器在提供完整的解决方案分析DNA、RNA和蛋白质的同时其高性价比也使其更具有竞争力。主要参数波长范围：190-1100nm光源：氙气闪光灯检测器：512光电二极管阵列光谱带宽：2nm波长精确度：±1nm波长重复率：0.02nm

各位好！有个问题想请教大家：具体情况如下：配制60mg/L 重铬酸钾溶液，用岛津UV2450(普通紫外分光光度计)测量235nm、257nm、313nm、350nm出的吸光值，然后计算吸光系数，结果符合药典要求。现在有一台超微量紫外分光光度计，加样量2ul左右，测试的吸光度比岛津偏低，计算出来的吸光系数自然就比药典要求低！现在有问题：1、超微量紫外分光光度计是否能够用重铬酸钾溶液衡量吸光准确度？2、是所有的紫外分光光度计（无论普通还是微量），只要在量程范围内，测试同一物质吸光度是否都要一致？个人理解是需要保持一致！3、超微量紫外分光光度计通常用于核酸和蛋白浓度测量，如果重铬酸钾吸光系数不准确，是否影响核酸和蛋白的测量结果？4、如何评价超微量紫外分光光度计的性能？5、测量蛋白溶液的浓度CV很好，但是测量重铬酸钾的吸光值总在变化（不同时间测试变化较大，偏差可大于5%），又是什么原因？虽然对于上面的问题，我认为只要是紫外分光光度计，原理一致，那么在量程内就应该保证结果一致！现在想听听大家的意见和看法！

紫外线 ultraviolet简称为UV波长在100nm～380nm的电磁波，其中具有消毒能力的紫外线波段为200nm～280nm。 紫外线消毒 ultraviolet disinfection病原微生物吸收波长在200nm～280nm间的紫外线能量后，其遗传物质（核酸）发生突变导致细胞不再分裂繁殖，达到消毒杀菌的目的，即为紫外线消毒。 紫外线强度UV Intensity单位时间与紫外线传播方向垂直的单位面积上接受到的紫外线能。在本标准中紫外线强度被用来描述紫外线消毒设备的紫外线能。单位常用mW/cm2。 紫外线穿透率UV transmittance，简称为UVT波长为253.7 nm的紫外线在通过1cm比色皿水样后，未被吸收的紫外线与输出总紫外线之比。 紫外线剂量 UV dose单位面积上的接收到的紫外线能量，常用单位为毫焦每平方厘米（mJ/cm2）或焦每平方米（J/m2）。 设备紫外线平均剂量 reactor average dose, 简称为 AD将紫外灯简化为点光源，然后用点光源累加法计算消毒器内的平均紫外光强，再乘以平均曝光时间得到的剂量。平均剂量为紫外线消毒设备的理论剂量，由于这一剂量常用UVDis计算软件计算得到，因此有时也称UVDis剂量。 设备紫外线有效剂量 reactor effective dose, 简称为 ED紫外线消毒设备所能实现的微生物灭活紫外线剂量，或称之为紫外线消毒设备的生物验定剂量，统称为设备紫外线有效剂量。 紫外线剂量—响应曲线 UV Dose-Response Curve反映了某种微生物的灭活程度或消毒程度与其接受到的紫外线剂量之间的关系。灭活程度在图中通常以log10(N)或log10(N/N0)表示，N0 为紫外线照射前微生物的含量，N为紫外线照射后微生物的含量。 低压灯low pressure lamp水银蒸气灯在0.13Pa 到1.33Pa的内压下工作，输入电功率约为每厘米弧长0.5W，杀菌紫外能输出功率约为每厘米弧长0.2W，杀菌紫外能在253.7nm波长单频谱输出。低压高强灯 low pressure high output lamp水银蒸气灯在0.13Pa 到1.33Pa的内压下工作，输入电功率约为每厘米弧长1.5W，杀菌紫外能输出功率约为每厘米弧长0.6W，杀菌紫外能在253.7nm波长单频谱输出。中压灯 medium pressure lamp水银蒸汽灯在0.013MPa到1.330MPa的内压下工作，输入电功率约为每厘米弧长50 W到150W，杀菌紫外能输出功率约为每厘米弧长7.5 W到23W，杀菌紫外能在200nm～280nm杀菌波段多频谱输出。新紫外灯 new ultraviolet lamp初始运行100h经过稳定磨合后的紫外灯。紫外灯老化系数CLH lamp aging factor紫外灯运行寿命终点时的紫外线输出功率与新紫外灯的紫外线输出功率之比。紫外灯套管结垢系数CJG lamp fouling factor使用中的紫外灯套管的紫外线穿透率与洁净紫外灯套管的紫外线穿透率之比。紫外灯运行寿命 operation life of UV lamp紫外灯有效输出的连续或累计运行时间。紫外线消毒器 UV disinfector可以进行紫外线照射的腔体和容器。紫外线消毒器由紫外灯、石英套管、镇流器、紫外线强度传感器、清洗系统等密闭在容器中的部件组成。 紫外灯模块组 UV modules以明渠作为紫外线照射的腔体。紫外灯模块组由紫外灯、石英套管、镇流器、紫外线强度传感器、清洗系统等组成。紫外线消毒设备验证 UV disinfection equipment validation紫外线消毒设备的实际消毒性能,应由紫外线有效剂量、紫外灯老化系数、紫外灯套管结垢系数的有关实验来验证。

蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收，且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时，将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中，用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照，在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿，盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时，A280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值(A1%1cm)有文献数据可查，根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与(A1%1cm)值(即蛋白质溶液浓度为1%，光径为1cm时的光吸收值)的关系。文献值A1%1cm,λ称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度= (A280´10 )/ A1%1cm,280nm (mg/ml)(Q 1%浓度»10mg/ml)

UV紫外吸收法测protein蛋白质含量 蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的（NH4）2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。

环境保护部办公厅函 环办函1556号关于污水处理厂采用紫外吸收水质自动在线监测仪测定化学需氧量有关问题的复函

[url=http://www.f-lab.cn/spectrophotometers/nano.html][b]微量紫外可见分光光度计SPECTRO-Nano[/b][/url]是一种优质全光谱紫外可见分光光度计,用于定量评估DNA、RNA、蛋白质等的纯度。该微量光度计采用CCD探测器，耐用的氙灯光源灯，并且使用人性化软件。移液管0.5～2μL采样到底座上，放下取样臂，即可在7秒内完成测量。[b]微量紫外可见分光光度计SPECTRO-Nano[/b]特点开机即可测量，光源灯不需预热。全波长（200～800 nm），扫描范围为200～800 nm，5秒内完成。用户友好型软件，免费更新。将样品移到底座上即可测量，擦拭底座。仅用0.5-2ul样品进行直接微量体积测量，以精确测定核酸和蛋白质浓度耐用的氙气闪光灯，10次闪烁，使用长达10年不需要电池或试管和昂贵的消耗品检测核酸高达4500 ng/UL（dsDNA）[b][img=微量紫外可见分光光度计]http://www.f-lab.cn/Upload/Spectro-nano.jpg[/img][/b]更多分光光度计请浏览：[url]http://www.f-lab.cn/spectrophotometers.html?pagesize=20&p=1[/url][b][/b]

网上查到一份西安某大学的学报，里边介绍了日本某品牌紫外可搭配超速离心机进行基因工程的研究，我想请问下高手们：1、使用哪些机器搭配紫外能够达到分析DNA和蛋白质的目的？2、有使用过HITACHI紫外系列产品的高手能来回答下其分析软件（尤其是核算分析软件包）是需要独立购买的吗？

主要是测量固体、粉末和液体在不同波长的反射和透射，不必知道材料的组分。大概属于定性分析的范围，不是定量分析。怎么配置仪器最好（1）紫外可见分光光度计+傅里叶近红外红外光谱仪 分光光度计到900nm或1100nm,900nm - 25 um由傅里叶近红外红外光谱仪测量。（2）紫外可见近红外分光光度计+傅里叶红外红外光谱仪 分光光度计到2.5 um,2.5 um - 25 um由傅里叶红外红外光谱仪测量。这两种配置方法是否可行？有哪些型号可以完成？价格上哪个配置更合算？50万能否搞定两个仪器。请各位大侠指点迷津。谢谢！节日快乐！

主要是测量固体、粉末和液体在不同波长的反射和透射，不必知道材料的组分。大概属于定性分析的范围，不是定量分析。怎么配置仪器最好（1）紫外可见分光光度计+傅里叶近红外红外光谱仪 分光光度计到900nm或1100nm,900nm - 25 um由傅里叶近红外红外光谱仪测量。（2）紫外可见近红外分光光度计+傅里叶红外红外光谱仪 分光光度计到2.5 um,2.5 um - 25 um由傅里叶红外红外光谱仪测量。这两种配置方法是否可行？有哪些型号可以完成？价格上哪个配置更合算？50万能否搞定两个仪器。请各位大侠指点迷津。谢谢！节日快乐！[em09506]

听说杭州聚光已经批量生产紫外的荧光光谱仪了。为什么国内那么多的光谱仪厂家，都只做可见光的荧光光谱仪呢？问题是出在什么地方？一般来说，只要探测器的响应范围可以达到紫外，其他光学部件响应范围一般不是问题，所以是价格上出了问题吗？紫外探测器的价格比普通可见光探测器的价格高很多吗？

请教一个问题，单位需要采购一台全套液相色普仪，还需要一台紫外仪，用于作图的，应该买什么样的仪器呢？具体是买紫外扫描仪呢还是紫外分光光度计呢？－－－－－－急死我了，谢谢各位老师们。

环办函〔2013〕1556号　　广东省环保厅：　　你厅《关于污水处理厂采用紫外吸收水质自动在线监测仪测定化学需氧量有关问题的请示》（粤环报〔2013〕72号）收悉。经研究，函复如下：　　在严格执行有关环境监测技术规范，紫外在线监测仪测得的数据通过数据有效性审核、与国标方法测定的化学需氧量数据相关性达到显著水平并保证相关性稳定的前提下，污水处理厂采用紫外在线监测仪测定的化学需氧量数据可用于总量减排核算工作。　　环境保护部办公厅　　2013年12月26日

如题 ，液体紫外现在肯定没啥测试量了修正一下，我说的是测试量，因为我们实验室基本都是固体紫外，我就想起了一个有趣的问题，以后液体紫外会不会被淘汰呢?不知现在大家用紫外固体多还是液体多？

如何选择紫外分光光度计？主要考虑光学构造、光谱范围、样品类型和分析工具。研究者们有众多的新紫外光分光光度计可选。自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后，已经形成了一种能解决广泛难题的仪器，从单一波长的测量到高性能多光谱的测量分析。科学家们选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑，光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。光学构造（OPTICAL CONFIGURATION）一般来说，紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义，单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物，然后再通过实际样品溶液，就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮（mirrored chopper wheel）将一束光分成两束，分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移（lamp drift）和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮，而是利用一种光束分光器来代替，将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度，所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。光源和检测方法（LIGHT SOURCES AND DETECTION）分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。 Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。一些仪器具有多种光源供选择：紫外光、可见光和甚至红外光（780 nm 至3,000 nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380 nm 到800 nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽（bandwidth）很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值，分光光度计制造商通常使用光电倍增管（photo-multiplier tubes，PMTs）和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度，并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。样品类型（SAMPLE FORMAT）在大部分的样品类型中，分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说，制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。用小试管cuvette装样品容量一般从1 μl-5ml，并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。数据管理（DATA MANAGEMENT）大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器，通常与PC机一起联用，需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。另外一个值得考虑的因素是数据的最终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。例如一些药物机构需要考虑美国FDA的要求和欧联盟的药物评价机构的要求选择不同的数据处理方式。（生物通：亚历）(http://www.ebiotrade.com/)

现在一般的化学、药物研究都采用液相等，说紫外检测不可靠。紫外检测到底与液相等仪器有何优越性？

紫外荧光定硫仪是目前国内最先进的硫元素同步测定仪，广泛被应用到检测液体、固体、气体样品中的硫含量。　　仪器采用紫外荧光法测定总硫的含量，系统关键部件采用进口元件，使得整机性能有了可靠的保证。　　仪器适用于测定石腊油、柴油、汽油、润滑油、燃料油、液化气及天然气，以及其它油品、化工原料及成品的总硫含量。　　工作原理：　　仪器采用紫外荧光法测定原理，样品经高温氧化反应，其中的硫化物宣地转化为SO2.样品气经过膜式干燥器脱去其中的水份，进入反应室。SO2经紫外线照射，产生特定波长的光谱，由光电倍增管检测接收。发射的荧光强度和原样品中硫的含量成正比，再经微电流放大、计算机数据处理，即可转换为与光强度成正比的电信号，通过测量其大小即可计算出相应样品的含硫量。

紫外荧光定硫仪是目前国内最先进的硫元素同步测定仪，广泛被应用到检测液体、固体、气体样品中的硫含量。　　仪器采用紫外荧光法测定总硫的含量，系统关键部件采用进口元件，使得整机性能有了可靠的保证。　　仪器适用于测定石腊油、柴油、汽油、润滑油、燃料油、液化气及天然气，以及其它油品、化工原料及成品的总硫含量。　　工作原理：　　仪器采用紫外荧光法测定原理，样品经高温氧化反应，其中的硫化物宣地转化为SO2.样品气经过膜式干燥器脱去其中的水份，进入反应室。SO2经紫外线照射，产生特定波长的光谱，由光电倍增管检测接收。发射的荧光强度和原样品中硫的含量成正比，再经微电流放大、计算机数据处理，即可转换为与光强度成正比的电信号，通过测量其大小即可计算出相应样品的含硫量

紫外荧光定硫仪是目前国内zui先进的硫元素同步测定仪，广泛被应用到检测液体、固体、气体样品中的硫含量。　　仪器采用紫外荧光法测定总硫的含量，系统关键部件采用进口元件，使得整机性能有了可靠的保证。　　仪器适用于测定石腊油、柴油、汽油、润滑油、燃料油、液化气及天然气，以及其它油品、化工原料及成品的总硫含量。　　工作原理：　　仪器采用紫外荧光法测定原理，样品经高温氧化反应，其中的硫化物宣地转化为SO2.样品气经过膜式干燥器脱去其中的水份，进入反应室。SO2经紫外线照射，产生特定波长的光谱，由光电倍增管检测接收。发射的荧光强度和原样品中硫的含量成正比，再经微电流放大、计算机数据处理，即可转换为与光强度成正比的电信号，通过测量其大小即可计算出相应样品的含硫量。

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紫外辐射照度标准(紫外能量计 紫外强度计） 紫外辐射照度计常常称作为UV能量计。随着经济的发展，紫外辐射照度计（UV能量计）在工业上的运用越来越多，紫外辐射照度计的溯源也越发显得重要。 一：国际上对紫外波段的划分不统一。 目前中国对于紫外辐射波段的划分，是分为A1、A2、B、C四种波段。对应于上述四种波段的紫外光源有高压汞灯、黑光型高压汞灯和低压汞灯。 中国紫外辐射照度工作基准主要由光谱辐射计、标准紫外辐射照度计、各种紫外光源等组成，用于贮存和复现紫外辐照度量值。但由于上述标准建于1989年，已不能完全满足现代市场对紫外辐照计的量值溯源要求。随着国外此类仪器的引进逐渐增多，紫外辐照计的校准已出现了多国标准共存的局面，从而给广大的紫外辐射照度计用户造成困扰。 二、各国标准共存的市场 目前，美国、德国、日本这三个国家生产的辐照计的国内市场占有率还是相当大的，相对来说仪器做的也不错，稳定性好，使用寿命长。但是却存在着很大的问题，即便是同一个国家的标准似乎也不能做到完全统一。比如美国的标准，紫外辐照度都溯源到NIST，但却产生了不同的测量结果。最典型的两家辐照计生产商，EIT和International Light，同样测A波段的仪器，用国家标准做检定，EIT的示值误差有30%~70%，而International Light的示值误差却可以控制在10%以内，也就是基本和国家标准一致。 德国和日本的仪器也存在同样的问题，都有和国家标准一致的仪器也有测量结果相距甚远的仪器。如某德国产同一厂家不同型号的两款仪器，测量波段一致，测出的结果却相差甚远。这可能是由于校准光源或者仪器探测器的光谱响应不尽一致造成的。 总之，国际上对于紫外辐照度没有一个统一的标准来约束生产商造成了多国标准共存的局面，这也给紫外辐照度的计量带来困难。 这里有必要说一下中国的紫外辐照度标准在国际比对中的情况。2002年12月，中国计量科学研究院（NIM）参加了由亚太计量规划组织（APMP）举办的国际上首次“UVA探测器的照度响应度国际比对APMP PR-S1”。比对结果表明：在7个参加实验室中，NIM的量值与国际参考值最为接近，窄波段UV365照度响应度和宽波段UVA照度响应度与国际参考值的偏离量分别为-0.57%(k=2)和-0.53%( k=2)。在特定条件下，宽波段紫外辐射度的量值复现不确定度也由原来的10%( k=1)改善为2.0%( k=1)。应该说，中国现有的紫外辐射照度标准是值得信赖的。 三、应对和解决方法 针对这种比较混乱的局面，最好的解决方法莫过于统一标准。就现在工业生产中使用的紫外辐照度计而言，多数用在紫外固化和紫外曝光上，测量UV炉或者UV灯管的辐射照度或者能量，波段处于UVA和UVB，用于测量紫外辐射能量的仪器多一点，俗称UV能量计。 对于使用和校准，我们建议： 1、同一个公司尽可能的使用同一厂家同一型号的仪器，便于量值统一，便于公司内部记录和比较。用同一间公司不同型号照度计进行测量，测量结果可能也有较大差异。 2、工业用UV灯的辐照度不是很稳定而且不均匀，测量时最好多测几次。UV灯一般在开启后需要一段时间，发光情况才趋于稳定。 3、对于很多用于测量固化能量的仪器，很多情况只是在意一个读数，比如根据生产经验，用某仪器测得1000mJ/cm2能量下，固化良好，也许这台仪器和国标相差很大，但是你只要知道这台仪器测到1000mJ/cm2那就是正常，这时要关注的只是仪器的年变化率，或者根据校准证书给出的数据将仪器加上一个修正系数，修正后重新记录一个读数。 4、并不是所有的仪器都可以按照现有的国家标准来校准的，所以当仪器被检出测量误差很大时，确认一下仪器的测量波段是否和国家标准一致，如不一致，要么送回原厂检，要么根据校准证书修正后，参照地使用。 5、由于紫外辐照计制作探测器材料的特殊性，年变化率还是比较大的（特别是国产仪器，国外仪器做的相对较好），再加上使用频繁，很容易产生量值漂移，如对量值产生怀疑最好及时送检。 6. 注意紫外辐照计的使用寿命，特别是对接近使用寿命或者超期使用的紫外辐照计，应参照地使用。 7、对于某些特殊辐照计，测大量程的（比如W或J级别的），特殊波段的（比如UVV波段可见光辐射），暂无检定规程，可送原厂、国家计量院等单位进行校准。 最后简单说一下C波段的仪器，这类仪器主要用于医疗领域，因为短波段的紫外线有杀菌消毒作用，测量的范围相对较小，此类仪器大多国产，与国标一致程度高。

请高手告知，用紫外仪器测试DNA和RNA是怎么回事？

[align=left]紫外分光光度计大量用于实验室研究。如何选择和购买紫外分光光度计对于研究人员来说是很重要的。紫外分光光度计该如何选择呢？[/align][align=left]紫外分光光度计的选择主要考虑光学构造、光谱范围、样品类型和分析工具。[/align][align=left]研究者们有众多的新紫外光分光光度计可选。自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后，这种能解决广泛难题的仪器可以从单一波长的测量到高性能多光谱进行测量分析。科学家们选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑，光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。[/align][align=left][color=#4687dd][b]光学构造（OPTICAL CONFIGURATION）[/b][/color][/align][align=left]一般来说，紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义，单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物，然后再通过实际样品溶液，就能得到吸光结果。[/align][align=left]双光束型则是通过一个斩光轮（mirrored chopper wheel）将一束光分成两束，分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移（lamp drift）和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮，而是利用一种光束分光器来代替，将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度，所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。[/align][align=left][color=#4687dd][b]数据管理（DATA MANAGEMENT）[/b][/color][/align][align=left]大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器，通常与PC机一起联用，需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。[/align][align=left]另外一个值得考虑的因素是数据的最终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。例如一些药物机构需要考虑美国FDA的要求和欧联盟的药物评价机构的要求选择不同的数据处理方式。[/align][align=left][color=#4687dd][b]光源和检测方法（LIGHT SOURCES AND DETECTION）[/b][/color][/align][align=left]分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。如果需要更大的灵活性，研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器，可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。[/align][align=left]紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。[/align][align=left]一些仪器具有多种光源供选择：紫外光、可见光和甚至红外光（780nm至3000nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380nm到800nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。[/align][align=left]分光光度计的带宽（bandwidth）很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。[/align][align=left]为了测量吸光值，分光光度计制造商通常使用光电倍增管（photo-multiplier tubes，PMTs）和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度，并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。[/align][align=left][color=#4687dd][b]样品类型（SAMPLE FORMAT）[/b][/color][/align][align=left]在大部分的样品类型中，分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说，制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。[/align][align=left]用小试管cuvette装样品容量一般从1μl～5ml，并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。[/align]