紫外菌落计

[color=#444444]最近做菌落总数，空白总是被污染。我重做了三四次空白还是要长菌落。以前在同样的环境下，甚至为了赶时间，在做实验之前都没开紫外灯杀菌的情况下它都不长菌！现在条件好了空白总是要长也不知道啥原因。[/color]

[align=center][font='calibri light'][size=21px]浅谈水中菌落总数的检测方法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之前在研究奶中菌落总数的检测方法的时候，偶然看到了水中菌落总数的方法，就想到既然都是液体，那是不是可以尝试用检测水中菌落总数的方法去检测牛奶中的菌落总数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]我们先来看看水中菌落总数检测的方法。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第一种：平皿计数法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]这个计数法是通过数菌落，一个单菌落就代表原样品中的一个单细胞。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法：样品10倍稀释→1ml稀释样品+15ml营养琼脂（45℃）混合→冷却凝固→37℃，48h培养。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]之后根据稀释倍数和取样接种量换算样品含菌数。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]第二种：酶底物法[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]原理：不同细菌分泌的不同产物可分解不同底物产生同一种信号——荧光，此信号可以在366nm的紫外灯下显示，数对应荧光孔数查MPN表得结果，稀释水样范围＜738MPN/mL。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]方法：1mL待测水样+9mL无菌水摇匀（培养基）→倒入定量盘，水平摇晃将液体充满孔槽→竖盘，棉条吸取多余水分→反向放置→37℃，48h培养→用366nm紫光灯照射，数带有荧光孔的数量。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]当时看到这个方法之后，就想到是不是能用这个方法检测牛奶的细菌总数，然后询问了一下师傅，才知道平皿计数法可以用于牛奶细菌总数的检测，但是酶底物法不太合适。因为水中除了细菌分泌产生的东西外，没有其他的物质。但是牛奶不一样，牛奶中含有脂肪，蛋白质，乳糖，矿物质等其他的物质，如果使用酶底物法会产生较大的误差，不适合牛奶的细菌总数的检测。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]虽然没有发现新的检测牛奶中细菌总数的方法，但是也学会了水中菌落总数的方法，希望能够对各位朋友提供帮助。[/size][/font][/align]

图中所示，用滤膜法做的总大肠菌群。100ml水样。国标规定的辨析特征描述为：1、紫红色、具有金属光泽的菌落。 2、深红色、不带或略带金属光泽。 3、淡红色、中心色较深的菌落。我的疑问是：图中1 所示，依据国标所述，紫红色具有金属光泽的容易看出，直径也较大。但是，除了那些紫红色较大的菌落外，其他的红色的直径较小的是不是总大肠菌群呢？图1 除了那些紫红色较大的菌落外，其他的红色的直径较小的是不是总大肠菌群呢？[img=690,520]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709051124_01_3295384_3.jpg[/img]下图2，另一个水样，没有明显的紫红色金属光泽，图2中所示，是不是都应该计数为总大肠菌群呢？[img=690,587]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709051134_01_3295384_3.jpg[/img]刚学微生物检测，请教各位帮忙辨认一下，在此感谢。