军团菌检测

2012年初，香港新港府总部多处发现退伍军人杆菌，证实是会议厅的厨房和立法会综合大楼3楼茶水间的两个样本，检出嗜肺军团菌。港府大楼求诊的8名员工，基本都是24岁至42岁青壮年，检测结果显示，无须入院，或可能是流感样型。换季时节，是军团菌高发的季节，由嗜肺军团菌引发的军团菌肺炎在非典型肺炎中是病情严重的一种，未经有效治疗的病死率高达20%。　　嗜肺军团菌是一种有鞭毛，革兰氏阴性，军团菌属多形态性的短小球杆菌。嗜肺军团菌不抗酸，无孢子，无荚膜，类似于杆菌。不能分解明胶、糖类或尿素，不可参加酵解反应。嗜肺军团菌无色，也非自身荧光。氧化酶与过氧化氢酶测试呈阳性，为β-内酰胺酶阳性。专性需氧，在自然界可长期存活，如在蒸馏水中可存活100d以上，污水中可存活一年，对热和一般消毒剂敏感。菌落特征为灰白色，有光泽，湿润，圆形，凸起，并有特殊臭味。革兰氏染色不明显，多用镀银法或Giemsa法染色。嗜肺军团菌　　卫生部于2006年颁布了《公共场所集空调通风系统卫生管理办法》、《公共场所集中空调通风系统卫生规范》，规定对集中空调系统冷却水和冷凝水作出了嗜肺军团菌“不得检出”的规定。　　流行病学研究阐明，冷凝塔、加湿器及风管等是病原体的来源，空气及气溶胶是病原体的传播媒介。夏季和秋季是军团菌最适宜生长的季节，也是发病率最高的季节。　　军团菌的检测军团菌因为个体小，生长缓慢，难检出，并具有传染性，对检测实验室和实验人员的操作有相当高的要求。近日，我要测工作人员联系了广州工业微生物检测中心，了解了嗜肺军团菌的检测方法及检测过程：　　嗜肺军团菌的检测　　国内外的军团菌检测方法主要依据 ISO11731-1:1998 ISO 11731-2：2004(E)、《军团菌的检测和计数》及《公共场所集空调通风系统卫生管理办法》。定性测试两种方法的检测步骤大致相同，基本包括以下步骤：　　1. 采样及运送　　采样容器可为无菌玻璃瓶,聚乙烯瓶或无菌采样袋，并且瓶口或袋口能密封；采样量一般在300-400ml 左右，如果经过氯或臭氧消毒的水，采样后加入少量硫代硫酸钠溶液，以中和样品中的氧化物；采样至送达实验室最长时间不得超过2天。嗜肺军团菌取样　　2. 样品处理　　对含少量军团菌的样品一般用薄膜过滤法来浓缩样品的浓度，如有杂质的样品可静置沉淀或离心过滤去除，并对样品进行热处理和酸处理以减少非军团菌的生长。嗜肺军团菌样品前处理　　3. 接种和培养　　军团杆菌在分类学上是一种独特的需氧革兰氏阴性杆菌，无荚膜，在普通培养基上不生长，属于细胞内寄生菌。目前标准培养基为活性碳酵母浸膏琼脂平板，也称军团菌生长平板(BCYE)。接种在 BCYE 平板上的样品在温度为35-37º C，培养10天，在浓度为2.5% CO2 的环境下培养更有利于军团菌的生长。军团菌的菌落通常呈白色、灰色、有荧光。接种和培养　　4. 军团菌的鉴定　　挑取至少3个疑似军团菌的菌落接种至军团菌生长 BCYE 平板和半光氨酸缺失的 BCYE-Cys 平板，在35-37º C条件下培养至少5天，凡是在 BCYE 平板上生长而在平板和半光氨酸缺失 BCYE-Cys 平板上不生长，并且血清学阳性的的则判为军团菌。嗜肺军团菌检测嗜肺军团菌检出　　嗜肺军团菌的预防　　第一，，对军团菌主要滋生地 -- 中央空调系统、冷热水循环系统、冷凝脱水盘、空气加湿器等进行定期清洁处理。定期更换冷却水和冷冻水，避免贮存水长期滞留，保证空调系统注入水的洁净，必要时采取杀菌杀藻等消毒措施；定期清洗空调冷却塔及管道，对大型建筑物的中央空调系统要定期使用消毒抑菌剂清洁。　　第二，使用空调(包括冬天使用暖空调)的房间应经常开窗通风，经常保持室内环境的卫生和空气流通，有条件的话对室内空气进行净化和杀菌处理。　　第三，使用空调期间，一旦出现发烧、咳嗽、胸痛、呼吸不畅，不应只考虑“感冒”，应及时就诊检查，警惕军团菌病。只要早期发现及时治疗，效果较好。　　关于广州工业微生物检测中心　　广州工业微生物检测中心通过了CNAS实验室认可及广东省CMA计量认证，已为多家星级酒店、商业广场及企业的生活用水、冷却塔、泳池水等水源提供了检测及咨询服务，出具的军团菌检测报告得到国家卫生监督部门的承认。

军团菌（Legionella）是一种广泛存在于自然界中的机会致病菌，是一种能够引起呼吸道传染病的细菌，最为多见以临床类型为以肺部感染为主，同时伴有全身多系统损害的军团菌肺炎。目前已发现了超过30种军团杆菌，至少19种是人类肺炎的病原，其中最常见病原体为嗜肺军团菌，占病例的85%~90%。军团菌常隐藏在空调制冷装置中，随冷风吹出浮游在空气中，吸入人体后引起上呼吸道感染及发热症状，严重者可导致呼吸衰竭、肾衰竭甚至死亡。&zwnj 由于军团菌肺炎与其他肺炎不易区别，&zwnj 且老年人容易受到侵犯，&zwnj 一旦患病，&zwnj 病情相当严重。&zwnj 因此，&zwnj 对空调通风系统中军团菌的检测至关重要。我国对于空气和集中空调通风系统中军团菌的检测已形成多项标准，其中有《GBT18204公共场所卫生检验方法》第3部分：空气微生物、第5部分：集中空调通风系统、第6部分：卫生监测技术规范，《WS394-2012公共场所集中空调通风系统卫生规范》等，标准要求军团菌“不得检出”。环凯微生物气溶胶采样器是根据相关标准的要求，基于液体冲击式采样法为原理而开发的全新产品，能高效的采集空气及空调送风中的嗜肺军团菌。本采样器是采用前置大流量虚拟冲击空气微生物气溶胶浓缩装置、标准微生物液体撞击采样器相结合的新型空气微生物采集装置，摒弃了传统笨重的真空泵，采用自行研发且具有自主知识产权的轻便采样装置，采集空气样本时流量大，能在短时间将空气中的微生物浓缩到液体采样器中，避免长时间采样带来的生物活性损失，能简便高效解决传统空气采样器对于中低浓度微生物气溶胶捕获效率低下的问题，并有效提高采样人员的工作效率。1、主要产品特点● 实时显示采样数据:根据需求设置采样时间或采样总量，实时显示采样流量、浓缩流量、采样时间、总流量、已完成采样信息等。● 3种采样方式：程序采样、定体积采样、手动采样可选。● 程序采样：可实现单次或最多255次自动间隔采样，可满足多种采样要求。● 高效液体冲击式气溶胶捕集装置：对0.5μm以上生物粒子有效捕集效率90%以上。● 可追溯性：大容量设备运行存储，可自动记录4000组采样数据（含设定的采样地点号、采样分组号、采样量、采样时间等），可通过输入时间段随时查询对应时间段的采样记录数据 USB数据线简单快速接入电脑，通过HKM数据管理软件，实现高效追溯管理，并导出采样数据用于报告和分析（部分型号)。● 3.5寸高清液晶触控屏幕∶显示内容丰富，人性化菜单设置，操作界面简洁易懂。● 总气路和浓缩气路同时采样:可手动调节流量，双气路同时采样，同时显示双路流量。● 内置可充电电池，方便外出采样，有效捕集总生物气胶或活生物气胶有效时间达8小时以上2、嗜肺军团菌采集方案表货号名称规格单位11001010空气微生物气溶胶浓缩采样器（含液体冲击式采样器）ACS-150ACS-150套32647458微生物气溶胶采样器 EHK 225-9595 单个装（气溶胶浓缩采样器配套）EHK 225-9595套071910（嗜肺）军团菌生化鉴定盒7种×10次7×10支/盒盒CP0020BCYE平板（军团菌生长平板）90mm*20个90mm*20个盒1206194嗜肺军团菌 GDMCC1.1266 ATCC33152GDMCC1.1266支CP0040GVPC选择性平板（军团菌选择性平板） 90mm*20个90mm*20个盒CP0030BCYE-CYS平板（BCYE无L-半胱氨酸平板） 90mm*20个90mm*20个盒CP0020BCYE平板（军团菌生长平板）90mm*20个90mm*20个盒026072采样吸收液1-GVPC培养基基础 250克250克瓶SR0570GVPC液体培养基配套试剂（含SR0570A和SR0570B）A*10支+B*5支盒050090酵母提取粉 BR 400gBR 400g瓶

p　　当在空调制冷装置被军团菌感染时，人体可能会患上严重甚至致命的军团病。因此，定期检查水中的细菌是非常重要的。慕尼黑工业大学最新研发的芯片承诺将比以往更快检测出军团菌。检查军团菌的典型方法包括将水样放入培养皿中，然后等待10至14天，观察是否有细菌培养物生长。/pp style="text-align: center "img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201803/insimg/2f990a73-392e-4f8c-89e9-60679b3e89e0.jpg" title="NewsDataAction.png"//pp　　不幸的是，军团菌数量可在短短一周内达到爆发水平。此外，如果爆发已经发生，则需要尽快确定其来源。因此慕尼黑工业大学研究人员创建了全新的LegioTyper芯片。/pp　　慕尼黑工业大学开发的便宜一次性设备包含20种不同抗体的微阵列。其中每一种都与不同的嗜肺性军团病杆菌亚型结合。如果有任何这些亚型出现在水样中，芯片将在34分钟内检测到它们的存在。/pp　　该研究论文最近发表在《生物传感器和生物电子学》杂志上。/p