在做空气中菌落总数的测定时,配置培养基时怎样调节培养基的PH在规定的范围内?做培养皿时,用什么东西往培养皿内加琼脂?有本书上说用"半自动平皿琼脂加液器",这东西是不是必须的?[em23]
如题,各位老师们,最近在测室内空气中菌落总数时,书上说的是在一批现场采样中,应留有2个采样管不采样作为空白。我们是准备测宾馆里的菌落总数,按照书上说的,是同一批的话,是一个宾馆带2个空白,还是宾馆中每个要测的房间里都各带2个空白呀?请各位老师帮帮忙[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907291059348360_2018_3469239_3.png[/img]
车间员工手部和空气菌落总数最大限量是多少?谢谢~~
车间员工手部和空气菌落总数最大限量是多少?有没有相关的标准呢?能否给个建议啊??
微生物只做空气菌落总数,阳性菌不做,对微生物实验室有什么要求?需要显微镜吗?需要阳性对照间吗?需要生物安全柜吗?最基本需要什么?欢迎大家讨论。
空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量标准GB/T 18883-2002附录D,室内空气中的菌落总数计算公式是什么?
1.菌落总数的测定:是以检样中的细菌细胞和营养琼脂混合后,每个细菌细胞都能形成一个可见的单独菌落的假定为基础的。由于检验中采用37℃于有氧条件下培养(空气中含氧约20%),因而并不能测出每g或mL检样中实际的总活菌数,厌氧菌、微嗜氧菌和冷营菌在此条件下不生长,有特殊营养要求的一些细菌也受到了限制,因此所得结果,只包括一群能在普通营养琼脂中发育、嗜中温的、需氧和兼性厌氧的细菌菌落的总数。2.鉴于食品检样中的细菌细胞是以单个,成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在,因而在营养琼脂平板上出现的菌落可以来源于细胞块,也可以来源于单个细胞,因此平板上所得需氧和兼性厌氧菌菌落的数字不应报告活菌数,而应以单位重量、容量或表面积内的菌落数或菌落形成单位数(colony forming units,CFU)报告之。3.每种细菌都有它一定的生理特性,培养时,应用不同的营养条件及其他生理条件(如温度、培养时间、pH、需氧性质等)去满足其要求,才能分别将各种细菌都培养出来。因此,要得到较全面的细菌菌落总数,应将检样接种到几种不同的非选择性培养基上,并培养在不同条件下,如温度,氧气供应等。但国家颁发的食品卫生标准对不同食品的菌落总数的规定,都是根据用普通营养琼脂进行需氧培养所得的结果确定的,因此在食品的一般卫生学评价中并不要用几种不同的非选择性培养基培养。
大家帮帮忙,我们测空气的菌落总数,用下面这条公式计算出来后,超了多少就算超标了呢?谢谢·~感激不尽。菌落总数=50000N/ATN:平均数A:面积T:时间是不是计算下来小于4700就算超标了呢??
[font=SimSun, STSong, &]微生物实验:空气的培养皿有菌落,这次实验的数据还可以用吗?还是说要重新做? [/font]
一、菌落总数介绍: 菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。 菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。 菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。二、检验方法 菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。 基本操作一般包括:样品的稀释--倾注平皿--培养48小时--计数报告。 国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。 检验方法参见: GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定》 SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品菌落计数》三、说明(一)样品的处理和稀释: 1.操作方法:以无菌操作取检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。 固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min,制成1:10的均匀稀释液。 用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。 另取1ml灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。 2.无菌操作:操作中必须有“无菌操作”的概念,所用玻璃器皿必须是完全灭菌的,不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装,应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。 操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟,每个平板不得超过15个菌落。 3.采样的代表性:如系固体样品,取样时不应集中一点,宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨,液体样品须经过振摇,以获得均匀稀释液。 4.样品稀释误差:为减少样品稀释误差,在连续递次稀释时,每一稀释液应充分振摇,使其均匀,同时每一稀释度应更换一支吸管。 在进行连续稀释时,应将吸管内液体沿管壁流入,勿使吸管尖端伸入稀释液内,以免吸管外部粘附的检液溶于其内。 为减少稀释误差,SN标准采用取10mL稀释液,注入90mL缓冲液中。 5.稀释液:样品稀释液主要是灭菌生理盐水,有的采用磷酸盐缓冲液(或0.1%蛋白胨水),后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品(如酱油)进行稀释,可以采用灭菌蒸馏水。(二)倾注培养 1.操作方法:根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。 将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。 待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,取出计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每克(每毫升)样品所含菌落总数。 2.倾注用培养基应在46℃水浴内保温,温度过高会影响细菌生长,过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴,应以皮肤感受较热而不烫为宜。 倾注培养基的量规定不一,从12~20ml不等,一般以15ml较为适宜,平板过厚可影响观察,太薄又易于干裂。倾注时,培基底部如有沉淀物,应将底部弃去,以免与菌落混淆而影响计数观察。 3.为使菌落能在平板上均匀分布,检液加入平皿后,应尽快倾注培养基并旋转混匀,可正反两个方向旋转,检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过[
触目惊心的食品安全问题食品安全一直是人们关注的话题,有毒大米、三聚氰胺、陈馅月饼、豆奶中毒、苏丹红、湖南某茶油、染色馒头、回收奶事件、食用明胶、某火腿肠的“咀虫门”……,一件件触目惊心的事件,时刻惊醒着食品安全的重要性。近期,各地食品监管部门,纷纷出击:山东各地加强夏季食品安全监管、四川“黑名单”重点监管滥用食品添加剂企业、江苏省食品药品监督管理局印发全省食品药品监管系统宣传、 湖北七措施强化保健食品监管……[img]https://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180528/6c22a53dc8c0493aa8531f64eaba6e8e.jpg[/img]作为食品人,关注的是食品安全的技术层面,不少食品技术人员,往往会困惑于这么几个问题:加工过程,符合规范,看不到什么不良之处,可食品的菌落总数经常超标 或者,出厂时是合格的,随后又出现菌落总数超标问题。问题不仅仅在于此,还有储存、运输、销售等众多环节。仔细分析,其实问题出在食品消毒(杀)菌技术的选择或者使用中出现短板。[img]https://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180528/a03e3f976d1542b8a6f0578f089927cd.jpg[/img]夏季食品厂微生物污染问题原因分析炎炎夏日微生物繁殖迅速,各种菌落等频繁出现,对于国内食品企业来说,要保障其企业产品的消费市场,必须着重从产品卫生方面下手,所以夏季的食品安全相对来说并的尤其重要。我想国内很大一部分企业还是在为食品加工过程中如何确保卫生、灭菌效果而感到头疼。传统的车间内部灭菌方法为药物喷洒,以此来保持食品车间内的卫生清洁。但会带来一定的不良影响,而且国家对食品加工企业实行质量准入制度(QS),对食品加工企业的生产环境提出了更高的要求。采取安全可靠而无副作用技术在食品加工过程中进行灭菌,成为众多科技人员的研究课题。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180528/b94cf10d54cf4232a17a64c102ba2fb3.jpeg[/img][/align]随着时代的变迁,紫外线杀毒以及臭氧杀毒开始慢慢被广大食品企业运用,并在应用中取得的卓越的贡献,但在经过数年的使用后其缺点也开始被各企业关注。用紫外线或臭氧对车间进行杀菌,消毒不彻底及对人体健康有危害。这种缺点带来的后果就是食品车间内含菌空气二次污染的传播。由于很多食品企业在生产的环节中,其产品因加工需要在空气中进行一系列生产操作。细菌的迅速繁衍及人身上的发菌(新陈代谢),使得空气环境中积累了大量的污染物,再次二次污染食品,为食品的日后变质留下隐患。而食品车间内的紫外线、臭氧消毒措施不能对空气进行彻底净化,最终导致空气中的微生物对食品侵害。[img]https://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180528/431fdf9aaac24dd394fc45df4ed741e9.jpg[/img]如何控制食品厂微生物污染消毒灭菌剂是指用于杀灭传播媒介上病原微生物,使其达到消毒或灭菌效果及无害要求的制剂。在食品厂生产加工过程中,消毒剂起到了十分重要的作用,通过对环境空气中微生物数量的控制,可防止食品污染。通过以上传统杀菌消毒方法比较,因消毒杀菌能力的各不相同,在环境问题日益吐突出的今天,己无法满足食品企业的需求。基于这种情况及国内食品车间内的消毒空缺,一种名为奥克泰士杀菌消毒剂横空出世,2015年进入中国市场,短短几年的时间,在国内食品企业被广泛运用。奥克泰士杀菌消毒剂源于德国,由济南辰宇环保科技有限公司引进,可彻底解决夏季食品厂微生物污染问题。[img]https://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180528/e64c688ef7f0447fbc6ffc6f27513e6c.jpg[/img]奥克泰士奥克泰士是进口欧洲德国,专为食品厂空间消毒设计,食品级高浓缩型杀菌消毒剂。无色无味无残留,对快速杀菌等特点,成为很多食品企业日常空间消毒的首先产品。其完全可以达到无菌车间消毒要求,主要成分为食品级过氧化氢和银离子组成的复合型溶剂,ISO9001/ISO14001管理体系认证,IFS国际食品标准认证,欧盟EMAS检测认证、德国莱茵TUV认证等。所采用的氧化剂为过氧化氢,它与稳定剂结合形成复合溶液。作为催化剂添加的痕量银离子可以保持长久的效用。银离子的杀菌作用是基于单价银离子通过共价键和配位键来与细菌蛋白质牢固结合,从而使细菌钝化或沉淀。能在洁净区空间消毒中迅速杀灭空气中的霉菌、细菌及员工自身的发菌,(包括芽孢)或者抑制微生物繁殖的进口高效消毒剂。通过将消毒产品用高压气雾机(LS280型气雾机)喷雾到空间中,达到快速杀菌的效果,使受控环境保持在“无菌无尘”标准,控制食品在制作及包装等各个环节的微生物二次污染问题,并且具有长效抑制微生物生长的作用。[img]https://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180528/7f75dbd85c9b4890922fdf8bc2414777.jpg[/img]奥克泰士产品特点1、完全环保,完全生物可分解,对人、畜无害,无腐蚀性,无残留。2、无色,无气味,无味道,不起沫,完全溶于水。不会改变接触物品的口感、颜色、PH值。3、见效快,作用时间长,效果明显,能完全杀死有害菌。4、应用弹性大:在低浓度时,依然有显著效果,在高达95摄氏度时仍然能起作用。5、具有超强的杀菌能力集:杀菌控菌,消毒,除藻、除生物膜等多项功能于一体。能够解决食品饮料细菌超标等问题,同市场上类似的产品相比,奥克泰士不会使细菌产生抗药性和耐药性。6、光谱杀菌效果,可杀灭有害菌以及有害微生物种类包括:大肠杆菌(Bacillus mesenterious)、粪链球菌(Streptococcus faecalis)、嗜热菌(Pyrodictium)等130 多种。作用效果相当持久,不受外界条件影响。可杀灭有害菌以及有害微生物种类,可以直接有效的杀灭食品饮料中常见的大肠杆菌、霉菌,酵母菌 乳酸菌等。7、产品应用简单,无需特殊装置。不需要投入太多的人力、物力以及掌握太多的技术就可以应用,关键是可以节约更多的成本。8、产品来源于德国,达到欧盟的各项要求和安全认证,同时经过国内最权威机构的检测,完全符合HACCP的要求。[img]https://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180528/5b07295cf08646d981250a05ef7754a5.jpg[/img]
一固体样品作菌落总数测定,其中10-1平板菌落数多不可计,10-2平板菌落数为271,10-3平板菌落数为60,则该样品菌落总数( )个/g。 A、27000 B、27100 C、60000 D、43550
空白菌落总数总是有针尖大小的菌落,是怎么回事?但是倒不加生理盐水,只加培养基是没有菌落的
菌落总数的快速测定方法1 适用范围:可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。2 方法原理:将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑(TTC)显色剂等加载在试纸片,经加样、培养后,细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑,通过计数报告结果。3 操作方法3.1样品处理:无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内,经充分振摇(均质)做成1:10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。以此类推,做出1:1000等稀释度的稀释液,每个稀释度更换一支灭菌吸管。3.2接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的纸片上,轻轻将上盖膜放下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。3.3培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。4 结果判断与计数:4.1细菌在纸片上生长后会显示红色斑点,选择菌落数适中(10个~100个)的纸片进行计数,乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时,按实有数报告。大于100时,用二位有效数字,二位有效数字后面的数字,以四舍五入方法计算,并以10的指数来表示。4.2计数原则与报告方式4.2.1通常选择菌落在10个~100个之间的纸片进行计数,乘以稀释倍数报告之(见下表中例次1)。国家标准菌落总数报告方式术语为cfu/g或mL,cfu的含义为菌落形成单位。4.2.2若有两个稀释度的菌落数在10个~100个之内,两者的比值小于2,则取其平均数,若大于2,则采用稀释度小者报告(见下表中例次2和例次3)。4.2.3若三个稀释度的菌落数都有在10个~100个之内时,应选择二个低数值的平均数(见下表中例次4)。4.2.4若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时,应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数;或采用均小于数量标准的最小值,或采用均大于数量标准的最大值(见下表中例次5和例次6)。 例次稀释度两稀释 度之比选定计数 稀释度报告方式 (个/g或 个/mL)10-110-210-31 2 3 4 5 6158 208 265 98 8 295
最近试做了几个样,全部无菌落,已恒温控制了培养基的温度为48度,甚至试做了一个没有添加防腐剂的样品,还是无菌落,有没有可能是因为刚灭完菌的培养皿和生理盐水温度太高烫死了,摸着都烫手,培养基应该没变质,在保质期内,在无菌落的皿上按手印培养后有菌落生成
本课内容:菌落总数测定的一些要点根据食品卫生标准要求和对样品污染情况的估计,选择2~3个稀释度。加入样品时要注意外来的污染。培养基倾注的温度与厚度是实验正确与否的关键。(倾注的温度:一般35~45℃,温度过高会造成已受损伤的菌细胞死亡。厚度:直径9cm的平皿一般要求15~20mL培养基,若培养基太薄,在培养过程中可能因水分蒸发而影响细菌的生长)。为防止细菌增殖及产生片状菌落,在加入样液后,应在15min内倾注培养基。检样与培养基混匀时,可先向一个方向旋转,然后再向相反方向旋转。旋转中应防止混合物溅到皿边的上方。l培养基凝固后,应在尽快将平皿翻转培养,保持琼脂表面干燥,尽量避免菌落蔓延生长,影响计数。l为控制污染,在实验过程中,应在工作台上打开一块琼脂平板,其暴露时间应与检样从制备、稀释到加入平皿时所暴露的最长时间相当,然后与检样一同培养,以了解检样在操作过程中有无受到来自外界的污染。培养温度:每种不同样品中的细菌都有一定的生理特性,培养时应用不同的营养条件及生理条件可能得出不同的结果,因而应根据检测标准的要求选择适当的培养温度和培养时间。l食品:36±1℃,48±2h 。l饮用水:36±1℃,48h 。l水产品:30±1℃,72±3h。(36℃培养和30℃培养结果差别较大,同样水产品48h结果和72h也有差别。对照试验:l检样的稀释液中往往带有食品颗粒,在这种情况下,为避免与细菌菌落混淆,可作一检样对照,不经培养,置4℃环境放置,在计数时用于对照。l或可选用TTC营养琼脂作培养基。菌落计数:l如果高稀释度平板上的菌落数比低稀释度平板上的菌落数高,则说明检验过程中可能出现差错或样品中含抑菌物质,这样的结果不可用于结果报告。l如果平板上出现链状菌落,菌落间没有明显的界限,这可能是琼脂与检样混匀时,一个细菌块被分散所造成的。一条链作为一个菌落计。若培养过程中遭遇昆虫侵入,在昆虫爬行过的地方也会出现链状菌落,也不应分开计数。l如果平板上菌落太多,不能计数时,不能用多不可计作报告。应在最高稀释度平板上任意选取2个1cm2的面积,计算菌落数,除2求出每cm2面积内平均菌落数,乘以63.6(皿底面积cm2数)。l如果检样是微生物类制剂(酸牛奶、酵母制酸性饮料等),在进行菌落计数时应将有关微生物(乳酸菌、酵母菌)排除,不可并入检样的菌落总数内作报告。每个样品从开始稀释到倾注最后一个平板的时间不得超过15min,目的是为了使菌落能在平板上均匀分布,否则,时间放长了,样液可能由于干燥而贴在平板上,倾注琼脂后不易摇开,容易产生片状菌落,影响菌落计数。另外,琼脂凝固后不要在室温长时间放置,应及时将平皿倒置培养,可避免菌落的蔓延生长。检验过程中应用稀释液做空白对照,用以判定稀释液、培养基、平皿或吸管可能存在的污染。同时,检验过程中应在工作台上打开一块空白的平板计数琼脂,其暴露时间应与检验时间相当,以了解检样在检验过程中有无受到来自空气的污染。检样稀释液有时带有食品颗粒,为避免与细菌发生混淆,可以作一检样稀释液与平板计数琼脂混合的平皿,不经培养,于4℃冰箱放置,以便在计数时用作对照。另外也可以在已熔化而保温在45℃水浴内的平板计数琼脂中,按100ml加1ml0.5%氯化三苯四氮唑(TTC)水溶液,培养后食品颗粒不变色,细菌为红色。
做菌落总数测定的时候,所有培养基都多覆盖了一层培养基,空白组没长菌,12个平板但是大部分接种的培养基菌落表面还是长了菌,很多几乎是全部覆盖了,但是也有2个表面没长弥漫性菌落的 是怎么回事
[font=宋体][size=16px]菌落总数的测定方法,看似非常简单,但由于食品种类繁多,食品中可能存在的微生物菌群较多,要在同等条件下把所有的细菌培养出来,反应样品的真实情况,实属不易。[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]菌总计数容易会出现哪些问题呢?[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]1、在营养成分单一、保存条件苛刻的食品(水、水产品等)中,微生物复苏、生长缓慢,培养48h计数时容易遗漏[/size][/font][font=宋体][size=16px]2、一些食品处理后,仍存在类似菌落的颗粒状杂质,很难判断是菌落还是杂质[/size][/font][font=宋体][size=16px]3、一些食品容易污染变形杆菌等运动性较强的蔓延菌,培养后无法计数。[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]关键是,能力验证是考察实验室检验能力的外部质量活动,组织方提供试验样本,在菌落总数项目上,一般会考虑增加上述难度。[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]防止蔓延的方法有哪些?[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]No.1 增加覆盖一层琼脂培养基[/size][/font][font=宋体][size=16px]蔓延菌大多为需氧菌,覆盖一层琼脂的目的是隔绝空气,降低需氧菌生长速度。[/size][/font][font=宋体][size=16px]No.2 添加TTC[/size][/font][font=宋体][size=16px]TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑),不仅可以使菌落产生红色,便于辨识,也可部分地抑制大片蔓延菌落的形成。[/size][/font][font=宋体][size=16px]No.3 陶瓦盖代替平皿盖[/size][/font][font=宋体][size=16px]用陶瓦盖代替平皿盖,可有效去除培养基表面水分,阻止细菌移动,有效抑制蔓延。倾注培养基凝固后,用陶瓦盖(干热灭菌)代替平皿盖,正置放入培养箱培养。[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]以上三种方法哪种最好呢?[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]方法:我们分别采用PCA直接倾注法、覆盖一层培养基法、TTC法、用陶瓦盖代替平皿盖法对同一样本进行菌落总数计数。其中,TTC培养基冷却至56℃左右加0.5%的TTC溶液(1mL/100mL)。陶瓦盖法平皿正置放入培养箱培养。[/size][/font][font=宋体][size=16px]从6小时开始观察菌落生长情况并计数,以后每隔12小时观察1次。[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]结果[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]PCA直接倾注法菌落生长相对较快,培养24h,菌落数已达到峰值,其他方法平板培养36h或48h后,达到峰值。[/size][/font][font=宋体][size=16px]添加TTC的平板菌落生长相对比较缓慢,且培养到最后,菌落依然比较小,但总体检出数值较高。其原因是TTC平板能将部分细小菌落,或生长于琼脂内部、颜色与平板颜色相近,肉眼不易观察的菌落计出。[/size][/font][img=,690,813]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211070918314989_1061_1954597_3.png!w690x813.jpg[/img][img=,690,785]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211070918517051_3470_1954597_3.png!w690x785.jpg[/img][font=宋体][size=16px]单因素方差分析,P>0.05(95%置信度),四种试验计数结果并无显著差异。按照微生物能力验证的数据统计分析原则,当Z≤2时方为满意结果。因此虽然方法之间数据差异不大,但有必要提高检验技术,将结果控制在最准确的数值范围之内,才能保证在能力验证评价中取得满意结果。[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][b][font=微软雅黑][size=14px][color=#888888][b]文章来源:[/b][/color][/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=14px][color=#888888]网络,Lab PTP 能力验证平台[/color][/size][/font][b][font=微软雅黑][size=14px][color=#888888][b]封面图片来源:[/b][/color][/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=14px][color=#888888]创可贴[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=14px][color=#888888]会员,能力验证小编整理。[/color][/size][/font][b][font=微软雅黑][size=14px][color=#888888][b]提醒:[/b][/color][/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=14px][color=#888888]文章、视频、图片等所有内容,仅用于学习交流,若有侵权内容及其他涉法内容,请及时联系删除或修改。 特此声明![/color][/size][/font]
菌落总数,在菌落总数测定中,有了均质机和涡旋混合仪,还需要振荡器吗?望老师不吝赐教
在做沙门氏菌时,在HE培养基上长出桔红色菌落,培养基也变成红色了,做革兰氏染色为阳性菌,请问这是什么菌?各位大神有知道的么?
[img=,690,112]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/04/202404091628166498_4458_5519762_3.png!w690x112.jpg[/img]1、给定一个洁净室,对其进行浮游菌采样,采样后TSA平皿按上述标准培养,请问培养后菌落里是否可能有致病菌?因为采样器是不分辨空气中细菌种类(全量采集),谁也不知道空气中是否有致病菌,是不是培养后有可能有致病菌。2.还有TSA培养基限制致病菌繁殖吗?3.还有菌落计数后的样品,是否不管其是否潜在涉及致病菌,都要高温灭菌后,当危险废物处理,还是确认不涉及致病菌后,计数后不高温灭菌,当危废处理?不太懂微生物,求教。
细菌:湿润,粘稠,易挑起放线菌:干燥,多皱,难挑起,菌落较小,多有色素酵母菌:湿润,粘稠,易挑起,表面光华,比细菌的菌落大而厚霉菌:菌丝细长,菌落疏松,成绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状,无固定大小,多有光泽,不易挑起细菌:一般形成较小的圆形菌落,颜色有白色、黄色等,表面光滑或不光滑放线菌:菌落背面有同心圆形纹路。这点可以和细菌菌落区分。酵母菌:菌落为淡黄色,光滑,半透明,比细菌菌落大。霉菌:菌落大型,肉眼可见许多毛状物,棕色、青色等,可见黑色的分生孢子群。转
[align=center][font=宋体]菌落总数的检验讨论[/font][/align][align=center][font=宋体] [/font][/align][font=宋体][font=宋体]概念理解[/font] [/font][font=宋体]1、菌落总数英译实为需氧菌平板计数,并不表示实际样品中的所有细菌总数。由于倾注平板法的局限,会有一部分细菌在该实验条件下不生长,故计数结果要比实际值低。 [/font][font=宋体]2、菌落总数并不能区分其中细菌的种类。实际上是把检样中的致病菌、非致病菌、酵母 菌、霉菌都计算在内的微生物杂菌总数。 [/font][font=宋体]3、菌落总数的卫生学意义:用于判定样品受污染的程度、微生物生长存活动态,对样品进行综合卫生评价。反映食品被细菌污染的程度 预测食品耐放程度和时间 估测食品腐败 状况。[/font][font=宋体]菌落:[/font][i][font=宋体]Colony[/font][/i][font=宋体][font=宋体],单个微生物在适固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度;形成肉眼可见有一定细菌群落。[/font] [font=宋体]CFU: [/font][/font][i][font=宋体]Colony Forming Units[/font][/i][font=宋体][font=宋体],菌落形成单位[/font] [/font][font=宋体][font=宋体]鉴于食品的细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在,因而在平板上出现的菌落可以来源于细胞块,也可以来源于单个细胞,因而平板上所得菌落的数字不应报告活菌数,而应以单位重量、容积或表面积内的菌落数或菌落形成单位([/font][font=宋体]colony forming units,CFU)报告。 [/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]4.检验步骤直接上图[/font][img=,690,443]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308011004578351_4999_6113937_3.png!w690x443.jpg[/img][font=宋体] [/font][font=宋体]5.培养温度: [/font][font=宋体]? 一般食品:36℃±1℃,培养48h ±2h [/font][font=宋体]? 水产品: 30℃±1℃,培养72h ±3h[/font][font=宋体][font=宋体]注意呀:未加工水产品受到海洋和陆地细菌的污染,[/font] [font=宋体]水产品的培养温度,由于其生活环境水温较低,检验时应采用[/font][font=宋体]30℃±1℃。水产品定义见GB 2760或GB2762 [/font][/font][font=宋体]此处并非指水产制品[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]6.[/font][font=宋体]操作注意事项:[/font][font=宋体][font=宋体]每个样品从开始稀释到倾注平皿所用的时间不得超过[/font][font=宋体]15min,主要为 [/font][/font][font=宋体][font=宋体]防止细菌增殖和产生片状菌落。(因肠杆菌科繁殖一代所需的时间为[/font] [/font][font=宋体]20min,故选择在15min内) [/font][font=宋体]? 样液与琼脂应充分混合,避免将混合物溅到平皿壁和皿盖上。平皿内 [/font][font=宋体][font=宋体]琼脂凝固后,不要长时间放置,然后倒置培养,可避免菌落蔓延生长。[/font] [/font][font=宋体]? 检样过程中应用稀释剂做空白对照,用以判定稀释液、培养基、平皿或吸管可能存在的污染。应为吸取1mL空白稀释液加入到两个无菌平皿内,可表示为空白对照平皿结果0/0。[/font][font=宋体][color=#000090] [/color][/font][font=宋体][font=宋体]选取菌落数在[/font][font=宋体]30~300CFU之间,无蔓延生长的平板计数 [/font][/font][font=宋体][font=宋体]低于[/font][font=宋体]30的记录具体菌落数,大于300的 可记录为多不可计,每个稀释度采用两个平行的均数。 [/font][/font][font=宋体][font=宋体]有较大片状菌落生长者不宜采用,若片状小于平板一半时且余部均匀分布,则以半个平板菌落数[/font][font=宋体]2倍报告 [/font][/font][font=宋体][font=宋体]无明显界限链状菌落每条单链视为一个菌落[/font] [font=宋体](可采用覆盖方式减少菌落蔓延,如对水产、蜂蜜样品时)[/font][/font][font=宋体] [/font]
一般我们做液体样品的菌落总数检测,菌落在平板上都很细小,有时一眼看上去根本没有,非常仔细看才能看到很小的小点点在培养够48h的情况下,这样的算不算到有效菌落的统计里?如果要计数的话,很难判断是菌落还是别的什么,而且即使用菌落计数器数也很伤眼睛如果不计数的话,多培养几天后有些菌落会长大一点点,感觉的确是菌落那这些细小的点点算不算到菌落总数里呢
员工手部的菌落总数可不可以直接在培养基上涂抹呀?以前是用棉球檫拭后稀释培养,我现在想用倒好的培养基直接用手涂抹来检测菌落总数,不知道可不可以!做过的培养可以指教一下!谢谢
昨天做了一下车间的空气菌落数,一共5个皿,沉降5分钟,但是今天发现其中一个皿的局部集中生长了20多个菌落,聚成一团,其他的四个皿,都只长了1,2个,不知道这是什么原因,那么我应该怎么样报结果啊?请各位赐教
食品检测中一次菌落的鉴定【生活中的仪器分析】食品安全——“菜”米油盐酱醋茶大检测 最近我们做的样品到了国外之后,出现微生物偏高现象,菌落状态比较怪异,是一个小的白点,客户发过来菌落如图: http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312172036_482705_2082444_3.jpg http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312172036_482706_2082444_3.jpg 同时我们也在查找原因,由于我们的产品是粘粉产品,而且出现这种菌落的产品并不普遍,只是很少一部分,概率很低,通过对不同的原料和生产过程的半成品和接触面进行验证,最后发现在面包粉中偶尔会出现这种状况,在一次实验中被我们捕做到了,图片很相似:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312172042_482708_2082444_3.png http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312172042_482709_2082444_3.jpg 菌落为白色的小点,表面光滑、边缘整齐的菌落,菌落周围无溶血。国外客户怀疑为酵母菌,为了进一步的确认,挑取典型的菌落进行了纯化,并找专家使用VITEK进行进一步的鉴定,鉴定结果如下: http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312172046_482710_2082444_3.jpg生化卡成分http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312172049_482711_2082444_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312172049_482712_2082444_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312172049_482713_2082444_3.jpg 鉴定结果为Kocuria kristinae(克氏库克菌),属于微球菌科微球菌属,分布在自然环境及哺乳动物皮肤,革兰氏阳性,罕见运动,不生芽孢。严格好氧最适温度25~37℃。最初出现在脊椎动物皮肤和土壤,但从食品和空气中也常常能分离到。 微球菌属在自然界中的许多地方被分离出来,包括动物的皮肤、植物、土壤、入海口、海边沙地、海水和淡水中、乳制品甚至空气中,在哺乳动物的皮肤之中有大量的菌落存在。并不是日本客户怀疑的乳酸菌,我们现在主要还是从面包粉车间的卫生进行控制。 同时我们现在一直在监视面包粉的微生物指标,对于类似的菌落,我们也进行酵母菌的检测,从现在实验结果看来并不是酵母菌,实验还在持续中,欢迎各位专家多多指导。
微生物小白又要提问了,菌落(colony forming units)是微生物培养后,由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落,简称CFU。通常用个数表示。 那么在培养皿上刚开始显示出的菌落的形状,是不是都是圆形的呢? 因为看书看到微生物有杆状、纺锤状、葫芦状。所以看到两个圆珠状的东西联接在一起,犹豫这是一个菌落呢还是两个菌落呢? 如果菌落刚开始的形状都是圆形的,那么就好奇多问一句:为何都是圆形呢??
产品:烘焙行业主要为面包、蛋糕、饼干等产品,常用原料为面粉、马铃薯淀粉、蜂蜜、鸡蛋、奶粉、米糊粉、木薯粉、糖粉、膨松剂等为原料,经过面团调制、成型、焙烤、包装而成的一种半球形烘焙类糕点,营养丰富,深受儿童喜爱。目前,烘焙食品的微生物卫生安全性问题已是产品销售的主要问题之一,国家标准菌落总数小于1500cfu/g,产品水份控制在3%以下。其工艺流程如下:原料验收→筛分→配料→面团调制→压面切割成型→焙烤→冷却包装→检验→印码→装箱→成品。调查与分析: 食品微生物超标是诸多问题叠加而形成,只有系统的解决如下问题,尚可确保食品微生物卫生安全性:1、由生产时所用的工具、容器 、周转箱、周转车、工作平台等,因消毒不及时,与食品直接接触而导致细菌二次交叉感。2、包装材料储存间无空气消毒设备,导致空气细菌污染包装材料;在进入车间包装前未经过杀菌工序,因自身污染原因或过程中被二次污染。3、手消毒方式有缺陷,大部分企业采用过氧化物类消毒剂浸泡3 min达到灭菌效果,但上班时人员集中只能象征性地浸一下,再使用公用毛巾擦手,污染严重。 4、工作服、鞋靴消毒不彻底,由于清洗不及时或与私人衣服混放,相互交叉污染后,通过人员进出将细菌带进生产车间,污染车间环境。5、在冷却、内包装过程中,遭受空气中细菌二次污染,从而导致食品细菌含量超标。名词解释:1、微生物二次污染:指“产品已完成所有加工制作后(即为成品)又遭到污染源污染“。在食品生产中,原料被加工成半成品时,经高温或辐射消毒,微生物被基本消灭,但经高温处理的食品在冷却和包装环节,与车间空气等直接接触,如果这些空气或物品中含有较多的微生物,则微生物会附着在食品表面,再次污染食品。 2、微生物交叉感染:指“产品加工过程中被毒物、不洁物等污染”。食品在待加工过程中,工序中食品原料、半成品被食品加工器械、容器及人在相互或被动接触时,自身所含不洁物叠加污染,有害细菌便会大量繁殖增长,致使食品细菌超标,危害食用消费者身体健康。解决方案烘焙产品属热加工(200℃左右烘烤)糕点,欲控制烘焙产品菌落总数超标问题,需在产品烘烤后,包装前的工序中控制二次污染及交叉感染如下:1、在生产前对设备表面、工器具、包装材料等进行表面取样检测菌落总数,平时制定严格的清洗消毒程序,并派专人监督执行。2、员工采用全自动手消毒器消毒,在工作过程中,每隔1小时对手部进行消毒,即可杀灭手部细菌也可抑制手部生长,有效控制二次交叉感染,保障食品安全。3、冷却车间、内包装车间采用NICOLER动态消毒机,而非紫外线、臭氧等静态消毒设备,所谓的动态消毒是指:人和动态杀菌设备同处一个车间内,在工人操作的同时,使用动态杀菌设备对空间进行消毒,同时对人体无任何伤害,此种工作方式称之为动态消毒,简称NICOLER杀菌技术。
国标中检测绿脓杆菌时,可疑菌落需要验证,但是什么样的菌落叫做可以菌落?