定氮消化仪

按标准凯氏定氮法测蛋白时消化液混浊不清澈的原因是什么呀？

大家好，我是做色素中成分检测的，现在我需要测定色素中蛋白质的含量，有几个问题想请教大家 ***请问一下，微量凯氏定氮中样品一般要消化多长时间，怎样才叫消化完全，我上次实验了五个小时，书上说等泡漠完全停止就行了，但我的根本就没出泡漠，只是不停的冒烟，生成一些不溶性的物质，而且液体是黑色的，由刺鼻的气味。那些不溶性的物质是什么，怎样消除这一影响。***消化时温度的控制是不是很重要，用消化炉是不是好一些。***请问谁有专门测定样品中蛋白质的书或是资料，请帮一下忙。多谢了！！！

[font=SimSun]我现在做个测氮实验，消化用的是10ml浓硫酸，1ml样液，加1-2g催化剂，一般消化2个小时就够了【以前也做了几次，都用了这么久】，最近几次定氮瓶中老是黑色，5个小时都不呈现澄清的蓝绿色，求解[/font]

请问用凯氏定氮法消化酱油时，产生大量的气泡，能用什么方法减少气泡哪？今天我消化了4小时，还是没碳化完，且消化时产生大量的气泡，我只能加热一下，拿起等气泡消了再加热，效率很低，操作繁琐。诚恳请问？

请问用凯氏定氮法消化酱油时，产生大量的气泡，能用什么方法减少气泡哪？今天我消化了4小时，还是没碳化完，且消化时产生大量的气泡，我只能加热一下，拿起等气泡消了再加热，效率很低，操作繁琐。诚恳请问？

1.我要测土壤全氮，必须要用消化炉消化样品吗？可以用电沙浴或者油浴锅代替消化炉吗？另外开氏瓶可以用三角瓶替代吗？2.土壤全氮的测定用微量定氮还是半微量好，两张什么区别？

[color=#444444]我想测粥的蛋白质，但是在消化时，消化管老是因为升温时产生泡沫上升，使壁上有黑色残留物，这样不就会让最后结果不准确吗！请问有什么办法解决？[/color]

蛋白质为复杂的含氮有机化合物，是各种氨基酸以肽键连接而成，各类食品的蛋白质含量很不均匀，蛋白质含量是评价食物营养价值的重要指标之一。在食品中蛋白质含量测定方法中最常用最基本的方法是凯氏定氮法，在GB/T5009.5-2003中也将其定为法定检测方法，凯氏定氮法有常量凯氏氮法和微量凯氏定氮法。采用经典的凯氏定氮法比较费时费力，采用模块式消化、全自动凯氏定氮仪测定食品中的蛋白质，该方法比经典法快速，且数据准确可靠。1 材料与方法1．1 仪器与试剂1．1．1主要仪器：KjeltecTM2300型全自动凯氏定氮仪，DS-20消化炉及排废装置(均为瑞典FOSSTECATOR公司生产)，样品磨，电子天平(准确至0.0001克)。1．1．2主要试剂：浓硫酸；硫酸钾；硫酸铜；盐酸标准溶液0.1027mol/L；氢氧化钠溶液400g/L；1％溴甲酚绿和0.7％甲基红混合指示剂；1％硼酸吸收溶液；硫酸铵；蔗糖。所用试剂均为优质品。1．2 测定方法称取适量样品放入消化管中，加入0.2g硫酸铜，6g硫酸钾及约12mL浓硫酸慢慢摇动将样品浸湿。把消化管放入已预热至42℃的加热模块中，将抽气泵打开到最大。5min后，关小抽气泵至酸雾刚好充满排废罩，在试管中形成冷凝环。约60min样品消化至透明蓝绿色液体，取出冷却至室温。将消化管放入2300型自动凯氏定氮仪，关上安全门，待仪器自动蒸馏、滴定、计算并打印结果。2 结果与讨论2．1 精密度取3种蛋白质含量不同的样品，每种样品平行测定6次，从测定结果可见，该仪器的精密度良好（见表1）。表1 仪器精密度测定样品名称 蛋 白 质 含 量(g/100g) 平均值(g/100g) 相对标准差(RSD%)纯牛奶 3.18 3.17 3.20 3.19 3.18 3.18 3.18 0.34大豆 31.25 31.46 31.38 31.53 31.62 31.39 31.44 0.41螺旋藻粉 67.54 67.78 67.58 67.64 67.69 67.82 67.68 0.16

摘要：采用凯氏法测酱油中的蛋白质含量是国标推荐方法。关键词：全自动定氮仪、消化炉、酱油蛋白质含量引言：酱油等调味品的质量是牵涉到千家万户的日常消费品，酱油中蛋白质含量是酱油指标中重要指标.高等级的酱油含有较高的蛋白质含量。见表二和表三。 在酱油等日常消耗品也存在用色素调制，来糊弄消费者，损害消费者的健康。为此我们使用上海沛欧全自动定氮仪SKD-2000（采用国际通用的颜色法判断、国内领先、具有多项专利技术）红外石英辐射消化炉SKD-08S2.（获得绿色仪器奖和节能仪器奖）对二款酱油进行蛋白质含量检测。 前言:按GB18186－2000 酿造酱油 范围：本标准适用于第3章所指的酿造酱油。 参考文献： 凯氏法原理：酱油样品在浓硫酸和催化剂硫酸铜、硫酸钾高温下，把有机的细胞结构破坏，把氮元素和硫酸反应产生硫酸铵，（为了使得样品消化时不产生挂壁，必须采用样品孔间温差小和带程序升温功能的消化炉，否则会产生挂壁现象，导致消化失败）消化完成后，需要将样品冷却到40℃左右，再把消化管放入定氮仪上。仪器对消化管内自动添加稀释液、碱，反应杯内自动添加硼酸和显色剂。对消化管内样品加热蒸馏，逸出氨气和水蒸气混合气体，冷却成氨水流到反应杯内生成硼酸氨，同时用标准硫酸进行滴定，直到蒸馏结束和滴定到终点。仪器自动计算酱油中蛋白质含量（蛋白质系数取5.71）。仪器设备和试剂[font='Times New

在做总氮消化时，用压力灭菌器一般如何掌握压力的？你们的日常经验是什么？谢谢你的指教？

测量蛋白质含量时，连同称量纸和样品一起消化会对结果有影响吗

国产的塑料容量瓶确实不敢恭维其质量，我同事做土壤重金属测定，定容用的消化瓶（25ml），瓶颈太小，很难清洗，同时不容易倒液体，进口的Brand的倒是不错，但是又很贵。 不知道大家在用到需氢氟酸消化的消化液拿什么定容，因为在做土壤消解时，方法最后是加高氯酸冒白烟为止，这是不是意味着氢氟酸已经挥发完了，可以用玻璃容量瓶来定容了？？ 版内做土壤全消解的朋友是否提供点意见！！！

想知道三种混合态氮消化时的现象有人做过么三种混合态氮消化时有哪些现象啊需要分段消化么分段消化现象分别是什么样的？

燃烧法定氮仪也叫化学发光定氮仪，它与凯式定氮仪的区别体现在原理，测定对象，标准，样品量，价格，运行费用，分析速度，自动化程度，工作环境等方面，具体介绍如下：一、原理不同：凯氏方法是绝对测量；燃烧法是相对测量凯氏定氮仪是应用凯氏定氮法的仪器设备，凯氏方法是利用浓硫酸消化、碱性环境蒸汽蒸馏、硼酸吸收、指示剂滴定终点颜色判定法，根据滴定体积来计算出氮含量。燃烧法：在高温情况下，使用充足的氧气将样品全部燃烧，生成氮的氧化物，再还原出氮元素，利用TCD 检测器测量其信号强度，与事先标定的曲线进行比对，计算出样品中的氮含量。凯氏方法是绝对测量，与标准样品无关，可以直接测量标准品的含量，并用来检验仪器的准确性；燃烧法是相对测量，必须依靠标准品，标准品的准确性定标直接影响测量结果，没有办法检验仪器的准确性。二、测量的对象不同：凯氏测量的是氨态氮；燃烧法测量的是总氮样品中的氮含量根据定义不同有：总氮、凯氏氮、铵态氮、硝态氮、亚硝态氮；也可以分为：有机氮和无机氮。燃烧法测量的是总氮的含量。凯氏方法可以分别测量出来上述各个氮含量。样品不经过消化直接蒸馏测量，就是无机氮中的铵态氮；在蒸馏过程中加入催化剂将硝态氮、亚硝态氮转换成铵态氮，其结果就是无机氮。样品经过消化蒸馏得到的是凯氏氮，在消化前加入催化剂将硝态氮、亚硝态氮转换成铵态氮，得到的是总氮。因而燃烧法测量的结果总是高于凯氏氮的结果；没有人为掺假的食品，二者测量结果是一样的。三、标准不同：凯氏方法是所有样品的国标；燃烧法是参考方法凯氏方法是食品、饲料、土壤、环境、种子等样品中氮或蛋白质含量测量的强制标准，测量结果具有互通性和可比性。由于燃烧法和凯氏法测量的氮含量对象不同，造成样品种类不同、成份不一样，结果偏差也不一样。燃烧法不适合化肥中的氮含量的国家标准。四、样品量不同：凯氏方法是常量分析；燃烧法是微量分析凯氏方法是常量和半微量；燃烧法是从微量扩展到半微。凯氏法固体到5g、液体到15ml；燃烧法最多到1g。凯氏法可以一直使用最大量分析，而燃烧法如一直使用最大量分析，则燃烧后的无机残渣堆积在仪器里面，要求频繁清理，同时也会缩短仪器的使用寿命。对于均匀性不好的固体样品，脂肪高的食品，只能通过大取样量来减少测量结果的偏差，燃烧法显得稍微。困难；如大豆、玉米。此外鲜肉类食品，由于蛋白、脂肪分布不均匀，也建议是大的取样量。

一般而言，样品消化液需要用容量瓶作定容器具。目前多见用比色管来作定容，虽不符合实验规范，但操作起来方便很多，不知各位有和高招？

分析凯氏定氮法测定样品蛋白质含量时误差的主要来源以及应注意的事项。答： 凯氏定氮仪测定蛋白质含量的误差来源可能是样品、催化剂种类和用量、消化的时间、加碱液后的操作、蒸馏加热、清洗凯氏定氮仪的过程、凯氏定氮仪的气密性、氨气是否完全蒸馏出来；硼酸是否封住蒸馏管口、试剂的准确性、滴定终点的判断、滴定盐酸的浓度准确性等。注意事项：1、 样品的取用量应适中，以免影响后续反应。2、 加入的催化剂硫酸钾和硫酸铜的配比适宜。3、 催化剂的添加量一定要准确，否则催化速度不一致，导致反应程度和挥发的氨不一样，误差大。4、 消化过程中，消化的时间应该充分，确保消化完全，消化至溶液呈现透明的浅蓝色。5、 消化后要将液体充分冷却，定容到容量瓶中备用。6、 消化之前检查凯氏定氮仪的气密性良好，后用蒸馏水清洗凯氏定氮仪，要充分清洗。7、 消化过程中，加碱液后要迅速关闭进样口，防止反应放出的氨气逸出。8、 消化过程中，火焰的温度要适当，太小加热过慢，太大容易导致溶液暴沸甚至从进气口溢出。9、 消化过程中，用硼酸封住蒸馏管口，防止氨气逸出。10、消化过程中，加热应保持均衡，冷凝水流速控制均衡，防止出现倒吸。11、收集完氨气后，应用蒸馏水将蒸馏管口清洗，以收集在管壁残余的氨气。12、滴定的时候，要控制滴定的速度由快到慢，准确判断滴定终点。13、三次平行，保证收集的氨气的量应该相差差不多。

如题！在做氮含量过程中，用浓硫酸消化，消化温度过高，对含量有没有影响？

[size=18px][font=&] 蛋白质是构成生物体细胞组织的重要成分。食物中的蛋白质是人体中氮的唯一来源，具有不可替代的作用。含氮是蛋白质区别于其他有机化合物的重要标志。在检验食品中蛋白质时，通常是先检定出食品中的总氮量，然后乘以蛋白质换算系数，以此得到蛋白质含量。凯氏定氮法由Kieldahl于1883年首先提出，至今仍被作为标准检验方法。凯氏定氮法测定蛋白质分为样品消化、蒸馏、吸收和滴定过程。[/font][font=&]原理[/font][font=&]向样品中加入浓硫酸和催化剂，充分混匀，然后加热消化分解，样中碳和氢被氧化成二氧化碳和水，其中的有机氮转化为硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。[/font][font=&]样品消化[/font][font=&]浓硫酸具有脱水性和氧化性，可使有机物中的碳、氢被氧化为二氧化碳和水，蛋白质会分解为氨，然后氨与硫酸结合生成硫酸铵。通常加入硫酸钾和硫酸铜作为催化剂来加快蛋白质分解。硫酸钾可以提高溶液的沸点，一般情况下，纯硫酸的沸点在340℃左右，但是在添加硫酸钾后，可提高至400℃以上。提高温度使有机物加快分解。但是不能加入过多的硫酸钾，否则会因为温度过高，使生成的硫酸铵发生热分解成氨而造成损失。硫酸铜除作为催化剂外，还可以指示消化终点的到达，有机物全部消化完全后，溶液呈现清澈的蓝绿色，硫酸铜还可以做蒸馏时碱性反应的指示剂。[/font][font=&]蒸馏[/font][font=&]消化液中的硫酸铵在碱性环境下会转化成氨。为防止水中微量的氨气受热逸出，影响测定结果，所以水蒸气发生器中的水要保持酸性。硫酸铵是一种强酸弱碱盐，需要足够的碱液使结合态的氨完全反应并释放出来，这个过程中的氢氧化钠一定要过量，过量的氢氧化钠会与硫酸铜生成蓝色的氢氧化铜沉淀，氢氧化铜受热分解成黑色的氧化铜沉淀。检验蒸馏是否完成，可用奈氏试纸法，NH4+或NH3遇奈氏试剂会反应生成棕红色的碘化汞铵化合物。[/font][font=&]吸收[/font][font=&]加热蒸馏放出的氨可用硼酸溶液吸收，硼酸有吸收氨的作用，又因其呈微弱酸性，不影响下一步滴定时指示剂的变色反应。温度过高会使硼酸吸收液对氨的吸收作用减弱，从而造成损失，故一般不超过40 ℃。[/font][font=&]滴定[/font][font=&]待吸收完全后，用硫酸或者盐酸标准溶液进行酸碱滴定，滴定液的浓度直接影响结果的准确性，必须按照要求进行配制和标定。混合指示剂在中性溶液中呈灰色，滴定终点时液体呈灰色。[/font][font=&]注意事项[/font][font=&]①所用的试剂溶液应用无氨蒸馏水配制；[/font][font=&]②取样应具有代表性,取样前将样品充分混匀；[/font][font=&]③样品称量放入凯氏烧瓶时，切勿使样品粘附在瓶颈部，避免样品未消化完全而造成氮损失；[/font][font=&]④为了保证使烧瓶壁上的残渣消化完全，在消化过程中要不时地转动凯氏烧瓶；[/font][font=&]⑤消化脂肪或糖含量较高的样品时，易产生大量泡沫，为防止泡沫溢出，消化时应先消化加热并不断摇动，或者加入少量辛醇或液体石蜡或硅油消泡剂；[/font][font=&]⑥当样品消化液浑浊或未澄清透明时，可先将凯氏烧瓶放冷至室温后，再加入30%的过氧化氢，然后继续加热消化；[/font][font=&]⑦加碱后，漏斗要进行水封，避免因装置漏气造成氨的逸出影响结果的准确性；[/font][font=&]⑧要保证蒸馏装置不能漏气；[/font][font=&]⑨在蒸馏时反应室与外界存在的压力差，蒸汽可将氨带出。故蒸馏时，要保证蒸汽均匀、充足，中间不能停止加热，防止发生倒吸；[/font][font=&]⑩蒸馏前如果加碱后消化液呈蓝色而没有生成氢氧化铜沉淀，说明加入的碱量不足，需要适量补加碱；,蒸馏时为防止水蒸气发生器内液体爆沸，加入几片碎瓷片或大的玻璃珠，玻璃珠直径最好大于联通的玻璃管直径，以免玻璃珠进入玻璃管内影响蒸汽均匀、充足的输出；-冷凝管下端要插入硼酸吸收液液面以下，防止氨逸出，蒸馏完毕后先将冷凝管下端提离液面，再蒸1min后清洗管口，再移开吸收瓶，最后关掉热源，否则可能发生倒吸。[/font][font=&]常见问题解答[/font][font=&]一、消化过程中容易沾壁怎么办？消化后定氮瓶内有黑色残留物怎么办？[/font][font=&]解答：称样时需要注意切勿使样品粘附在定氮瓶颈部，避免因样品未消化完全而造成结果偏低。消化过程中如果发生沾壁在定氮瓶肚上或者定氮瓶肚上有黑色残留物，可以在消化较完全时摇动定氮瓶，把定氮瓶肚上的黑色物质摇洗下来。摇动的方法是取下小漏斗，戴上防烫手套，手掌紧握瓶颈，向前后侧甩，使瓶内液体呈半旋转半振荡状态，注意控制力度不要让液体溅离瓶口。[/font][font=&]二、硫酸钾的作用是催化剂吗？[/font][font=&]解答：硫酸钾的作用是提高溶液沸点，从而加快有机物分解。[/font][font=&]三、硫酸铜是否是消化终点以及加碱蒸馏时的指示剂？[/font][font=&]解答：硫酸铜的作用有三个，分别为：[/font][font=&]①催化作用：加速有机物的氧化分解。[/font][font=&]②消化完全的指示剂：使液体呈现蓝绿色澄清透明状态。[/font][font=&]③蒸馏时碱性反应的指示剂：产生褐色沉淀。[/font][font=&]四、混合指示剂必须临用时混合吗？[/font][font=&]解答：混合指示剂必须临用时混合。[/font][font=&]五、请问蒸馏的时取下锥形瓶，需要用洗瓶冲洗吗？不冲洗会有误差吗？[/font][font=&]解答：需要冲洗冷凝管下端以防止产生结果误差。蒸馏后移动蒸馏液接收瓶,液面离开冷凝管下端,再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部,然后取下蒸馏液接收瓶。[/font][font=&]六、蒸馏仪器的检漏如何操作？[/font][font=&]解答：可以将蒸馏装置连接好后，在接口以及瓶塞等可能漏气的地方滴加少量水，打开电炉加热，观察有无气泡产生。[/font][font=&]七、硼酸可以多加吗？[/font][font=&]解答：不可以。按国标的要求正确操作，10mL硼酸足够。[/font][font=&]八、滴定时消耗了很多盐酸溶液，能否换浓度高的盐酸溶液滴定？[/font][font=&]解答：不能更改国标给出的滴定液浓度。蛋白质含量较高的样品可以适当减少称样量，或合理范围内减少吸取消化液的体积V3。[/font][font=&]九、空白消耗标准滴定液的体积指的是什么？[/font][font=&]解答：试剂空白实验消耗的标准滴定溶液的体积就是空白体积。[/font][font=&]十、同时有两种蛋白怎么换算？[/font][font=&]解答：同时含有多种蛋白质，且折算系数不相同时可以按复合配方食品换算蛋白质系数。[/font][font=&]结语：凯氏定氮法经典、准确，适用于食品中蛋白质的测定。但是因样品中一般会含有一些非蛋白质的含氮化合物，所以凯氏定氮法测定结果为样品中粗蛋白质含量。然而，此法实际上测的不是蛋白质含量，而是通过测氮含量来推算出样品中蛋白质的含量。在凯氏定氮法中消化操作的条件是产生误差的主要原因，因此要格外注意。在实际的生产实验中，每一步应该严格按照标准的规定来进行操作。本文为笔者日常工作实验总结所得，望对实验者有些许帮助。[/font][/size]

蛋白消化液一般为黑色的，但是放置一段时间后，变成浅蓝色，不知是什么机理，对实验结果有什么影响没

由于本人的化学知识不足，请教一下问题？1.蒸氨时为什么蒸馏瓶内要加浓碱？吸收液为什么要用硼酸溶液？为什么要将冷凝管下端插入接收瓶液面下？能否用其它的酸代替硼酸？2.试样消化过程中 加入浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾的作用是什么？3为什么消化完全时试液呈兰绿色，而加入40％NaOH溶液变为深蓝色或棕黑色？ [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=36122]凯氏定氮的原理与方法[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=36121]凯氏定氮的原理和方法[/url]

原子吸收消化液的定容器皿，大家可能用的不一样，也可能因测定元素不同而异。欢迎广大版友投票讨论！

[font=仿宋][size=18px][color=rgba(0, 0, 0, 0.9)]采用清淡、易于消化的烹饪方法，如蒸、煮、炖等，而不是煎炸或烧烤，可以减少对消化道的刺激，帮助食物更好地被吸收和利用。[/color][/size][/font]

食品中蛋白质含量的现行国家标准和国际通行测定方法是经典凯氏定氮法， 作为一名分析人员，现在将凯氏定氮法原理，方法步骤和计算方法写出来，看看凯氏定氮法在蛋白质含量中的缺陷。何为凯氏定氮法？简单地说，凯氏定氮法是一种检测物质中“氮的含量”的方法。蛋白质是一种含氮的有机化合物，食品中的蛋白质经硫酸和催化剂分解后，产生的氨能够与硫酸结合，生成硫酸氨，再经过碱化蒸馏后，氨即成为游离状态，游离氨经硼酸吸引，再以硫酸或盐酸的标准溶液进行滴定，根据酸的消耗量再乘以换算系数，就可以推算出食品中的蛋白含量。一. 凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热，经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程，最后有机氮转变为无机氮硫酸铵，这一过程称为有机物的消化。为了加速和完全有机物质的分解，缩短消化时间，在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂，加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解，除硫酸钾外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等盐类类提高沸点，但效果不如硫酸钾。硫酸铜起催化剂的作用。凯氏定氮法中可用的催化剂种类很多，除硫酸铜外，还有氧化汞、汞、硒粉、钼酸钠等，但考虑到效果、价格及环境污染等多种因素，应用最广泛的是硫酸铜。使用时常加入少量过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物氧化。消化完成后，将消化液转入凯氏定氮仪反应室，加入过量的浓氢氧化钠，将NH4+转变成NH3，通过蒸馏把NH3驱入过量的硼酸溶液接受瓶内，硼酸接受氨后，形成四硼酸铵，然后用标准盐酸滴定，直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数，通过计算即可得出总氮量。在滴定过程中，滴定终点采用甲基红-次甲基蓝混合指示剂颜色变化来判定。测定出的含氮量是样品的总氮量，其中包括有机氮和无机氮。反应式如下：1.有机物中的氮在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，消化生成（NH4）2SO4 反应式为： H2SO4==SO2+H2O+ R. CH.COOH+==R.CO.COOH+NH3 NH3 R.CO.COOH+==nCO2+mH2O 2NH3+H2SO4==(NH4)2SO42.在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于 H3BO3 溶液中反应式为： 2NH4++OH-==NH3+H2O NH3+H3BO3==NH4++H2BO3-3. 再用已知浓度的HCI标准溶液滴定，根据HCI消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量。反应式为： H2BO3-+H+==H3BO3

对于食品、谷物、肥料、动物饲料及相关产品，全氮和蛋白质含量的测定是非常重要的。目前，用于农产品的最常用的定氮方法是Kjeldahl于1883年提出的凯氏法，虽然后来经过改进，但是消化时间长、难以把有机物定量转变成氨以及严重的环境污染是此法存在的典型问题在过去的十年里，一种快速、精确、低成本、无污染的定氮方法很快的在欧美国家得到了广泛应用，成为凯氏法的替代方法， 即杜马斯燃烧定氮法（Combustion Nitrogen Analysis ）。此法是Jean BaptisteDumas 于1831 年提出的，比凯氏定氮法早50 年，但是由于早期的定氮方法只能测定几个毫克的样品，使它在农产品等领域的实际应用中受到了极大的限制。近十年来，随着可以检测克级样品的杜马斯法快速定氮仪问世，拉开了其在食品、饲料、肥料、植物、土壤及临床等领域上广泛应用的序幕。本文着重介绍了Dumas 法的原理,杜马斯法与凯氏法的优劣,以及杜马斯法在国内外农产品领域中的应用。

各位好，已经发了好多个关于蛋白质生物价测定的了，得到了一些解答，很感谢。目前实验差不多完成了，在处理数据，我现在有个问题，尿氮中蛋白质含量可以直接除以所取的体积么？就像粪氮中除以质量一样？还有就是有些尿样我是这样做的，一般是直接混合尿样，取5ml消化定氮，还有些呢我感觉不够就先加了若干蒸馏水再从中取5ml做，这样两组出来的数据都能直接除以5ml么？会不会有差别啊？

酱油是我们日常生活中不可或缺的调味品之一,是我国传统的酿造食品,以大豆为主要原料,进行微生物发酵,将蛋白质分解为肽、胨及氨基酸,使产品具有鲜味,且具有丰富的营养。全氮指标是衡量酿造酱油产品质量好坏的重要指标之一,所以对产品检验结果的准确性应严格把握。国家标准检测方法《GB1818622000 酿造酱油》中采用凯氏定氮法测定酱油中全氮的含量,其测量不确定度来源于样品移取、消化、蒸馏、稀释标准溶液及滴定等过程，其经典仪器为定氮仪。通过对各个不确定度分量的计算合成,找出影响测量不确定度的因素,并对各个不确定度分量进行评估,最终给出样品中全氮含量的标准不确定度及扩展不确定度。1 　实验操作及数据1.1 　方法依据及原理按《GB18186-2000 酿造酱油》6. 3 规定的方法进行。酱油与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解的氨与硫酸结合成硫酸铵,然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后,再以盐酸标准溶液滴定,根据盐酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。1. 2 　实验条件及操作简述实验室温度在(20 ±5) ℃,样品混匀后, 取2.00 mL酱油消化, 消化完全后, 加碱蒸馏, 用2. 00 mL硼酸溶液接收,用0. 1012 moL/ L 盐酸标准溶液滴定馏出液至紫红色为终点,记录消耗盐酸标准溶液的体积V 为10. 20 ,10. 00 ,10. 10 ,10. 00 ,10. 10 ,10. 20 mL ,同时作空白试验V0 为0. 30 mL 。1.3 　评定依据JJ F1059-1999 测量不确定度评定与表示。2 　测量数学模型根据公式: X = 其中:X 　样品中蛋白质的含量,g/ L ;V 　样品消耗盐酸标准溶液的体积,mL ;V0 　试剂空白消耗盐酸标准溶液的体积,mL ;CHCL 　盐酸标准溶液的浓度,moL/ L ;V2 　用2. 00 mL 移液管移取样品消化液的体积,mL ;0. 014 　1moL/ L 盐酸标准溶液1mL 相当于氮的克数;数学模型可以简化为: X = 由此可以看出:对测量结果不确定度有影响的因素主要是取样量、消耗盐酸标准溶液的体积数及盐酸标准溶液的浓度。从数学模型可以看出,各影响参数相互独立,各参数的不确定度直接对检测结果不确定度产生影响,合成标准不确定度可用相对标准不确定度进行合成, 按照JJ F1059-1999 中6. 7 ,合成标准不确定度u (C) 进一步演化为对X 的相对合成标准不确定度的估算为： 其中: uc ( X) 　X 的合成标准不确定度,g/ L ;u( rep) 　重复实验的标准不确定度;u(V - V 0 ) 　样品扣除试剂空白后消耗盐酸标准溶液带来的标准不确定度,mL ;u( CHCl ) 　盐酸标准溶液浓度的标准不确定度,moL/ L ;u(V 1 ) 　用2. 00 mL 移液管移取样品消化液带来的标准不确定度,mL 。3 　不确定度来源分析从分析过程和数学模型分析,全氮测定不确定度的来源主要是样品取样、消化、蒸馏、滴定、标准溶液消耗体积及重复检测所带来的不确定因素,还有实验室环境条件变化带来的不确定度,综合归纳见图1 。4 　不确定度分量量化

用凯氏定氮法做饲料中的蛋白质含量，空白值变化，一起消化一起蒸馏下来的两个空白消耗结果不同，而且消耗差距大，用0.01硫酸标准溶液滴定，试剂都是分析纯，请帮忙分析一下原因，苦脑好久，万分感谢！