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酶标定定仪

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  • 关于美标产品伸长率标距的标定

    关于美标产品伸长率标距的标定

    关于美标产品伸长率标距的标定:此产品标准中规定了标距为50mm,这是在直径为12.5mm的情况下,如果试棒直径不为12.5mm,那么这里的标距50mm,是不是也应该相应的发生变化啊?我查询了一下相关美标,这里的标距直径比为4:1。[img=,690,283]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907311946573042_9439_3502509_3.png!w690x283.jpg[/img][img=,690,364]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907312003150252_3773_3502509_3.png!w690x364.jpg[/img][img=,690,552]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907312003164602_9274_3502509_3.png!w690x552.jpg[/img]

  • 【原创大赛】酶标仪的校准

    【原创大赛】酶标仪的校准

    本文主要从酶标仪的几个测量参数出发,再结合酶标仪的测量系统的几个关键部件,讨论测量得到数据出现问题时,可以通过调整那些部件尽量得到合格的测量值;在酶标仪的结构上有不清楚的,可以参考本人第三届原创大赛作品【第三届原创大赛】酶标仪的内部结构、故障判断以及排除测量原理:酶标仪的测量原理与紫外分光光度计一样,都是采用朗伯比尔定律;不过一般的酶标仪都是采用滤光片获取单色光【紫外分光光度计一般采用菱镜或者光栅】,关于如何获得每孔的光密度值一致,在后面将有介绍;线性相关性、重复性是很重要的,为此还需要稳定的测量溶液【标准板一般人都没有,所以选用了重铬酸钾的稀硫酸溶液】;测量方法与数据设备准备:两台酶标仪【最好有一台是鉴定合格的,一台是备用的,本次使用的两台新仪器,有一台已经鉴定合格】,含板孔的酶标板两块;试剂:重铬酸钾【分析纯】,硫酸【分析纯】,去离子水试剂配制:硫酸配制:取2.7ml浓硫酸加入到去离子水中,【一边加入硫酸,一边搅拌,顺序不可颠倒,否则很危险】冷却后定容到1L备用浓度一:称取0.35g重铬酸钾固体,加入到100ml硫酸溶液中溶解;浓度二:取20ml浓度一的溶液,加入到20ml硫酸溶液中混匀;浓度三:取10ml浓度一的溶液,加入到30ml硫酸溶解中混匀浓度四:取5ml浓度一的溶液,加入到35ml硫酸溶液中混匀浓度五:取2.5ml浓度一的溶液,加入到37.5ml硫酸溶液中混匀浓度六:直接用硫酸溶液即可测量模块每个孔中加入200ul溶液,具体的溶液如下板一第一、二列为浓度六溶液,第三、四列为浓度五的溶液,以此类推布满整个板板二选用浓度二的溶液,布满整个板每个空中加入200ul数据讲解首先使用板一进行两次间隔性,首次测定数据如下【8*12模块】http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312025_343315_1600026_3.jpg间隔三个小时后进行第二次测定,得到的数据如下http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312033_343319_1600026_3.jpg完成第二次测定以后,将该板转移到另一台经过第三方机构鉴定过的酶标仪上进行测定,数据如下;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312034_343320_1600026_3.jpg数据处理,经过计算,得到如下这个数值,并用Excel做了处理,得到相应的相关系数,乃至曲线公式首次测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312037_343321_1600026_3.jpg二次测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312037_343322_1600026_3.jpg对比测定数值http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312040_343325_1600026_3.jpg用板二测定得到如下数值,只要是测定横排的变异系数,最后还做了一下大概的不确定度计算,2.8%的整板变异,还算行吧;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312041_343326_1600026_3.jpg这就是大名顶顶的检测器,可一次完成八孔测定,整版完成需要十二次测定,一旦污染,板一测定过程中得到的CV%将变得很大;所以板一测得数据的CV很大时,可以检查一下这个地方是不是被污染了;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312330_343444_1600026_3.jpg下图就是已经变成单色光以后的光源,一个八个,对应上图的八个检测器,它采用了光纤传导技术,即一束经过了滤光片的光束照在很多根光纤上,每根光纤射入的光能量基本相同,再将这些光纤从数量上分为均一的8股,每股对应下图的一个光源,从而尽可能的保证每个光源的能量一致;板一的CV太大时也需要对此进行检查;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312331_343445_1600026_3.jpg光源与检测器【背面】的相对位置,已经部分检测器的电路原件;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312333_343448_1600026_3.jpg光源的旁边是一个定位用的感应器,用于定位;两个螺丝用于调整板孔停留的位置,不能乱动,只有在发现吸光度值均明显与标准酶标仪吸光度不同时,并且换过钨灯无效的情况下,再对此进行核查校准【一般情况下不动为好】http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312332_343447_1600026_3.jpg下图是板孔定位器,配套上图的感应器使用;图中的每个空代表一个停留点一个十二个位置,也就是每列孔停留测定定位;当板二的CV较大时,大家可以看看是不是这个定位卡条被损坏;有时候酶标仪报错显示“酶标板错误”时,也有可能是定位感应器被异物堵塞了感应不上http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312334_343449_1600026_3.jpg下图为酶标仪的外观图,这张图片是老图片了,大家可以在我去年的一篇原创中看到更对的酶标仪图片http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112312335_343450_1600026_3.jpg说道这里,很对的点已经差不多了,在此还有需要做一些说明1、Excel在处理线性系数的时候,0.999以上的直接被显示为1,这个已经通过第三方软件测试2、两台酶标仪时新仪器,两者的差异很小,数据接近,但时间太紧,用了一些去年的老图片上传了,不过结构完全一致的;3、选用重铬酸钾硫酸溶液的原因主要是应为它稳定,重复性测试的误差值相对更加真实一些;4、仪器的检验校准是一件很大的事情,所以我们不仅要知道所以然,还要知道其所以然【现象和原理都要知道】;最后,希望以后大家在写这类的时候,也把所有的东西都写进去,更加便于学习和处理存在的问题,当然上述提到的可能会有很多问题,希望大家提出意见一起讨论,一起学习;

  • 【分享】酶标仪校正程序

    酶标仪校正程序1.滤光片波长精度检查:将不同波长的滤光片从酶标仪上卸下,用UV-2201型紫外-可见分光光度计(波长精度±0.3nm)于可见光区对每个滤光片进行扫描,其检测值与标定值之差为滤光片波长精度。2.通道差与孔间差检测:通道差检测是取一只酶标板小孔杯(杯底须光滑,透明,无污染以酶标板架作载体, 将其(内含200ul甲基橙溶液吸光度调至0.500A左右)置于8个通道的相应位置,蒸溜水调零,1于490nm处连续测三次,观察其不同通道的检测器测量结果的一致性,可用极差值来表示。孔间差的测量是选择同一厂家,同一批号酶标2板条(8条共96孔)分别加入200ul甲基橙溶液(吸光度调至0.100A左右)先后置于同一通道,蒸溜水调零,于490nm处检测,其误差大小用±1.96s衡量。n 零点飘移(稳定性观察):取8只小孔杯分别置于8个通道的相应位置,均加入200ul蒸溜水并调零,于490nm处每隔30分钟测一次,观察各个通道4小时内吸光度的变化。附1:酶标仪校正程序3.精密度评价:每个通道3只小杯分别加入200ul高中低3种不同.浓度的甲基橙溶解,蒸溜水调零,于490nm作双份平行测定,每日测二次(上下午各一次),连续测定20天。分别计算其批内精密度,日内批精密度,日间精密度和总精密度及相应的CV值。4.线性测定:用电子天平精确称取甲基橙配制5个系列的溶液,于490nm平行测8次,取其均值。计算其回归方程,相关系数及标准估计误差s,并用±1.96s表示样品测量的误差范围.双波长测定评价:取一分甲基橙溶液,分别加入3种不同浓度的溶血液(测定波长为490nm,校正波长为585nm),先后于8个通道检测,每个通道测3次,51比较各组之间是否具有统计学差异,以考察双波长消除干扰组分的效果。5.一般酶标仪无585nm滤光片,可选用550nm或630nm滤光片。450nm 滤光片的检定选用普鲁兰溶液(校正波长为630nm)

  • 酶标仪性能评价指标与鉴定的基本方法

    1。方法与原理1。1滤光片波长精度检查及其峰值测定  1。1。1方法及其衡量的标准:用高精度紫外可见分光光度计(波长精度±0。3nm)对不同波长的滤光片进行光谱扫描,检测值与标定值之差即为滤光片波长精度,其差值越接近于零且峰值越大表示滤光片的质量越好,波长精度越高。  1。1。2理论基础:酶标仪的滤光片质量好坏,直接影响仪器的灵敏度高低,而滤光片的质量又是以其波长精度及其峰值指标来衡量的,因此滤光片波长精度及峰值是衡量酶标仪的重要参数之一,这在厂家的仪器说明书中虽未曾提及,但在仪器的实际使用过程中,我们发现对滤光片波长精度和峰值进行检查是重要的也是必要的,通过检查可以发现滤光片的波长标定值与实测值的符合程度,可以发现滤光片的质量是否符合要求。  1。2灵敏度和准确度的监测  1。2。1方法:  ①灵敏度:精确配制6ug/ml重铬酸钾(干燥)溶液(0。05mo1/L硫酸溶解),加入200ul重铬酸钾溶液于小孔杯中,以0。05mo1/L硫酸溶液作空白,于450nm(参比波长650nm)测定,其吸光度应≥0。01A。  ②准确度:准确配制:1mmo/L对硝基苯酚(提纯品)水溶液,然后以10mmo1/L氢氧化钠溶液25倍稀释之,加入200ul稀释液于小孔杯中,以10mmo1/LNaOH溶液作空白,于405nm(参比波长650nm)检测,其吸光度应在0。4A(0。395~0。408A)左右。  1。2。2说明:仪器的灵敏度和准确度主要受两个因素影响:一是滤光片波长的精度,二是检测器的质量。通常情况下,滤光片原因导致仪器的灵敏度和准确度下降比较容易检查;而检测器上海口腔医院质量区别则不易被发现,因此我们采用上述两种标准物质溶液对仪器检测器的质量进行定期监测,从而保证了仪器检测结果的可靠性。对于仪器准确性的测定,我们采用了文献报道的方法,经过多次在不同型号仪器间进行反复测定,结果发现该标准物溶液在450nm波长处有一较为恒定的测定值,由于酶标仪与其它分光光度计的光学原理不完全相同,故是否可以作为评价酶标仪准确性的参考方法还有待同行进一步研究考证。  1。3通道差与孔间差检测  1。3。1方法及其表达方法:  ①通道差检测:取一只酶标板小孔杯(杯底须光滑、透明、无划痕、无污染)以酶标板架作载体,分别加入三种不同浓度的甲基橙溶液200ul先后置于8个通道的对应位置,蒸馏水调零,采用双波长(测定波长490nm,参比波长630或650nm,以下均相同)连续测三次,观察其不同通道之间测量结果的一致性可用极差值来表示其通道差。  ②孔间差的测量:选择同一厂家、同一批号酶标板条(8条共96孔)分别加入200ul甲基橙溶液(吸光度调至0。065~0。070A)先后置于同一通道,蒸馏水调零,采用双波长检测,其误差大小用±1。96s衡量。  1。3。2理论解释:为了提高酶标仪的检测速度,根据96孔酶标板的规格特点,目前大多数厂家的中、高档酶标仪均采用8通道的检测器(部分中、低档酶标仪目前仍采用单通道)。因而它们每个通道的检测能力是不尽相同的,它是仪器内部的固有误差,与所测溶液浓度成正相关(不同检测器对不同浓度溶液的响应能力不同),所以通道差是衡量酶标仪性能良好与否的重要指标之一;其衡量指标用极差表示,这与厂家推荐的指标是一致的;极差值越接近于零,通道差越小,说明同一样品于不同通道检测结果的一致性越好。  由于不同厂家、不同批号酶标板之间的质量区别,导致孔与孔之间的检测结果也不完全一致,这与水平光路光度计的比色皿质量是否符合要求一样,因此我们认为孔间差是仪器外部的固有误差,只有准确测知孔间差,并对结果作出对应的校正,才能使检验结果更符合实际情况、更准确可靠;采用的评价指标(士1。96s)也是有利于结果校正的。另外,在设计孔间差测量的操作方法上,我们将200ul甲基橙溶液吸光度调至0。065~0。070A,是充分考虑到加样器的误差(上海求精公司,200ul,士2%CV),其目的是使加样误差控制在仪器的分辨率(0。01A)以下,这样也就避免了孔间差结果不因加样误差而导致假性增高。  1。4零点飘移  1。4。1方法:取八只小孔杯,分别置于八个通道的对应位置,均加入200ul蒸馏水并调零,采用双波长或单波长(490nm)每隔30min测定一次,观察8个通道4h内的吸光度变化。其与零点的差值即为零点飘移。  1。4。2测量原理:酶标仪的零点飘移通常是很小的,这是由于仪器在读数之前,先要做8个通道的本底测量(Io)。然后再读取样品板的各孔测定值(I),根据Beer‘slaw光吸收值=1ogl0(Io/I),每次读数经过如此的自动校正,使得读数误差大大降低,如次的测读方法无疑是非常正确的的;另外有的仪器是应用“DRLDYE”检测试条来进行绝对吸光度的校准的,因此在采用单波长测量时,会导致吸光度的假性增高,这种仪器可采取两种方法进行校正,一是选择一合适的参比滤光片进行双波长测定,二是引入修正参数,即在吸光度模式下单波长读取1个空白孔,其测试值和预测值之差值即为修正参数。所以零点飘移是评价仪器在一定时间内零点吸光度的变化趋势,与波长无关,它间接地反映了仪器内部检测系统在单位时间内处于工作状态下的稳定性及仪器的机械性能情况(连续进板、检测、退出),故它是评估仪器内部电路系统、光学系统(检测器)及机械系统良好与否的指标。  1。5精密度评价  1。5。1方法及评价指标:每个通道三只小杯,分别加入200ul高、中、低三种不同浓度的甲基橙溶液,蒸馏水调零,采用双波长作双份平行测定,每日测定两次,连续测定20天。分别计算其批内精密度、日内批间精密度、日间精密度和总精密度及对应的CV值。  1。5。2理论根据:1984年美国临床实验室标准委员会发表了EP5一T文件并于1992年进行了第二次修订:临床化学仪器精密度性能的用户评价。该评价方案在生化详解仪、血细胞计数仪等仪器和试剂的评价中得到了广泛的应用,使评价仪器的方法得到了统一;而该法应用于酶标仪的评价在国内外则尚未见有类似的报道,我们采用该法对酶标仪进行系统评价,结果是比较满意的。各指标的意义为:批内精密度系由20d中每天两批,每批两次之差(即“批内”)经统计学处理后所得的结果;日内批间精密度系由20d中每天两批测定结果均值之差(即“批间”)经统计学处理后所得的结果;日间精密度表示20d中每天所测均值的标准差即标准误,反映了每日均值的离散度;总精密度则是对批内、批间和日间精密度进行加权统计的结果。其中以批内精密度和总精密度的应用最为广泛,与传统的批内精密度的计算方法(即对同一标本在同一天内同时重复测定多次)相比,前者更符合实验室的实际情况,更有代表性,也更加合理;而总精密度则客观地全面地反映了实验室的总体变异情况。  1。6线性测定  1。6。1方法:精确称取甲基橙配制5个系列浓度的溶液,采用双波长平行检测8次求其均值。计算回归方程、相关系数r及标准估计误差Sy,x,并用±1。96Sy,x表示样品的95%测量范围。1。6。2评价指标解释:线性测定也是评价仪器的重要手段之一,因为它是仪器开展定量工作的基础和前提,某些厂家用标准估计误差s来衡量线性,这与实验室通常所采用的相关系数r是一致的,因此在进行线性评估时,我们同时报告r和Sy,x,目的是为了增强用户与厂家之间的可比性。  1。7双波长评价  1。7。1方法:在运用酶标仪检测样品时,由于溶液中的小气泡、杯底的水纹印及划痕、小孔杯之间透明度的区别等等,这些都是仪器测定过程中最常见的干扰因素,而标本中的干扰组份(如溶血、黄道)因洗涤而对测定结果影响则较小,因此我们将文献中的双被长评价方法改为:取同一厂、同一批号酶标板条(每个通道2条共24孔)每孔加入200ul甲基橙溶液(吸光度调至0。065~0。070A)先后于8个通道分别采用单波长(490nm)和双波长(测定波长490nm、参比波长630/650nm)进行检测,计算单波长和双波长测定结果的均值、离散度,比较各组之间是否具有统计学区别以考察双波长清除干扰因素的效果。  1。7。2说明:双波长测定过程中,由于标本中干扰组份的存在以及小孔杯本身质量等原因,常常导致测定结果的假性增高,而酶标仪提供的双波长测定功能则可以消除干扰组份或因素对测定结果的影响。对于标本中干扰组份的清除,在选择参比波长时,我们

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    觉得不错,不知能否用得上。1.方法与原理1.1滤光片波长精度检查及其峰值测定  1.1.1方法及其衡量的标准:用高精度紫外可见分光光度计(波长精度±0.3 nm)对不同波长的滤光片进行光谱扫描,检测值与标定值之差即为滤光片波长精度,其差值越接近于零且峰值越大表示滤光片的质量越好,波长精度越高。  1.1.2理论基础:酶标仪的滤光片质量好坏,直接影响仪器的灵敏度高低,而滤光片的质量又是以其波长精度及其峰值指标来衡量的,因此滤光片波长精度及峰值是衡量酶标仪的重要参数之一,这在厂家的仪器说明书中虽未曾提及,但在仪器的实际使用过程中,我们发现对滤光片波长精度和峰值进行检查是重要的也是必要的,通过检查可以发现滤光片的波长标定值与实测值的符合程度,可以发现滤光片的质量是否符合要求。1.2灵敏度和准确度的监测  1.2.1方法:①灵敏度:精确配制6 ug/ml重铬酸钾(干燥)溶液(0.05 mo1/L硫酸溶解),加入200 ul重铬酸钾溶液于小孔杯中,以0.05 mo1/L硫酸溶液作空白,于450 nm(参比波长650 nm)测定,其吸光度应≥ 0.01 A。②准确度:准确配制:1mmo/L对硝基苯酚(提纯品)水溶液,然后以10 mmo1/L氢氧化钠溶液25 倍稀释之,加入200 ul稀释液于小孔杯中,以10 mmo1/L NaOH溶液作空白,于405 nm(参比波长650 nm)检测,其吸光度应在0.4 A(0.395~0.408 A)左右。  1.2.2说明:仪器的灵敏度和准确度主要受两个因素影响:一是滤光片波长的精度,二是检测器的质量。通常情况下,滤光片原因导致仪器的灵敏度和准确度下降比较容易检查;而检测器质量差异则不易被发现,因此我们采用上述两种标准物质溶液对仪器检测器的质量进行定期监测,从而保证了仪器检测结果的可靠性。对于仪器准确性的测定,我们采用了文献报道的方法,经过多次在不同型号仪器间进行反复测定,结果发现该标准物溶液在450nm波长处有一较为恒定的测定值,由于酶标仪与其它分光光度计的光学原理不完全相同,故是否可以作为评价酶标仪准确性的参考方法还有待同行进一步研究考证。1.3通道差与孔间差检测  1.3.1方法及其表达方式:①通道差检测:取一只酶标板小孔杯(杯底须光滑、透明、无划痕、无污染)以酶标板架作载体,分别加入三种不同浓度的甲基橙溶液 200 ul先后置于8个通道的相应位置,蒸馏水调零,采用双波长(测定波长490nm,参比波长630或650nm,以下均相同)连续测三次,观察其不同通道之间测量结果的一致性可用极差值来表示其通道差。②孔间差的测量:选择同一厂家、同一批号酶标板条(8条共96 孔)分别加入200 ul甲基橙溶液(吸光度调至0.065~ 0.070 A)先后置于同一通道,蒸馏水调零,采用双波长检测,其误差大小用±1.96s衡量。  1.3.2理论解释:为了提高酶标仪的检测速度,根据 96孔酶标板的规格特点,目前大多数厂家的中、高档酶标仪均采用8通道的检测器(部分中、低档酶标仪目前仍采用单通道).因而它们每个通道的检测能力是不尽相同的,它是仪器内部的固有误差,与所测溶液浓度成正相关(不同检测器对不同浓度溶液的响应能力不同),所以通道差是衡量酶标仪性能良好与否的重要指标之一;其衡量指标用极差表示,这与厂家推荐的指标是一致的;极差值越接近于零,通道差越小,说明同一样品于不同通道检测结果的一致性越好。  由于不同厂家、不同批号酶标板之间的质量差异,导致孔与孔之间的检测结果也不完全一致,这与水平光路光度计的比色皿质量是否符合要求一样,因此我们认为孔间差是仪器外部的固有误差,只有准确测知孔间差,并对结果作出相应的校正,才能使检验结果更符合实际情况、更准确可靠;采用的评价指标(士1.96 s)也是有利于结果校正的。另外,在设计孔间差测量的操作方法上,我们将200 ul甲基橙溶液吸光度调至 0.065~0.070 A,是充分考虑到加样器的误差(上海求精公司,200 ul,士2%CV),其目的是使加样误差控制在仪器的分辨率(0.01 A)以下,这样也就避免了孔间差结果不因加样误差而导致假性增高。1.4零点飘移  1.4.1方法:取八只小孔杯,分别置于八个通道的相应位置,均加入200 ul蒸馏水并调零,采用双波长或单波长(490 nm)每隔30 min测定一次,观察8个通道 4h内的吸光度变化。其与零点的差值即为零点飘移。  1.4.2测量原理:酶标仪的零点飘移通常是很小的,这是由于仪器在读数之前,先要做8个通道的本底测量(Io).然后再读取样品板的各孔测定值(I),根据 Beer‘s law光吸收值=1ogl0(Io/I),每次读数经过如此的自动校正,使得读数误差大大降低,这样的测读方式无疑是非常正确的的;另外有的仪器是应用"DRL DYE"检测试条来进行绝对吸光度的校准的,因此在采用单波长测量时,会导致吸光度的假性增高,这种仪器可采取两种方法进行校正,一是选择一合适的参比滤光片进行双波长测定,二是引入修正参数,即在吸光度模式下单波长读取1个空白孔,其测试值和预测值之差值即为修正参数。所以零点飘移是评价仪器在一定时间内零点吸光度的变化趋势,与波长无关,它间接地反映了仪器内部检测系统在单位时间内处于工作状态下的稳定性及仪器的机械性能情况(连续进板、检测、退出),故它是评估仪器内部电路系统、光学系统(检测器)及机械系统良好与否的指标。1.5精密度评价  1.5.1方法及评价指标:每个通道三只小杯,分别加入200 ul高、中、低三种不同浓度的甲基橙溶液,蒸馏水调零,采用双波长作双份平行测定,每日测定两次,连续测定20天。分别计算其批内精密度、日内批间精密度、日间精密度和总精密度及相应的CV值。  1.5.2理论依据:1984年美国临床实验室标准委员会发表了EP5一T文件并于1992年进行了第二次修订:临床化学仪器精密度性能的用户评价。该评价方案在生化分析仪、血细胞计数仪等仪器和试剂的评价中得到了广泛的应用,使评价仪器的方法得到了统一;而该法应用于酶标仪的评价在国内外则尚未见有类似的报道,我们采用该法对酶标仪进行系统评价,结果是比较满意的。各指标的意义为:批内精密度系由20d中每天两批,每批两次之差(即"批内")经统计学处理后所得的结果;日内批间精密度系由20d中每天两批测定结果均值之差(即"批间")经统计学处理后所得的结果;日间精密度表示20 d中每天所测均值的标准差即标准误,反映了每日均值的离散度;总精密度则是对批内、批间和日间精密度进行加权统计的结果。其中以批内精密度和总精密度的应用最为广泛,与传统的批内精密度的计算方法(即对同一标本在同一天内同时重复测定多次)相比,前者更符合实验室的实际情况,更有代表性,也更加合理;而总精密度则客观地全面地反映了实验室的总体变异情况。1.6线性测定  1.6.1方法:精确称取甲基橙配制5个系列浓度的溶液,采用双波长平行检测8次求其均值。计算回归方程、相关系数r及标准估计误差Sy,x,并用±1.96 Sy,x表示样品的95%测量范围。1.6.2评价指标解释:线性测定也是评价仪器的重要手段之一,因为它是仪器开展定量工作的基础和前提,某些厂家用标准估计误差s来衡量线性,这与实验室通常所采用的相关系数r是一致的,因此在进行线性评估时,我们同时报告r和Sy,x,目的是为了增强用户与厂家之间的可比性。1.7双波长评价  1.7.1方法:在运用酶标仪检测样品时,由于溶液中的小气泡、杯底的水纹印及划痕、小孔杯之间透明度的差异等等,这些都是仪器测定过程中最常见的干扰因素,而标本中的干扰组份(如溶血、黄道)因洗涤而对测定结果影响则较小,因此我们将文献中的双被长评价方法改为:取同一厂、同一批号酶标板条(每个通道 2条共24孔)每孔加入200 ul甲基橙溶液(吸光度调至0.065~0.070 A)先后于8个通道分别采用单波长(490 nm)和双波长(测定波长490 nm、参比波长630/ 650 nm)进行检测,计算单波长和双波长测定结果的均值、离散度,比较各组之间是否具有统计学差异以考察双波长清除干扰因素的效果。  1.7.2说明:双波长测定过程中,由于标本中干扰组份的存在以及小孔杯本身质量等原因,常常导致测定结果的假性增高,而酶标仪提供的双波长测定功能则可以消除干扰组份或因素对测定结果的影响.对于标本中干扰组份的清除,在选择参比波长时,我们应对于扰组份的光谱进行研究,以正确选择参比波长;而对于小孔杯本身质量问题等干扰因素的消除,只要选择远离测定波长的参比波长即可以了、这对保证测定结果的准确性是非常重要的。

  • 【原创】如何正确选购酶标仪;怎样自检和校准酶标仪

    酶标仪的选择、自检和校准 一、酶标仪的选择 面对类型如此众多的酶标仪,实验室在选择时往往有难以适从的感觉。一般来说,用于酶免疫测定比色的酶标仪可分为普通酶标仪,多功能全自动酶标仪和全自动酶免疫分析系统等,普通酶标仪的功能基本上相当于一个微孑L板比色计,而多功能全自动酶标仪除了有微孔板比色功能外,还有酶标动力学,紫外乃至凝集等多种检测功能;全自动酶免疫分析系统则有试剂“开放”和“限定”之分,所谓试剂“开放”是指不同品牌的ELISA试剂均可用于该仪器,而试剂“限定”则必须使用仪器专用的酶免测定试剂。实验室在选择酶标仪时,一般应遵循这样几条原则: 1.根据工作需要去选择。切忌刻意去求功能多,因为一则如果仪器功能过多,易出故障,二则有些功能如酶标动力学或凝集等,可能根本就用不上;如果拟购置的酶标仪主要是用于定性测定,则不必要求完美的定量所需的软件系统。至于全自动酶免疫分析系统则对工作量比较大的血站或大型医院较为适用,对于日常工作量不太大的实验室,就无必要。 2.根据酶标仪的性能去选择。反应酶标仪性能的指标主要有测定波长范围,滤光片配置,检测速度,吸光度范围,线性范围,分辨率,准确度,精密度等。 3.根据自己实验室的财力去选择。酶标仪品种类型多,由于性能不一,价格自然也就相差较大,实验室可根据自己的财力去选择性能/价格比较为合适的酶标仪。 4.根据售后服务去选择。实验室仪器买了以后,就跟我们家里使用的家用电器一样,在使用过程中及使用一段时间之后,很可能就会有保修或维修方面的问题,因此一定要选择售后服务好的公司的酶标仪。 5.根据实验室人员的外语水平去选择。进口酶标仪现有不少已使用中文人机对话,对于英语上有困难的实验室,应尽可能选用此类酶标仪。 确定了选择原则以后,就是怎样去选择了。选择的步骤首先是要获取有关酶标仪的信息资料,一般有这样几条途径: ①向已购不同酶标仪的多家实验室同行咨询访问,获取最直接的使用效果的信息; ②酶标仪销售商的信息广告及介绍; ③权威机构的仪器评估报告。 获取了尽可能多的酶标仪信息资料后,就是对不同类型的酶标仪的性能指标进行比较,选择较为适合本实验室的一种或二,三种再向销售商作进一步的详细咨询了解,以决定选择哪一种进行自检。二、酶标仪的自检和校准从上述所获的酶标仪性能的有关信息资料,基本上可以说是间接的,有了目标以后,如果还想获得对某一酶标仪的感性认识,可以对其进行自检,主要有下述几个方面。 (一)外观 酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。 (二)酶标仪的稳定性(漂移) 选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测定值之差不应超过±0.005A。 (三)吸光度测定的准确度 选用405,492和620 nm波长,以空气为参比,分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用专用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测定3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。 (四)吸光度测定的重复性 波长选择同(3),在酶标板第一排加注空白溶液,第二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式计算重复性: (五)酶标仪的线性选用540nm波长,将标称值o.5,1.0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中,以空气为参比,各重复测定3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中,重复测定3次。线性误差: 式中A1为第一片中性滤光片吸光度均值,A:为第二片中性滤光片吸光度均值,A1,2为两片中性滤光片叠加后的吸光度均值。 (六)测定速度的检定 . 选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测定,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。 酶标仪除了在选购时,应尽可能自检外,在使用中也应定期检定,以保证酶标仪测定的有效性。 附:200ttg/ml重铬酸钾溶液的配制 将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器内冷却30min,在分析天平上准确称取o.2829g,置于100ml烧杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗烧杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀释至刻度线,摇匀。

  • 【求助】请问检酶标仪的同行:酶标仪合格率普遍低吗?

    昨天我们理化室去一疾控中心检常规理化仪器时,我所医学计量室同去检酶标仪。我所酶标仪建标才近两年,据检酶标仪的同事说:我们检定的结果,合格率很低,太约为10%。请问同行们你们的合格率也很低吗?我们这样低正常吗?是否会是我们的标准有问题,或是我们的方法有问题?据我所知,我的同事主要只做吸光度示值误差。按理酶标仪与分光光度计的原理是一样的,而我们分光光度计透射比检定合格率高达98%以上哦!恳请同行指导:我所酶标仪吸光度检定合格率如此低,有可能问题目出在那里?谢谢!

  • 【分享】酶标仪选购

    随着检验医学的发展,酶标仪在临床检验中得到了越来越广泛的应用。那么,什么样的酶标仪最受临床检验人员欢迎,又应当怎样选择酶标仪呢? 首先,酶标仪体积不宜太大。检验室空间有限,仪器体积太大会占据很多空间,给其他工作带来不便。这也是小巧玲珑、外形美观的机型受人青睐的原因。此外,在检验过程中,经常会有样品液体外溅,所以酶标仪外壳要易于消毒、清洁。 第二,可容纳更多的信息。随着医保制度改期的进行和《医疗事故处理条例》的颁布实施,在处理日趋增多的医疗纠纷过程中,医院事故技术鉴定材料的重要性不言而喻。而检验结果准确与束往往会引起争仪,因此检验中的原始记录即成为判定的依据。在临床检验中,酶标仪比色后的打印记录是最原始的记录之一,如果这份打印记录能显示足够的信息量,将为法律评判提供极大的便利。 第三,仪器操作要简便,国产的酶标仪,菜单应该用中文来显示。尽管目前检验人员的素质有限大幅度提高,懂英语的人也为数不少,但看中文毕竟比看英文方便、明确。有些国内厂商在仿造进口酶标仪时,连显示器上的文字一同“进口”,这种做法值得商榷。 第四,厂商能配置易损部件。酶标仪在临床上使用频率较高,一些部件的损坏率也较高,如放酶标仪的卡夹、滑槽等。厂商能及时地配置易置易损部件,对保证酶标仪正常运行和延长期寿命是非常重要的。第五,对比色和打印的要求。有些医院标本量比较大,酶反应终止后,如果不能及时比色,将会影响检测结果。而一台好的酷标仪能够快捷地进行比色和打印,不仅为检测人员节省了大量的时间,而且确保了检验结婚的准确性。酶标仪的自检和校准从上述所获的酶标仪性能的有关信息资料,基本上可以说是间接的,有了目标以后,如果还想获得对某一酶标仪的感性认识,可以对其进行自检,主要有下述几个方面。(一)外观酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。(二)酶标仪的稳定性(漂移) 选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测定值之差不应超过±0.005A。(三)吸光度测定的准确度选用405,492和620 nm波长,以空气为参比,分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用专用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测定3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。(四)吸光度测定的重复性波长选择同(3),在酶标板第一排加注空白溶液,第二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。 (五)酶标仪的线性选用540nm波长,将标称值o.5,1.0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中,以空气为参比,各重复测定3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中,重复测定3次。 (五)测定速度的检定 .选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测定,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。酶标仪除了在选购时,应尽可能自检外,在使用中也应定期检定,以保证酶标仪测定的有效性。

  • 【酶标仪资料】

    【酶标仪资料】我看在论坛上问酶标仪问题的人挺多的,就下载了这几个资料,不全,欢迎大家跟帖补充啊^_^

  • 关于酶标仪!请教!

    本人新手!弱问酶标仪应用的几个问题:酶标仪在测定土壤酶方面有没有什么应用啊?具体都能测定那些土壤酶的指标啊!由于对酶标仪不了解还请高手和各位老师帮忙解答!不胜感激!!

  • 酶标仪使用问题

    大神们,我用酶标仪在450nm处,测吸光度,每次孔板放置位置不一样,测出来的数据都变化很大呢,是我的酶标仪有问题嘛还是其他原因

  • 酶标仪的常见故障

    酶标仪在临床实验方面应用广泛,可以说它是临床及医学实验不可或缺的基础设备。任何仪器在使用时往往都会出现一些小故障,酶标仪仪器也一样,酶标仪在使用的过程中出现故障后如何解决呢?酶标仪的常见故障  1、酶标仪开机后无反应  故障分析:出现这种情况请检查酶标仪电源线是否接好,保险丝是否烧断。  2、酶标仪开机电源指示灯亮,液晶显示屏能显示字符,但显示时间较短  故障分析:导致此种现象有两种可能,一是液晶显示器驱动、控制电路出现故障 二是供给液晶显示器的电源电压不正常。  故障排除:打开酶标仪上盖,通电观察,散热片是否发热,若发热,则用数字万用表直流电压档测三端集成稳压块输出端,观察有无电压输出 若没有,说明电源有故障。由于三端集成稳压块内含过流限制和过热保护电路,为了判断是三端集成稳压块的故障还是后级负载短路引起的故障,可将酶标仪母板上三块电路板逐一拔出,通电再测量三端集成稳压块输出端电压,若拔出液晶显示驱动—控制这块电路块时,三端集成稳压块的输出端电压恢复正常,则可初步判断是电路板上的负载有短路现象。检查该电路板直流供电系统的各个元器件,可能为以树脂壳包装的铝固体电解电容器已击穿造成短路等原因。换上相同规格的电解电容器,即可排除故障。酶标仪的常见故障.jpg  3、酶标仪测量的结果重现性不好,即使用空板测量误差也在允许的范围之外  故障分析:检查试剂、判定公式以及光路是否被污染。排除这些问题后,检查微板的卡簧是否卡到位,没有卡到位会造成微板在测量时在机内晃动影响测量结果不准。  4、酶标仪测量结果OD值偏低  故障分析:可能是酶标仪灯的能量值偏低,在排除完灯的能量值偏低后,可能是滤光片上有灰尘,用蒸馏水和擦镜纸擦洗干净晾干后故障排除。  5、酶标仪调不出所编程序  故障分析:程序必须在相应程序模块下调出,如在临界值模块下编辑储存的程序必须要在临界值模块下调出。  6、肉眼结果与酶标仪测定结果差异较大  故障分析:出现这种情况是由于滤光片参数错误,测量滤光片没有正确的进入光路,测量光的波长与正确测量光的波长相差大致使结果失真,可以在“参数”中按滤光片轮中实际的情况设置滤光片。还可能由于电源或其它原因,有时会造成酶标仪存储的滤光片参数丢失或错误,此时应进行检查并重置参数。

  • 酶标仪的工作原理及应用

    实际上就是一台变相的专用光电比色计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单.   微孔板是一种经事先包理专用于放置待测样本的透明塑料板,板上有多排大小均匀一致的小孔,孔内都包埋着相应的抗原或抗体,微孔板上每个小孔可盛放零点几毫升的溶液.其常见结构规格有40孔板,55孔板,96孔板等多种,不同的仪器选用不同规格的孔板,对其可进行一孔一孔地检测或一排一排地检测.酶标仪所用的单色光既可通过相干滤光片来获得,也可用分光光度计相同的单色器来得到.在使用滤光片作滤波装置时与普通比色计一样,滤光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相同的.下图便是目前常用的酶标仪光路系统图.光源灯发出的光经聚光镜,光栏后到达反射镜,经反射镜作90°反射后垂直通过比色溶液,然后再经滤光片送到光电管.从酶标仪工作框图和光路图上可看出,它和普通的光电比色计有以下几点差异:  (l)盛装待测比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,故用它作为固相载体.  (2)由于盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液.  (3)酶标仪通常不仅用A,有时也使用光密度OD来表示吸光度.酶标仪可分为单通道和多通道2种类型,单通道又有自动和手动2种之分.自动型的仪器有X,Y方向的机械驱动机构,可将微孔板L的小孔一个个依次送入光束下面测试,手动型则靠手工移动微孔板来进行测量.在单通道酶标仪的基础上又发展了多通道酶标仅,此类酶标仅一般都是自动化型的.它没有多个光束和多个光电检测器,如 12个通道的仪器设有 12条光束或 12个光源,12个检测器和12个放大器,在X方向的机械的作用下,样品12个为一排被检测.多通道酶标仪的检测速度快,但其结构较复杂价格也较高.

  • 酶标仪的故障排除

    今天我们来谈谈酶标仪的故障排除吧, 酶标仪是实验室中常用的一种仪器,用于测定酶的活性和浓度。然而,酶标仪在使用过程中可能会出现一些故障,比如读数不准确,试剂不吸取等问题。这些故障会影响实验结果,所以要及时发现并解决。 首先,如果酶标仪的读数不准确,可能是光源或光学元件出了问题。这时候,可以试着清洁光源和光学元件,看看能否解决问题。如果清洁不起作用,可能需要更换光源或者检查光学元件的连接情况。 其次,如果酶标仪试剂不吸取,可能是进样针或者泵出了问题。可以尝试清洁进样针或者泵,看看是否能够解决问题。如果清洁不起作用,可能需要更换进样针或者泵。 另外,如果酶标仪出现故障,还可以尝试重新校准仪器。有时候仪器的校准出了问题,会导致错误的读数。重新校准可能会解决问题。 除了以上的故障和维修方法之外,我们还需要注意一些日常的使用维护,比如定期清洁仪器,避免试剂残留等。这些都可以减少酶标仪出现故障的可能性。 酶标仪的故障和维修并不复杂,通常是一些常见的问题。在遇到故障时,首先要耐心排除故障的可能原因,然后尝试简单的清洁和更换部件来解决问题。如果以上方法都无效,最好还是及时联系厂家或者专业维修人员来处理,以免延误实验进度。

  • 全自动酶标仪应用范围

    全自动酶标仪应用范围

    [size=16px]  全自动酶标仪(Automatic Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Analyzer,简称ELISA分析仪)是一种用于进行酶标法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)的实验设备,能够在自动化的环境下执行ELISA实验。ELISA是一种广泛用于检测蛋白质、肽、抗体、激素、病原体等生物分子的方法,因此全自动酶标仪在许多不同的应用领域都有用途。  以下是全自动酶标仪的应用范围示例:  医学诊断: 全自动酶标仪常用于临床诊断,检测患者体液中的生物标志物,如抗体、抗原、蛋白质等,用于早期疾病诊断、监测疾病进展以及评估治疗效果。  生物医药研究: 在药物研发过程中,全自动酶标仪可以用来筛选药物候选化合物,评估药物对特定分子的影响,以及研究药物的药代动力学。  免疫学研究: 全自动酶标仪在免疫学研究中广泛应用,用于检测抗体水平、细胞因子、细胞表面分子等。  食品安全检测: 全自动酶标仪可以用于检测食品中的有害微生物、残留农药、毒素等,以保障食品安全。  环境监测: 在环境科学领域,全自动酶标仪可用于监测环境样本中的污染物、重金属、微生物等。  生物工程和生物技术: 在生物工程领域,全自动酶标仪可用于检测重组蛋白的表达水平,优化发酵过程等。  兽医学: 全自动酶标仪也在兽医领域中用于动物健康监测、疾病诊断等。  总之,云唐全自动酶标仪的应用范围非常广泛,涵盖了医学、生物科学、食品安全、环境监测等多个领域。它通过自动化的操作,提高了实验的效率和准确性,有助于科研人员和医疗专业人员更好地进行实验和诊断工作。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311612470083_875_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 分光光度计和酶标仪

    分光光度计和酶标仪区别分光光度计:利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品,比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或(或原子吸收分光光度计)。酶标仪:实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。酶标仪按照功能的不同划分,可以分为(1)光吸收酶标仪(可见酶标仪,紫外/可见酶标仪)(2)荧光酶标仪(3)化学发光酶标仪。分光光度计和酶标板存在一些不同之处,具体差别体现在以下几个方面:(1)盛装待测溶液的容器:分光光度计用的是比色皿,酶标仪使用的是塑料微孔板(酶标板)。比色皿只能起到盛装溶液的作用,每个比色皿一次只能盛装一种溶液。酶标板常用透明的聚乙烯材料制成,对抗原抗体有较强的吸附作用,因此用它作为固相载体,酶标板通常为48孔或96孔,每个微孔可以盛装不同的溶液。(2)光路的方向:分光光度计是水平光路,而酶标仪则是垂直光路。由于酶标板盛样本的塑料微孔板是多排多孔的,光线只能垂直穿过,因此酶标仪的光束都是垂直通过待测溶液和微孔板的,光束既可是从上到下,也可以是从下到上穿过比色液。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。(3)光路的长度:由于光密度(OD值)与吸光系数, 待测组分的浓度以及光路长度成正比关系。分光光度计采用的比色杯的宽度通常是1cm,所以光路长度固定为1cm。因此不同仪器,不同批次测量的数据具有同样的可比性。而酶标仪采用的是垂直光路, 所以光路的长度应该是液体液面的高度。所以测得的值受到样品的体积的影响。[font=宋体

  • 酶标试剂及酶标仪使用注意事项与问题解决

    酶标仪使用注意事项   1、 工作环境  酶标仪是一种精密的光学仪器,因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性,还能够延长其使用寿命。A. 仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。B. 仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。C. 为延缓光学部件的老化,应避免阳光直射。D. 操作环境温度应在15°C~40°C之间,环境湿度在15%~85%之间。E. 操作时电压应保持稳定。F. 操作环境空气清洁,避免水汽、烟尘。G. 保持干燥、干净、水平的工作台面,以及足够的操作空间。  2、 操作注意事项  许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标仪后操作必须规范。A. 使用移液器加液,移液枪头不能混用。B. 洗板要干净,避免交叉污染。C. 严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。D. 请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成注意做好清洁工作。E. 不要在测量过程中关闭电源。F. 对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改参数,以达到最佳效果。G. 使用后盖好防尘罩。H. 出现技术故障时应及时与厂家联系,切勿擅自拆卸酶标仪。酶标(ELISA,EIA)诊断试剂盒操作中出现的问题:现象、可能原因和解决办法 注意:1、 不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同,务必按照所用试剂盒严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性.2、 若不同批号试剂的不同组分(A液或酶工作液),或不同试剂的不同组分进行交叉使用,有可能出现显色浅或本底高,花板等情形。3、 加样时样品量误差,对于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值附近的标本影响极大,建议校对加样器。4、 反应时间的误差,做大量标本时,第一孔和最后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加样器,不排除不同滴头滴量的误差。另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀,是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况。高标准要求时应使用加样器。6、 阈值附近实际上是个灰区(gray scale),不能截然分为阴性、阳性,国外厂家均要求对这部分可疑标本进行奇数次复检,以次数多者为准,如一次阳两次阴最后判为阴,但实际上是否为阴不好说,只有判为可疑,临床上可以让患者过一段时间后再测。7、 肉眼观察稍显色,酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的,肉眼目测结果不可靠,应以酶标仪判读为准。8、 由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。9、 临界值附近标本波动为正常现象,任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。

  • 【原创】酶标仪使用交流有奖调查

    [color=#DC143C][size=4][B]酶标仪使用交流有奖调查[/B][/size][B]1、活动内容[/B]:为了迎接五一劳动节,特举办“酶标仪使用交流”系列有奖调查,征集各地实验室酶标仪的使用情况,各个类别可以选择填写,填写内容尽量完整,主要有:[B]A、酶标仪部分[/B]①、您所用酶标仪的品牌与型号 ;②、使用的酶标仪操作软件与版本 ;③、您使用酶标仪主要检测什么? ④、酶标仪使用中遇到的主要问题及感受;⑤、您对酶标仪论坛今后的建议。[B]B、试剂盒部分[/B]①、您都曾经用过哪些品牌的试剂盒?②、您最喜欢什么品牌的试剂盒?说明理由(试剂盒的使用感受)③、您用什么方法分析计算酶标仪上读出的数据? [B]2、活动规则[/B]:①、要求发帖内容与“酶标仪使用交流”活动密切相关;②、严禁广告,灌水者,发现立即取消活动资格 ;③、在活动期间,被删除的帖子不计活动积分。④、发帖内容明显虚假,骗取积分者,发帖无效,不计分。 [B]3、活动时间[/B]:4.30—5.30 [B]4、奖励规则[/B]:①、为促进酶标板块交流,对本次活动中积极回帖,提供详细回答和较强可行性建议者,设劳动模范奖,取前六名,在每期活动结束时兑现。②、活动期间视回答交流问题情况可以获得5—10分奖励,并有机会在每期活动结束时获得劳动模范奖。③、在每期活动结束时,颁发劳动模范奖,前1、2、3名各奖励30分,前4、5、6名奖励20分。[/color]

  • 酶标仪的原理及操作规程

    酶标仪即酶联免疫检测仪,是酶联免疫吸附试验的专用仪器.可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来分析抗原或抗体的含量.ELISA测定一般要求测试液的最终体积在250u l以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求.酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同. 图示是一种单通道自动进样的酶标仪工作原理图.光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔极中的待测标本.该单色光一部分被标本吸收,另一部分则透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大,对数放大,模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果. 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板,从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X,Y方向的机械驱动机构和控制电路,从而使仪器更小巧,结构也更简单.酶标仪操作规程1.开启仪器电源开关,预热5分钟,同时启动电脑。   2.启动Magellan.exe程序,加入程序主界面,仪器微孔板架同时自动打开。   3.将待测微孔板在板架上放好。   4.根据不同的测量要求,设置好测定波长和测量模式后,进行检测。   5.保存检测结果或进行打印。   6.关闭计算机和主机电源,登记使用记录。

  • 【资料】酶标仪的选择、自检和校准

    一、酶标仪的选择面对类型如此众多的酶标仪,实验室在选择时往往有难以适从的感觉。一般来说,用于酶免疫测定比色的酶标仪可分为普通酶标仪,多功能全自动酶标仪和全自动酶免疫分析系统等,普通酶标仪的功能基本上相当于一个微孑L板比色计,而多功能全自动酶标仪除了有微孔板比色功能外,还有酶标动力学,紫外乃至凝集等多种检测功能;全自动酶免疫分析系统则有试剂“开放”和“限定”之分,所谓试剂“开放”是指不同品牌的ELISA试剂均可用于该仪器,而试剂“限定”则必须使用仪器专用的酶免测定试剂。实验室在选择酶标仪时,一般应遵循这样几条原则:1.根据工作需要去选择。切忌刻意去求功能多,因为一则如果仪器功能过多,易出故障,二则有些功能如酶标动力学或凝集等,可能根本就用不上;如果拟购置的酶标仪主要是用于定性测定,则不必要求完美的定量所需的软件系统。至于全自动酶免疫分析系统则对工作量比较大的血站或大型医院较为适用,对于日常工作量不太大的实验室,就无必要。2.根据酶标仪的性能去选择。反应酶标仪性能的指标主要有测定波长范围,滤光片配置,检测速度,吸光度范围,线性范围,分辨率,准确度,精密度等。3.根据自己实验室的财力去选择。酶标仪品种类型多,由于性能不一,价格自然也就相差较大,实验室可根据自己的财力去选择性能/价格比较为合适的酶标仪。4.根据售后服务去选择。实验室仪器买了以后,就跟我们家里使用的家用电器一样,在使用过程中及使用一段时间之后,很可能就会有保修或维修方面的问题,因此一定要选择售后服务好的公司的酶标仪。5.根据实验室人员的外语水平去选择。进口酶标仪现有不少已使用中文人机对话,对于英语上有困难的实验室,应尽可能选用此类酶标仪。确定了选择原则以后,就是怎样去选择了。选择的步骤首先是要获取有关酶标仪的信息资料,一般有这样几条途径:①向已购不同酶标仪的多家实验室同行咨询访问,获取最直接的使用效果的信息;②酶标仪销售商的信息广告及介绍;③权威机构的仪器评估报告。获取了尽可能多的酶标仪信息资料后,就是对不同类型的酶标仪的性能指标进行比较,选择较为适合本实验室的一种或二,三种再向销售商作进一步的详细咨询了解,以决定选择哪一种进行自检。二、酶标仪的自检和校准从上述所获的酶标仪性能的有关信息资料,基本上可以说是间接的,有了目标以后,如果还想获得对某一酶标仪的感性认识,可以对其进行自检,主要有下述几个方面。(一)外观酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。(二)酶标仪的稳定性(漂移) 选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测定值之差不应超过±0.005A。(三)吸光度测定的准确度选用405,492和620 nm波长,以空气为参比,分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用专用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测定3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。(四)吸光度测定的重复性波长选择同(3),在酶标板第一排加注空白溶液,第二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式计算重复性:(五)酶标仪的线性选用540nm波长,将标称值o.5,1.0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中,以空气为参比,各重复测定3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中,重复测定3次。线性误差:式中A1为第一片中性滤光片吸光度均值,A:为第二片中性滤光片吸光度均值,A1,2为两片中性滤光片叠加后的吸光度均值。(六)测定速度的检定 .选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测定,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。酶标仪除了在选购时,应尽可能自检外,在使用中也应定期检定,以保证酶标仪测定的有效性。附:200ttg/ml重铬酸钾溶液的配制将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器内冷却30min,在分析天平上准确称取o.2829g,置于100ml烧杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗烧杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀释至刻度线,摇匀。

  • 酶标仪调零问题

    谁用过伯乐的Model 680型酶标仪。和电脑软件一起链接的,怎么电脑软件上没有调零的键呢,难道酶标仪不用较零,请各位大侠指点,谢谢!

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