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原料奶中芽孢、耐热芽孢、嗜冷菌及抗生素残留的测定,这些企业采购的时候对每批次都检测吗
耐热芽孢检验1 基础1.1 细菌特殊形态:1.1.1芽孢:细菌生长到后期的一种形态(营养不良造成)细胞浓缩形成。1.1.2荚膜:某些细菌细胞壁外的一层较松厚,而且较固定的粘液性物质称之。如果粘液性物质没有明显的边缘,则叫粘液层。如果细菌荚膜连在一起,其中包含有许多细菌叫菌胶团 1.1.3鞭毛:有动力性,用穿刺法(半固体)测1.1.4菌毛:比鞭毛更细,较短,直硬,数量也较多的细丝称之 2 概念2.1 芽孢:一些细菌在其生长后期,在胞内形成一个抗逆性,(热、干燥、压力等)特别强的圆形或椭圆状的原壁厚密的内生孢子称为芽孢。2.2 培养基:锰盐营养琼脂:每1000mL普通营养琼脂中加硫酸锰(3.08gMnSO4+100mLH2O)1mL(注:现化验室用直接配制好的锰盐营养琼脂混合物,30g加入1000 mL煮沸的蒸馏水中,混匀,溶解。)3 芽孢总数测定3.1样品准备3.1.1在无菌操作条件下,将10mL室温状态下的待检样品加入一个灭菌试管中,盖好棉塞。3.1.2在同直径的试管中加入10mL同样室温状态下的水,并插入温度计。3.1.3将上述两支试管同时放入水浴中保温,待温度计温度升至80℃时开始计时。3.1.4计时达10分钟后,迅速将样品管取出,置于冷水中迅速降温至室温。3.1.5按无菌操作条件对降温后的样品进行稀释。 中间产品检验选取100的样品稀释液。问题产品检验选取10 -1至10-2两个稀释度的样品稀释液。3.2 培养基准备3.2.1检查预先经过灭菌处理的锰盐营养琼脂培养基是否处于正常、可用状态。3.2.2将高压灭菌后的培养基,冷至45℃左右待用。3.3 接种培养3.3.1在无菌操作条件下,在一个灭菌平皿内倾入15mL锰盐营养琼脂培养基,并暴露至接种过程结束,标记后以作为环境对照样品。3.3.2按样品编号在灭菌平皿盖作相应标记。3.3.3在无菌操作条件下,用1mL的灭菌吸管移取1mL选定的样品稀释液或样品原样至灭菌平皿内。3.3.4同上对同一样品重复操作。即每个选定的样品稀释度做两个平皿。3.3.5按以上步骤,以1毫升无菌生理盐水作为空白操作对照。3.3.6在无菌操作条件下,将约15mL的锰盐营养琼脂培养基倾入样品平皿中,将平皿置于操作台面上轻轻转动,使样品和培养基混合均匀。3.3.7待琼脂凝固后,将平皿翻转,即保持有标记和培养基的一面向上。3.3.8将所有平皿(包括空白和环境对照)置于36±1℃的恒温培养箱内,保温培养60---62小时。3.4菌落计数3.4.1计数原则同菌落总数。计数时认准芽孢菌落,必要时要镜检。3.4.2检验结果=(平行样品菌落数之和/2)×稀释倍数。3.4.3计数结果在100以内,按实际计数报告;100至10000的,按两位有效数字报告,如果样品只做原液时计数结果在100以外,按实际计数报告。4 耐热芽孢总数测定4.1 样品准备4.1.1在无菌操作条件下,将10mL室温状态下的待检样品加入一个灭菌试管中,盖好棉塞。4.1.2在同直径的试管中加入10mL同样室温状态下的水,并插入温度计。4.1.3将上述两支试管同时放入水浴中保温,待温度计温度升至100℃开始计时。4.1.4计时达10分钟后,迅速将样品管取出,置于冷水中迅速降温至室温。4.1.5按无菌操作条件对降温后的样品进行稀释。 4.1.5.1 中间产品检验选取100的样品稀释液。4.1.5.2问题产品检验选取10 -1至10-2两个稀释度的样品稀释液。5 培养基准备5.1 检查预先经过灭菌处理的锰盐营养琼脂培养基是否处于正常、可用状态。5.2用高压灭菌后的培养基,冷至45℃左右待用。6 接种培养6.1在无菌操作条件下,在一个灭菌平皿内倾入约15mL锰盐营养琼脂培养基,并暴露至接种过程结束,标记后以作为环境对照样品。6.2按样品编号在灭菌平皿底部作相应标记。6.3 在无菌操作条件下,用1mL的灭菌吸管移取1mL选定的样品稀释液或样品原样至灭菌平皿内。6.4 同上对同一样品重复操作。即每个选定的样品稀释度做两个平皿。6.5按以上步骤,以1毫升无菌生理盐水作为空白操作对照。6.6在无菌操作条件下,将约15mL的锰盐营养琼脂培养基倾入样品平皿中,将平皿置于操作台面上轻轻转动,使样品和培养基混合均匀。6.7 待琼脂凝固后,将平皿翻转,即保持有标记和培养基的一面向上。6.8将所有平皿(包括空白和环境对照)置于55±1℃(注:培养温度针对特殊情况可以特殊对待,但各处统一)的恒温培养箱内,保温培养60---62小时。7 菌落计数7.1计数原则同菌落总数。计数时认准耐热芽孢菌落,必要时要镜检。7.2 检验结果=(平行样品菌落数之和/2)×稀释倍数。计数结果在100以内,按实际计数报告;100至10000的,按两位有效数字报告样品只做原液时计数结果在100以外,按实际计数报告。
牛奶中的体细胞有两个来源。一是来自乳腺分泌组织中的上皮细胞(也称腺细胞);二是来自与炎症进行搏斗时而死亡的白血细胞。腺细胞是正常的体细胞,是乳腺进行新陈代谢过程的产物,在奶中的含量相对恒定。而白细胞是一种防卫细胞,可以杀灭感染乳腺的病菌,还可以修复损伤的组织。因此白细胞在牛奶中的数量随奶牛的生理状态和健康水平有很大变化。 一、牛奶中体细胞上升的原因 1 、 由于乳腺被细菌感染出现乳房炎而使体细胞数量上升 。 牛奶中正常的体细胞为 20 万 /ml (标准)。但初产母牛和管理良好的牛群可能低于 10 万 /ml 。如果体细胞数超过 25 ~ 30 万个 /ml ,就接近不正常,说明有细菌传染,引起乳房炎。引起乳房炎的细菌有两大类:传染性的细菌和环境中的细菌,详见另文所述。 2 、 牛的年龄及泌乳状态 体细胞数随着牛的胎次(年龄)及泌乳阶段而上升。这是母牛自然免疫系统在分娩之前所表现出的一种免疫反应,其目的是为了提高乳腺的防御机能。到了分娩以后,如果乳腺未遭病菌感染,则牛奶中的体细胞数量会很快下降。 3 、应激和季节 高温和高湿条件下所引起的热应激,一般多出现在 7 、 8 月份,也可能引起牛奶中的体细胞数的上升。母牛表现发情症状时也有伴随体细胞上升的趋势,但报道不太一致。 4 、乳房创伤 在没有传染源的情况下,乳房内部创伤(如挤奶机负压过大,空吸时间过长或乳房被压伤等)也可以导致牛奶中体细胞数量增加。但当创伤愈合后,体细胞又可恢复正常。 5 、其它原因 包括挤奶设备的完好及工作状况,如脉动频率、真空负压大小及稳定性、集乳器的通透性,橡皮奶衬的完好及柔软性等都可以影响牛奶体细胞的数量。 此外,挤奶过程的卫生状况,乳头的护理及乳头的封闭影响着细菌进入乳头的机会,同时也影响着牛奶中体细胞的数量。 二、体细胞数制约着牛奶的产量及质量 1 、对牛奶产量的影响 当牛奶中的体细胞数量超过 30 万 /ml 时,日产奶量开始下降。上升幅度越大,产量下降幅度也越大(详细材料参考另文)。 2 、对牛奶质量的影响:当体细胞增加时,可以伴随乳白蛋白质的上升和酪蛋白质含量的下降,可以使奶酪的产量随之下降;在这种条件下奶牛的货架期和风味也随之受到影响。因此奶业发达国家一般均根据体细胞的数量标注奶价。对体细胞少的生产场家给予特殊奖励。