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凝血分析仪

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  • 【原创大赛】人凝血因子Ⅷ酸沉淀过程分析和近红外定量模型的建立

    摘要: 目的 对人凝血因子Ⅷ酸沉淀过程效价和总蛋白建立近红外模型,实现效价和总蛋白的快速检测,并以此确定酸沉终点。 方法 实验室模拟人凝血因子Ⅷ酸沉淀过程,对不同酸沉程度下的效价和总蛋白进行测定,同时采集近红外光谱,建立模型。结果 酸沉淀过程中FⅧ比活性达到最高时的pH值并不固定,在6.1-6.5范围内波动,所以将固定的pH值作为酸沉淀的终点并不能达到最佳的效果。结论 建立的人凝血因子Ⅷ酸沉过程中效价和总蛋白模型,固定加酸法不能准确判断酸沉最佳终点,所建立的近红外分析模型为在线实时监控溶解液中的FⅧ比活性提供参考方案。 关键词:近红外光谱分析技术 人凝血因子Ⅷ 酸沉 效价 总蛋白人凝血因子Ⅷ(coagulationfactor Ⅷ,FⅧ)是治疗甲型血友病和获得性凝血因子Ⅷ缺乏而致的出血症状等的不可或缺的药品,而目前国内生产工艺相对落后,在国内29家血液制品企业中仅有4家有能力生产FⅧ,采用离子交换层析法从人血浆冷沉淀中分离纯化FⅧ的生产工艺,收率低(平均9%)、比活低。因此,针对生产现状,将现代过程分析与控制技术引入到FⅧ生产过程中的关键环节当中,增加对生产工艺过程的了解,有效控制工艺过程,提升FⅧ的收率及比活性。生产人凝血因子Ⅷ以人血浆的冷沉淀为原料,一般用含肝素钠的溶解液溶解,溶解液pH为7.2±0.1。溶解完全后依据不同蛋白质的等电点不同,加0.05M的醋酸溶液进行酸沉淀,使以纤维蛋白原为主的大量杂蛋白沉淀出来,而FⅧ大部分保留在上清液中,从而大大提升溶液的FⅧ比活性。在生产中,酸沉淀终点的控制依据经验以溶液的pH值为参考,当溶液的pH值为6.3±0.1时加酸过程终止,此时上清液中的蛋白含量较低而FⅧ的活性损失较少,因此能够得到FⅧ比活性高的产品。但是单纯以pH值为控制参数的终点控制方法,不一定能够保证不同批次的酸沉淀过程都达到最理想的状态,本试验将对FⅧ的酸沉淀过程进行分析,以检验是否不同批次溶解液的FⅧ比活性在pH=6.3时都达到最高值,并试图找到与比活性直接相关的物料参数——蛋白质含量作为酸沉淀终点的控制标准,使溶解液中FⅧ的比活提升和活性损失达到更均衡的状态。同时,利用近红外光谱分析技术,建立溶解液蛋白含量的PLS定量分析模型,进行蛋白含量的实时监控,从而实现以新参数为指标的酸沉淀终点控制。1 材料1.1 试剂 冷沉淀溶解液(山东泰邦生物制品有限公司),批号分别为201435、201436、201437、201438、201439,每批留样200mL;BCA试剂盒(碧云天生物技术研究所);凝血因子Ⅷ促凝活性检测试剂盒(成都协和生物技术中心);醋酸(国药集团化学试剂有限公司,分析纯);三蒸水。1.2 仪器 Antaris II傅里叶变换近红外光谱仪(美国ThermoFhisher公司);PB-10酸度计(德国sartorius公司);BF300恒流泵(保定齐力恒流泵有限公司);JB-3A型恒温磁力搅拌器(上海雷磁创益仪器仪表有限公司);Legendmicro 17R离心机(美国ThermoFhisher公司);TW12恒温水浴箱(德国Julabo公司);3001-1890酶标仪(美国ThermoFhisher公司)。2 方法2.1 样品的制备2.1.1 配制醋酸溶液 量取醋酸约3.0mL,加入适量蒸馏水中,然后加蒸馏水至1.0L,得到浓度约为0.05M的醋酸溶液,混匀后用0.22 μm膜过滤。2.1.2 酸沉淀过程 参照实际生产过程,在实验室进行小试规模的酸沉淀过程。将超低温冻存的冷沉淀溶解液约100mL放至室温融化,缓慢倒入烧杯中,将烧杯置于低温水浴中,用酸度计监测溶解液的pH值和温度,然后以1mL/min的速度滴加配制好的醋酸溶液,边加边搅拌,使溶液的pH值由7.2左右降低至5.9左右,此过程中溶解液的温度由室温(25℃)均匀降低至15 ℃。重复进行此实验10次,每次实验过程之间保证相同的环境温度、水浴温度、醋酸浓度、加酸速度和搅拌速度。每次酸沉淀过程中pH值每变化0.1取样800μL,取样后立即进行离心(10000 rpm,5min),保留上清液作为样品,进行后面的光谱采集和蛋白含量及FⅧ效价的测定。2.2 近红外光谱的采集 选择AntarisII光谱仪的透射模块进行上清液光谱的采集。选用4 mm光程的比色皿,加样量约为400μL,光谱扫描范围为10000-4000 cm-1,扫描次数为32次,分辨率为8cm-1,以空气为参比进行采集,每隔1小时校正一次背景,测量环境为室温,湿度30%-50%。2.3 FⅧ效价的测定 使用凝血因子Ⅷ促凝活性检验试剂盒对上清液中的FⅧ效价进行检测,试剂盒中包含正常凝血质控血浆、缺凝血因子Ⅷ血浆,APTT试剂b/a、稀释液、CaCl2溶液,现用现配。2.3.1 标准曲线的制作 除氯化钙溶液在37℃水浴预热外,其余样品、试剂均置冰水浴中。 1)将正常凝血质控血浆用稀释液1作1/2、1/5、1/10、1/20、1/40、1/80倍比稀释,其对应FⅧ:C百分活性为500%、200%、100%、50%、25%、12.5%。 2)取某一稀释度正常凝血质控血浆0.1mL、缺凝血因子Ⅷ血浆0.1 mL、APTT试剂0.1mL于透明小试管,混匀后即置37℃水浴温浴10min。 3)迅速加入氯化钙溶液0.1mL,同时启动秒表,在水浴中以1-2次/秒的频率摇动小试管,当观察到凝固出现时,立刻停表记录凝固时间。 4)以不同稀释度正常凝血质控血浆FⅧ:C百分活性为X,对应的凝固时间(秒)为Y,按照统计学方法作直线回归方程,方程形式为Y=blog X+ a,即得标准曲线。2.3.2 样品效价的测定 1)将上清液用稀释液1作1/100倍稀释,即取10µL样品液加稀释液990µL,以此代替标准曲线制作项中某一稀释度正常凝血质控血浆,按照同样方法测定凝固时间。 2)将样品凝固时间(秒)代入标准曲线方程,计算X值,即得样品FⅧ:C百分活性水平。2.4 总蛋白含量的测定样品上清液中总蛋白质的含量测定采用Bicinchoninicacid(BCA)法。BCA法是应用较为广泛的蛋白定量方法之一,其原理是在碱性条件下,蛋白质与Cu2+络合,使之还原成Cu1+,Cu1+可与BCA形成稳定的蓝紫色复合物,复合物在561nm处有强吸收且吸收值与蛋白浓度成正比。BCA法原理与Lowery法相似,但是灵敏度高,操作简单,稳定性好,干扰物质对其影响也较小。2.4.1 配制工作溶液 将BCA试剂盒铜试剂按照体积比50:1混合,得到嫩绿色的标准工作试剂(WorkingReagent,WR),WR在室温条件下十分稳定。2.4.2 配制标准蛋白溶液配制0.5 mg/mL的BSA蛋白溶液,在96孔板中用PBS缓冲液对BSA溶液进行稀释,得到相同体积的BSA标准溶液0、25、50、100、200、300、400、500μg/mL,每个浓度的BSA标准溶液再各加200μL WR。具体稀释方案如表1所示。2.4.3 测定蛋白浓度每个样品取2 μL置于96孔板中,加18μL PBS缓冲液,然后加200 μL WR,在37℃培养箱中放置30min。将反应温度冷却至室温,用酶标仪测定标准蛋白溶液和样品溶液在561 nm处的吸光度值,绘制标准曲线,计算样品的蛋白浓度。表1 标准蛋白溶液和待测样品的加样量和比例 孔数 蛋白浓度(μg/mL) 标准或待测蛋白溶液体积(μL) PBS缓冲液体积(μL) WR体积(μL) 1 0 [ali

  • 一步法凝血酶原时间和活化部分凝血酶时间检测

    ——胡丽涛、王治国目的 为凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血酶时间(APTT)检测提供指南。方法 主要参考美国临床和实验室标准化研究院(CLSI)H47-A2文件相关内容,并结合具体的实际进行总结。结果 PT和APTT检测受到检验前、中和后各种变异的影响。通过检测技术的标准化提高检测的重复性,通过设定性能目标来确保检测的临床相关性。PT检测可用于检测肝素治疗,实验室应该建立肝素治疗范围。结论 对于疑似血液凝固障碍的患者评估,PT和APTT是非常重要的实验室筛查检测。在实际工作中要严格按照操作规程和厂家说明,保证结果的准确可靠,为临床提供诊疗依据。凝血酶原时间;部分活化凝血酶时间;国际标准化比值;校准 自从Quick在1953年首次描述了凝血酶原时间(PT),PT在可疑凝血障碍的患者评估方面成为了一项非常重要的实验室筛查检测,也是实验室最常见的凝血检测。尽管PT最先被描述成一种凝血酶原或凝血因子Ⅱ的特异性一步法检测,但是PT对凝血系统的共同途径和外源性途径所涉及到的任何凝血因子(凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纤维蛋白原)及因子抑制物的定量或定性的异常都非常敏感。同时,PT也是严重肝脏疾病或慢性肝病的一项适当指标,还是用于监测维生素K治疗最常用的指标。 PT检测的主要试剂凝血活酶是一种磷脂或组织制剂,通常为人源性或动物源性或人和动物的混合材料制成的各种商业化的制剂。这些商业化的凝血活酶制剂在其减少凝血因子的反应性方面存在差异,影响了其使用,特别是在维生素K治疗的检测过程中。 APTT对内源性凝血途径和共同途径的定量和定性异常敏感。是除PT之外,常规实验室最常进行的凝血检测。APTT对内源性凝血途径凝血因子缺乏(凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ、前激肽释放酶和高分子激肽原)尤为敏感。APTT检测通常用于监测低分子肝素抗凝治疗。APTT还用于检测其他类型的病理型血液凝固抑制物,最常见的是狼疮抗凝物质(LA)。APTT用于凝血因子替代治疗。APTT的检测试剂是促凝物、磷脂和接触激活剂组成的混合物。磷脂可能来源于人、动物或者植物。激活剂的种类也很多,如硅藻土、高岭土、微粉化的硅土和鞣花酸等。 一般,当凝血因子的活性低于参考区间的95%置信限水平时APTT会延长。但是,大量的研究表明不同的APTT试剂对于轻度和中度的凝血因子缺乏的反应程度存在一定的区别,特别是Ⅷ和Ⅸ因子缺乏。有相似的报道APTT对循环狼疮抗凝物质有不同的敏感性。同样,有文献报道商品化的APTT试剂对肝素的反应性不同,使得APTT值存在显著差异。

  • 【原创大赛】稀释液对凝血因子效价检测影响研究

    【原创大赛】稀释液对凝血因子效价检测影响研究

    [align=center][/align][align=left][b] 摘要:目的 [/b]确立不同稀释液对凝血因子效价检测的影响,研究因子效价检测的稀释方法,从而完善因子类血液制品效价检测的方法。 [b]方法 [/b]对同一批和连续生产的10批人凝血因子Ⅷ、人凝血酶原复合物样品进行全自动血凝仪法的效价检测,分别选用全自动血凝仪稀释液和含1%人血白蛋白稀释液进行检测,统计10次以上的检测结果以确定不同稀释液之间的差别。 [b]结果 [/b]本实验确定了在人凝血因子Ⅷ的效价检测中,采用不同的稀释液对每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅷ的样品进行稀释,无论是对同一批质控品的测定还是对连续批次样品的测定,检测结果之间存在较大的差别。而在人凝血酶原复合物人凝血因子Ⅸ的效价检测中,采用不同的稀释液对每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅸ的样品进行稀释,同一批质控品和连续批次样品检测结果之间差别较小。[b]结论 [/b]因子类血液制品效价检测时,同一样品采用不同的稀释液进行稀释检测结果可能存在较大差别,应对血凝仪是否可用于因子类血液制品进行评估,并应建立起正确的检测操作规程。[/align][b] 关键词: [/b]凝血因子; 稀释液; 效价测定 目前国内血液制品的生产是以健康人血浆为原料,经过分离纯化和病毒灭活制成,主要分为三大类,人血白蛋白、人免疫球蛋白类产品、人凝血因子类产品。国内已上市或在研的人凝血因子类产品主要有人凝血因子Ⅷ、人凝血酶原复合物、人纤维蛋白原、人纤维蛋白粘合剂、人凝血因子Ⅸ、人抗凝血酶Ⅲ等。人凝血因子Ⅷ主要用于防治甲型血友病和获得性凝血因子Ⅷ缺乏而致的出血症状病人的手术治疗。人凝血酶原复合物主要有效成分为人凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ,主要用于治疗主要用于乙型血友病、 维生素K依赖的凝血因子缺乏症等病症的治疗。 人凝血因子Ⅸ主要用于防治乙型血友病和获得性凝血因子Ⅸ缺乏而致的出血症状病人的手术治疗。因子类血液制品是血液中凝血因子的高纯度浓缩物,在进行效价测定时需要对样品进行稀释,而稀释液中蛋白含量的不同对其检测结果有着影响。因子效价测定方法有一期法、二期法和发色底物法。一期法是目前应用最广泛的检测方法,系用人凝血因子缺乏血浆为基质,在APTT试剂和氯化钙的参与下,根据凝血因子国家标准品和供试品的凝集时间来计算供试品中的人凝血因子效价,实际检测过程中将基于一期法原理的人凝血因子效价测定法分为三种方法,即手工法、半自动血凝仪法、全自动血凝仪法。全自动血凝仪只是对一期法中各反应试剂的加入顺序进行了修订以便实现仪器的自动操作。相对于手工法检测,消除了很多主观因素。在日常工作中,当使用不同种类的稀释剂而采用相同的检测原理和方法进行效价测定应不会对测定结果产生影响,但实际工作中发现使用不同种类的稀释剂对效价测定结果有一定的影响。在人凝血因子Ⅷ效价检测过程中,采用手工法、半自动血凝仪法、全自动血凝仪法进行人凝血因子Ⅷ效价的比对试验,发现手工法、半自动血凝仪法检测结果一致,这两种方法比全自动血凝仪法的检测结果高20%以上。血液制品的原料来源于人血浆,受原料限制,一直较为稀缺,尤其是当前人凝血因子Ⅷ的生产量远远无法满足血友病患者的需求[sup][[/sup][sup]1-5[/sup][sup]][/sup],不同检测方法间20%以上的检测差别可能影响20%的产品收率,所以建立起因子类产品效价准确的检测至关重要。[b][b]1 实验仪器与试剂1.1 仪器[/b][/b]Stago-compact全自动血凝仪(法国Diagnostica Stago公司),漩涡振荡器(美国Thermo Scientific公司)。[b][b]1.2 试剂[/b][/b]人凝血因子Ⅷ缺乏血浆(法国Diagnostica Stago公司),人凝血因子Ⅸ缺乏血浆(法国Diagnostica Stago公司),APTT试剂(法国Diagnostica Stago公司),Owren-Koller(稀释液)(法国Diagnostica Stago公司),0.025 mol/L氯化钙溶液(法国Diagnostica Stago公司),Desorb U(清洗液)(法国Diagnostica Stago公司),人凝血因子Ⅷ国家标准品(批号20100101),人凝血酶原复合物国家标准品(批号20130306),生理氯化钠溶液(石家庄四药有限公司),咪唑(天津市巴斯夫化工有限公司),氯化钠(天津市巴斯夫化工有限公司),枸橼酸钠(台山新宁制药有限公司),人血白蛋白(公司自产)。[b][b]2 方法2.1 人凝血因子Ⅷ不同稀释液稀释效价测定2.1.1 人凝血因子Ⅷ供试品Owren-Koller(稀释液)稀释效价测定方法[/b][/b] 人凝血因子Ⅷ国家标准品的定标:取1支人凝血因子Ⅷ国家标准品,加入1.0 ml纯化水复溶,轻轻混匀,用生理氯化钠溶液将其稀释成每1 ml含1.00 IU人凝血因子Ⅷ,将Desorb U(清洗液)、复溶后的人凝血因子Ⅷ缺乏血浆、0.025 mol/L氯化钙溶液、APTT以及每1ml含1.00 IU的人凝血因子Ⅷ标准品溶液分别装入全自动血凝仪的试剂抽屉,将Owren-Koller(稀释液)装入全自动血凝仪的样本抽屉,按照《Stago-compact全自动血凝仪标准操作规程》选择人凝血因子Ⅷ效价测定定标程序进行定标,仪器自动将装入的人凝血因子Ⅷ标准品溶液再进行2倍、4倍、8倍稀释,建立人凝血因子Ⅷ标准品溶液效价(分别为1.00 IU/ml、0.50 IU/ml、0.25 IU/ml、0.13 IU/ml)的对数对其相应凝固时间对数的直线回归方程。人凝血因子Ⅷ供试品效价测定:取人凝血因子Ⅷ供试品,按其标示装量加入灭菌注射用水复溶,轻轻混匀,用生理氯化钠溶液将其稀释成每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅷ,再用Owren-Koller(稀释液)做2倍、4倍稀释,将稀释后的供试品溶液装入全自动血凝仪的样本抽屉,选择人凝血因子Ⅷ效价测定选项进行测定。[b][b]2.1.2 人凝血因子Ⅷ供试品药典稀释液稀释效价测定方法[/b][/b] 人凝血因子Ⅷ国家标准品的定标同2.1.1人凝血因子Ⅷ供试品效价测定:取人凝血因子Ⅷ供试品,按其标示装量加入灭菌注射用水复溶,轻轻混匀,用生理氯化钠溶液将其稀释成每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅷ,再用药典稀释液(取1体积的3.8%枸橼酸钠加入5体积咪唑缓冲液混合,加适量20%人血白蛋白至终浓度为1%配制而成)做2倍、4倍稀释,将稀释后的供试品溶液装入全自动血凝仪的样本抽屉,选择人凝血因子Ⅷ效价测定选项进行测定。[b][b]2.2 人凝血酶原复合物人凝血因子Ⅸ不同稀释液稀释效价测定2.2.1 人凝血酶原复合物供试品Owren-Koller(稀释液)稀释效价测定方法[/b][/b] 人凝血因子Ⅸ国家标准品的定标:取1支人凝血酶原复合物国家标准品,加入1.0 ml纯化水复溶,轻轻混匀,用生理氯化钠溶液将其稀释成每1 ml含1.00 IU人凝血因子Ⅸ,将Desorb U(清洗液)、复溶后的人凝血因子Ⅸ缺乏血浆、0.025 mol/L氯化钙溶液、APTT以及每1ml含1.00 IU的人凝血因子Ⅸ标准品溶液分别装入全自动血凝仪的试剂抽屉,将Owren-Koller(稀释液)装入全自动血凝仪的样本抽屉,按照《STAGO Compact全自动血凝仪标准操作规程》选择人凝血因子Ⅸ效价测定定标程序进行定标,仪器自动将装入的人凝血因子Ⅸ标准品溶液再进行2倍、4倍、8倍稀释,建立人凝血因子Ⅸ标准品溶液效价(分别为1.00 IU/ml、0.50 IU/ml、0.25 IU/ml、0.13 IU/ml)的对数对其相应凝固时间对数的直线回归方程。 人凝血酶原复合物供试品效价测定:取人凝血酶原复合物供试品,按其标示装量加入灭菌注射用水复溶,轻轻混匀,用生理氯化钠溶液将其稀释成每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅸ,再用Owren-Koller(稀释液)做2倍、4倍稀释,将稀释后的供试品溶液装入全自动血凝仪的样本抽屉,选择人凝血因子Ⅸ效价测定选项进行测定。[b][b]2.2.2 人凝血酶原复合物供试品药典稀释液稀释效价测定方法[/b][/b] 人凝血因子Ⅸ国家标准品的定标同2.1.1。人凝血酶原复合物供试品效价测定:取人凝血酶原复合物供试品,按其标示装量加入灭菌注射用水复溶,轻轻混匀,用生理氯化钠溶液将其稀释成每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅸ,再用药典稀释液(取1体积的3.8%枸橼酸钠加入5体积咪唑缓冲液混合,加适量20%人血白蛋白至终浓度为1%配制而成)做2倍、4倍稀释,将稀释后的供试品溶液装入全自动血凝仪的样本抽屉,选择人凝血因子Ⅸ效价测定选项进行测定。[b][b]3 结果3.1 人凝血因子Ⅷ不同稀释液稀释效价测定结果[/b][/b] 2015ZK0801批人凝血因子Ⅷ为泰邦公司人凝血因子Ⅷ产品的质控品,取自正常生产的产品,用国家标准品标定后用作工作质控品。在进行人凝血因子Ⅷ效价测定时,分别用Owren-Koller(稀释液)和药典稀释液(取1体积的3.8%枸橼酸钠加入5体积咪唑缓冲液混合,加适量20%人血白蛋白至终浓度为1%配制而成)对每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅷ进行再稀释。检验结果见表1,效价检测结果为效价标示量的百分比。[align=center]表1 FⅧ质控品两种稀释液检测结果对比[/align][align=center][img=,586,268]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141920_02_1626619_3.png[/img][/align]用柱形图表示,如图1:[align=center][img=,488,300]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141921_02_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图1 FⅧ质控品两种稀释液检测结果对比[/align] 选取泰邦公司生产的连续10个批次的人凝血因子Ⅷ产品,进行人凝血因子Ⅷ效价测定,分别用Owren-Koller(稀释液)和药典稀释液(取1体积的3.8%枸橼酸钠加入5体积咪唑缓冲液混合,加适量20%人血白蛋白至终浓度为1%配制而成)对每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅷ进行再稀释。检验结果见表2,效价检测结果为效价标示量的百分比。[align=center]表2 连续10批FⅧ两种稀释液检测结果对比[/align][align=center][img=,580,273]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141921_03_1626619_3.png[/img][/align]用柱形图表示,如图2:[align=center][img=,499,310]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141922_01_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图 2 连续10批FⅧ两种稀释液检测结果对比[/align][b][b]3.2 人凝血酶原复合物不同稀释液稀释效价测定结果[/b][/b] 2015ZK0901批人凝血酶原复合物为泰邦公司人凝血酶原复合物产品的质控品,取自正常生产的产品,用国家标准品标定后用作工作质控品。在进行人凝血酶原复合物人凝血因子Ⅸ效价测定时,分别用Owren-Koller(稀释液)和药典稀释液(取1体积的3.8%枸橼酸钠加入5体积咪唑缓冲液混合,加适量20%人血白蛋白至终浓度为1%配制而成)对每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅸ进行再稀释。检验结果见表3,效价检测结果为效价标示量的百分比。[align=center]表3 PCC质控品两种稀释液检测结果对比[/align][align=center][img=,580,269]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141923_01_1626619_3.png[/img][/align]用柱形图表示,如图3:[align=center][img=,548,288]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141923_02_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图3 PCC质控品两种稀释液检测结果对比[/align] 选取泰邦公司生产的连续10个批次的人凝血酶原复合物产品,进行人凝血酶原复合物人凝血因子Ⅸ效价测定,分别用Owren-Koller(稀释液)和药典稀释液(取1体积的3.8%枸橼酸钠加入5体积咪唑缓冲液混合,加适量20%人血白蛋白至终浓度为1%配制而成)对每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅸ进行再稀释。检验结果见表4,效价检测结果为效价标示量的百分比。[align=center]表4 连续10批PCC两种稀释液检测结果对比[/align][align=center][img=,573,259]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141947_01_1626619_3.png[/img][/align]用柱形图表示,如图4:[align=center][img=,548,327]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709141947_03_1626619_3.png[/img][/align][align=center]图4 连续10批PCC两种稀释液检测结果对比[/align][b][b]4 讨论[/b][/b] 本实验确定了在人凝血因子Ⅷ的效价检测中,采用不同的稀释液对每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅷ的样品进行稀释,无论是对同一批质控品的测定还是对连续批次样品的测定,检测结果之间存在较大的差别,另外对FⅧ质控品两种稀释液检测结果运用软件SPSS17.0进行均值单因素ANOVA比较,计算P值,P<0.05表明两种方法的结果有显著性差异,含有蛋白的稀释液的检测结果明显高于不含蛋白的稀释液。而在人凝血酶原复合物人凝血因子Ⅸ的效价检测中,采用不同的稀释液对每1 ml约含1.00 IU人凝血因子Ⅸ的样品进行稀释,同一批质控品和连续批次样品检测结果之间差别较小,另外对PCC质控品两种稀释液检测结果运用软件SPSS17.0进行均值单因素ANOVA比较,计算P值,P>0.05表明两种方法的结果无显著性差异。在使用全自动血凝仪进行人凝血因子Ⅷ和人凝血酶原复合物等因子类血液制品效价检测时,一般按照仪器的使用说明书和配套试剂进行稀释检测,但是忽视了血凝仪的开发目的是用于临床血浆样品的检测,而血浆与高纯度的血液制品浓缩物是不同的,用检测血浆样品的方法进行因子类血液制品的效价检测可能影响检测结果。因子类血液制品效价检测时,同一样品采用不同的稀释液进行稀释检测结果可能存在较大差别,应对血凝仪是否可用于因子类血液制品进行评估,并应建立起正确的检测操作规程。因子类血液制品采用不同的稀释液进行稀释检测结果可能存在较大差别可能跟产品本身的性质有关,因子类血液制品经过分离、纯化,去除了众多的杂质蛋白,为高纯度的浓缩物,活性较高,但蛋白质含量较低,人凝血因子Ⅷ的蛋白质含量约为0.1%,人凝血酶原复合物的蛋白质含量约为2.3%,而临床血浆样本的蛋白质含量约为5%,, 人凝血因子Ⅷ加入含1%人血白蛋白的稀释液后对FⅧ效价测定影响较大,PCC中加入含1%人血白蛋白的稀释液后对FⅨ效价测定影响较小,可能是人凝血因子Ⅷ的蛋白质含量远小于血凝仪设计用于检测的血浆样本的蛋白含量,故建立不同蛋白质浓度梯度的稀释液对因子效价进行测定,从而确认蛋白质浓度对因效价测定的影响。[b]参考文献:[/b]Cheng E, Jinzenji D, Lorthiois AP, et al. Purification of coagulation factorⅧ using chromatographic methods. Direct chromatography of plasma in anion exchange resins . Biotechnol Lett, 2010, 32(9):1207-1214.李策生, 周志军, 胡勇, 等. 人凝血因子Ⅷ中试纯化工艺的质量控制 .中国生物制品学杂志, 2013, 26(10):1508-1512.冉曙光, 刘文芳, 赵辉. 凝血因子Ⅷ浓缩物的制备及安全性和有效性 .中国输血杂志, 2008, 21(2):156-159.倪道明, 朱威. 血液制品 . 北京: 人民卫生出版社, 2013:21.王卓, 赵雄, 吕茂民, 等. 血液制品的现状与展望 . 生物工程学报, 2011, 27(5):730-746.[b] [/b]

  • 【原创大赛】人凝血因子VIII中氨基酸含量测定

    【原创大赛】人凝血因子VIII中氨基酸含量测定

    人凝血因子VIII中氨基酸含量测定摘要 目的: 建立用高效液相色谱法测定人凝血因子VIII中氨基酸含量。方法: 采用6 - 氨基喹啉- N - 羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯( AQC) 为衍生剂,与氨基酸柱前衍生后,用Agilent 1200 高效液相色谱仪,AccQ·Tag C18柱( waters 150 mm ×3. 9 mm,4 μm) ,以水Eluent( 醋酸盐- 磷酸盐缓冲液) 稀释液和乙腈进行梯度洗脱,检测波长为248 nm,柱温37 ℃,进样量10μL。结果: 各氨基酸在32 min 内测定完毕,回收率为98.7% ~ 101.5%。RSD 均小于1. 5%。结论: 本法分离度好,快速、简便,可作为产品的质量控制方法。关键词: 6 - 氨基喹啉- N - 羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯; 人凝血因子VIII; 甘氨酸; 衍生物; 梯度洗脱; 高效液相色谱法;氨基酸; 含量测定人凝血因子VIII,本品对缺乏人凝血因子礓所致的凝血机能障碍具有纠正作用,主要用于防治甲型血友病和获得性凝血因子Ⅷ缺乏而致的出血症状及这类病人的手术出血治疗。该药物制备过程中使用了氨基酸( 精氨酸、丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、盐酸赖氨酸、脯氨酸 等) 做稳定剂,为了保证药品质量和用药安全,应对其中氨基酸的含量进行控制。该法依据过量的6 - 氨基喹啉基- N - 羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯( AQC) 在一定条件和氨基酸形成稳定的衍生产物( 柱前衍生) ,用高效液相色谱法测定衍生产物,根据衍生产物的含量计算人凝血因子中各氨基酸的含量。1 仪器和试药1200 高效液相色谱系统( 美国Agilent 公司) ,配置低压四元梯度泵、1314B 紫外吸收检测器、自动进样器、柱温箱、Chemistations 化学工作站; Sartorius CP225D 电子微量天平( 德国Sartorius 公司) ; SartoriusPB - 21 型pH 计( 德国Sartorius 公司) ; LDZ5 -2 低速自动平衡离心机( 上海医用离心机厂) 等。各标准品均来自于中国食品药品检定研究院2 色谱条件及系统适用性试验色谱柱: Waters AccQ·Tag C18色谱柱( 3. 9 mm ×150 mm) ; 流动相: 水为溶剂D,Eluent( 醋酸盐- 磷酸盐缓冲液) 稀释液( A) - 乙腈( B) - 水( D) ,柱温:37 ℃; 检测波长: 248 nm。精密量取对照品溶液与供试品溶液10 μL,分别注入液相色谱仪,记录色谱图32 min。梯度洗脱条件表见表1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508311802_563771_1637386_3.png

  • 【原创大赛】原子吸收分光光度法测定人凝血因子VIII中铝离子残留量

    【原创大赛】原子吸收分光光度法测定人凝血因子VIII中铝离子残留量

    建立了使用石墨炉原子吸收分光光度法检测人凝血因子VIII中铝含量的分析方法,探讨了以非离子表面活性剂Triton X-100,基体改进剂,干燥温度和气体流量对实验结果的影响.在最佳工作条件下,铝的检测限为0.8μg/l;样品测得的相对标准偏差(n=6)为5.6%,加标回收率94.5%~103.5 %。方法适合人凝血因子VIII中铝离子残留量的分析测定。关键词:铝;石墨炉原子吸收分光光度法;人凝血因子VIII,残留量 铝是一种人体非必需的微量元素, 如果摄入过多, 将会严重影响人体的神经系统, 不仅使老年人易患痴呆病,还会引发慢性肾功能损害等病症, 故世界卫生组织及欧洲药典等均将铝含量的测定作为成品检定项目之一。 人凝血因子VIII辅料中加入Al2O3作为吸附剂,因此其在制剂中需对其残留量进行检测。由于其制剂成分复杂、有机物干扰严重、某些样品中的铝含量极低, 有些分析方法检出限达不到要求。石墨炉原子吸收光谱法是铝残留量分析中常用的方法之一。 本文采用非离子表面活性剂Triton X-100,基体改进剂硝酸镁 ,建立了石墨炉原子吸收分光光度法检测人凝血因子VIII中铝离子残留量的分析方法。1  实验部分1 .1  仪器与试剂ICE 3400GF 型原子吸收光谱仪(美国Thermo公司):ID100 自动稀释器,Chill I冷却水系统,GFS35Z石墨炉,自参比单光束塞曼系统, GFS 石墨炉自动进样器, 涂层石墨管(Extended Lifetime Cuvettes);铝空心阴极灯;ELGA Q15 纯水机。HNO3为MOS级;100μg/mL铝元素标准溶液(GSB 04-1713-2004) , 标准工作溶液均由以上溶液经超纯水逐级稀释而成的;稀释液:1%(v/v)硝酸+0.01%(v/v)Triton X-100(化学纯试剂);2.5g/L Mg(NO3)2 基体改进剂:称取0.25g分析纯Mg(NO3)2到PPE塑料烧杯中, 用超纯水溶解定容至100mL PPE塑料容量瓶中。实验所用水为电阻率为18.2 MΩ·cm 的超纯水。1 .2  样品预处理1.2.1 供试品溶液 精密量取供试品溶液0.2ml,加稀释液2.3ml。1.2.2 混合溶液 精密量取供试品溶液0.2ml,加入100μg/L标准铝溶液0.50ml,再加稀释液1.8ml。1 .3  实验方法准确移取稀释液、供试品溶液、混合溶液倒入自动进样器的样品杯中, 再通过自动进样器进样后由石墨炉原子吸收光谱仪进行铝含量的测定。1 .4  仪器工作条件石墨炉原子吸收光谱仪测定铝时的工作参数设置和石墨炉升温程序见表1 和表2 。表1 石墨炉原子吸收光谱仪的操作参数Tab.1 Operating parameters for GFAAS电流 I/mA测定波长 λ/nm缝隙宽度 l/nm测定模式进样量 V/µL基体改进剂8309.30.5峰高102.5g/L Mg(NO3)2 表2 石墨炉升温程序Tab.2 Graphite furnace heating program步骤程序温度 ℃时间 s斜坡 ℃/s气体类型气体流量 l/min1干燥8010.00氩气0.22干燥1105.03氩气0.13干燥2205.01氩气0.24灰化150010.00氩气0.15原子化26005.00氩气06清除26505.00氩气0.3 1 .5  工作曲线的制作将0

  • 壳聚糖止血粉促凝血作用的实验研究

    【序号】:1【作者】: 于佳鑫【题名】:壳聚糖止血粉促凝血作用的实验研究【期刊】:影像研究与医学应用. 【年、卷、期、起止页码】:2018,2(05)【全文链接】:https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDLAST2018&filename=YXYY201805159&uniplatform=NZKPT&v=PHm7p9Rc2CgPScGXeXyvUFix-WBMA12jeytsIyDnJZXLw-WSRFCaK9jDGAkjOwc9

  • 【原创大赛】一种快速测定人凝血因子Ⅷ冷冻干燥过程中水分含量的方法

    摘要:目的 建立一种快速测定人凝血因子Ⅷ冷冻干燥过程中水分含量的方法。 方法 首先采用卡尔费休容量滴定法测定不同冻干程度的人凝血因子Ⅷ的水分含量,做为一级数据,并同时采集样品的近红外光谱;采用K-S方法对样品集进行划分,学生化残差-杠杆值去除异常样品,考察不同的光谱预处理方法,利用iPLS和GA对建模波段进行选择,以R2、RMSEC、RMSECV、RMSEP值为模型评价指标。 结果 所建立模型的主要参数为R2=0.918,RMSEC=0.2141,RMSECV =0.4102,RMSEP=0.3848,线性较好,光谱与样品的水分含量有较好的相关性。结论 建立的FⅧ成品的水分含量模型满足生产需求,是一种快速无损的检测方法,同时减少了FⅧ样品和卡尔费休试剂等的损耗,是一种十分经济有效的方法。关键词:近红外光谱分析技术 人凝血因子Ⅷ 水分 冻干血液制品在医疗急救和某些特定遗传疾病治疗上具有其他药品无法替代的作用,但我国当前整个血液制品行业长期处于供不应求的状态,因此提高血浆综合利用率、增加各产品的收率是解决现状的一个必要举措。其中人凝血因子Ⅷ(coagulation factor Ⅷ, FⅧ)是治疗甲型血友病和获得性凝血因子Ⅷ缺乏而致的出血症状等不可或缺的药品,而目前国内生产工艺相对落后,少数企业有能力生产FⅧ。水分是确保产品质量的一个重要参数,它的含量和存在形式对FⅧ的结构和功能影响很大,直接关系到FⅧ产品的稳定性。在生产中,通过冷冻干燥使FⅧ制剂的水分含量在3.0%以下。但是冻干过程无法取样,只能依据经验,通过观察冻干曲线对冻干条件和冻干时间进行控制,无法直接对产品水分含量进行判定;而产品的水分含量测定采用常规的卡氏水分测定方法,具有破坏性切费时费力,而且测定结果无法代表整批产品的特性。近红外光谱分析技术(Near InfraredSpectroscopy,NIRS)是当前最重要的一种PAT技术,它是指应用波长范围在780-2526nm波长范围内的电磁波的一种光谱学方法,在制药、医学诊断、食品和农产品的质量控制,天文学以及治疗医学等领域都有应用。本实验室采用近红外光谱分析技术,对产品进行快速、无损隔瓶测定,并可以实现多点测控,测定冻干产品中的水分含量,以判断干燥终点。1 材料1.1 试剂人凝血因子Ⅷ(冻干剂,200IU/瓶,山东泰邦生物制品有限公司);甲醇(分析纯,国药集团化学试剂有限公司);卡尔·费休试剂(KFR-06型,天津市科密欧化学试剂有限公司);注射用水。1.2 仪器Antaris Ⅱ傅里叶变换近红外光谱仪(美国Thermo Fisher scientific公司),附件配置:积分球漫反射检测器;KF-4型自动水分测定仪(南京科环分析仪器有限公司);Alpha 1-2 LD实验室型冻干机(德国Christ公司);VD-53真空干燥箱(德国Binder公司);EL204电子天平(METTLER TOLEDO公司)。2 方法2.1 样品的制备取若干瓶FⅧ冻干剂,每瓶加10mL注射用水溶解完全,置于-80℃超低温冰箱预冻2h以上。开启冻干机,使冷阱降温至-55℃,并将真空泵预热。取出预冻完全的FⅧ,放置在干燥室内的搁板上,抽真空开始升华干燥,干燥过程中搁板温度约为-20℃,真空度为10Pa。升华干燥的时间为12-48h不等,到时间后关闭真空泵,通过真空密封阀门使干燥室通气,取出样品。选取部分升华干燥时间在24h以上的样品,转移至真空干燥箱内,进行解析干燥,其余样品封盖密封保存。解析干燥的温度为32℃,真空度为10Pa,干燥时间为5-24h不等。干燥结束后取出样品,压盖密封保存。最终共得到88个样品,通过控制干燥时间的不同使获得的样品拥有不同的水分含量,而且能够涵盖使用该模型预测样品水分时可能遇到的浓度范围,以保证未知样品水分含量的预测是通过模型内插进行分析的,从而使模型具有有效性和实用性。2.2 光谱的采集本实验使用Antaris Ⅱ傅里叶变换近红外光谱仪,包括带InGaAs检测器的积分球漫反射分析模块,采用仪器自带的RESULT-Intergration软件编写采集光谱的工作流程。仪器的主要工作参数为:光谱扫描范围为10000cm-1-4000cm-1,分辨率为8cm-1,光谱扫描次数为32,每个样品在不同部位采集3张光谱。近红外漫反射光谱吸收强度设定为lg(1/R)。启动仪器,预热至少30分钟,检查仪器各项性能是否正常。采用仪器自带的RESULT-Operation采集光谱,调用编写好的工作流程,将装有样品的西林瓶直接放在通光孔并固定位置,即可采集样品的傅里叶变换近红外光谱数据。2.3 水分含量的测定依据《中国药典》三部附录VII D 水分测定法第一法—卡尔费休容量滴定法,测定样品的水分含量。2.4 建立校正模型在MATLAB中运行PLS_Toolbox工具箱进行数据处理,采用PLS建立FⅧ冻干过程中水分含量的定量分析模型。用K-S分类的方法将样品划分为校正集和验证集。根据学生化残差和杠杆值等统计指标识别并去除异常样品。对光谱数据进行必要的平滑、求导等预处理,以消除噪声和基线漂移等的影响。使用iPLS和GA等方法选择光谱区间,优选与水分含量相关性强的谱区,减少无效信息的使用。3 结果3.1 样品制备及水分含量测定结果共制备得到88个样品,水分含量范围为1.00%-5.30%。其中1-60号样品只进行了不同时间的升华干燥,水分含量在2.04%-5.30%之间;61-88号样品在升华干燥后进行了不同时间的解析干燥,水分含量在1.00%-2.75%之间。3.2 样品的近红外光谱所有88个样品的原始近红外漫反射光谱如图1所示。从图中可发现,样品光谱的基线漂移十分严重,所以必须进行适当的预处理,以消除基线漂移以及光谱噪声等的影响。水分子的O-H在近红外谱区有两个特征谱带:5150cm-1的组合频吸收和6950cm-1的OH伸缩振动一级倍频吸收。这两个特征吸收是建模时选择光谱区间的重要依据。data:image/png;base64,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

  • 335万!西安市妇幼保健院HPV试剂、生化凝血和血常规试剂采购项目

    [b][font=inherit]项目概况[/font][/b]HPV试剂、生化凝血和血常规试剂采购项目招标项目的潜在投标人应在全国公共资源交易平台(陕西省西安市)网站〖首页〉电子交易平台〉陕西政府采购交易系统〉企业端〗获取招标文件,并于 2022年12月29日 09时30分 (北京时间)前递交投标文件。[b][font=inherit]一、项目基本情况[/font][/b]项目编号:SXZBXA2022-37项目名称:HPV试剂、生化凝血和血常规试剂采购项目采购方式:公开招标预算金额:3,350,000.00元采购需求:合同包1(诊断试剂):合同包预算金额:3,350,000.00元合同包最高限价:3,350,000.00元[table=100%][tr][td]品目号[/td][td]品目名称[/td][td]采购标的[/td][td]数量(单位)[/td][td]技术规格、参数及要求[/td][td]品目预算(元)[/td][td]最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]1-1[/td][td]诊断用生物试剂盒[/td][td]HPV试剂、生化检测试剂、凝血和血常规检测试剂[/td][td]1(批)[/td][td]详见采购文件[/td][td]3,350,000.00[/td][td]3,350,000.00[/td][/tr][/table]本合同包不接受联合体投标合同履行期限:具体时间以合同上签订时间为准。

  • FPMRC-UT-2100C自动酶标分析仪应用及规格参数值

    [b]自动酶标分析仪UT-2100C[/b]是采用美国雷杜RT-2100C酶标仪技术制造的全自动酶标仪,在进口酶标分析仪品牌中具有竞争力的酶标分析仪价格。[b]自动酶标分析仪UT-2100C[/b]可应用于单克隆抗体筛分、凝血分、抗生素灵敏度检验,以及其它需要进行比色的分析工作中,适用于临床检验、微生物学、流行病学、免疫学、 内分泌学以及农林科学等领域。[align=center][img=自动酶标分析仪]http://www.f-lab.cn/Upload/UT-2100C.jpg[/img][/align][b][url=http://www.f-lab.cn/microplate-readers/ut-2100c.html]自动酶标分析仪UT-2100C[/url]规格参数[/b] 波长:405,450,492,630nm(波长从400-700nm可任选),另外可加配四个波长 半波宽:8nm±1nm 读数范围:0.000-3.500Abs 测量范围:0.000-2.500Abs 分辨率:0.001Abs(显示),0.0001Abs(内部计算) 线性系数:r≥0.995 重复性:+1.0%或0.007A 精确度:±0.5%或0.005A 计算模式:吸光度,阈值,单点定标,折线回归,多点百分比,线性回归,对数曲线,指数曲线,幂曲线测量模式:8通道光纤测量系统 检测速度:单波长5秒/96孔,双波长7秒/96孔 震板功能:三种震板模式和震板时间可调 显示:5.7"LCD(320x240线,256色) 输入方式:触摸屏输入,也可外接鼠标 接口:RS-232和打印机并口打印报告:外接通用打印机,带中文综合报告 存储:500测试项目,10000样品结果 使用环境:温度10℃-40℃;湿度20%-85% 体积(LWH):450mmx330mmx190mm 重量:10KG更多酶标仪和洗板机: [url]http://www.f-lab.cn/microplate-readers.html[/url]

  • 全血中毒鼠强测定(血要抗凝还是不抗凝?)

    如果测定全血中毒鼠强,对血有没有特别要求呢?一定要用不抗凝血吗?还是抗凝血呢?感觉都可以用吧?测定步骤是这样的,离心,取血清,加2ml乙酸乙酯,萃取10min,再加2ml乙酸乙酯,萃取10min,氮吹仪浓缩至0.5ml,进气质定性或定量。

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    如果测定全血中毒鼠强,对血有没有特别要求呢?一定要用不抗凝血吗?还是抗凝血呢?感觉都可以用吧?测定步骤是这样的,离心,取血清,加2ml乙酸乙酯,萃取10min,再加2ml乙酸乙酯,萃取10min,合并萃取液于氮吹仪浓缩至0.5ml,进气质定性或定量。

  • 【原创】血气分析仪使用过程中注意的问题

    血气分析能反映机体的呼吸和代谢功能,随着急诊医学的发展,血气分析已成为危重病人监测的重要内容之一,其结果对医生的诊断、治疗起着直接的导向作用。护士是血气分析标本的采集者,正确留取和处置标本在减少或消除偶然误差、保证血气分析结果的可靠性方面起着不可忽视的作用。现将有关问题综述如下。1 标本采集 1.1 采血部位 理论上从全身任何动脉采集标本均可。理想的部位应是表浅易于触及、穿刺方便、体表侧支循环较多、远离静脉和神经的动脉。桡动脉较为理想,但痛觉敏感,对循环衰竭病人不易成功。股动脉粗大,对循环衰竭的病人及儿童适用 [1] 。陈辉英 [2]报道对破伤风患儿首选颞浅动脉,因额顶枕部无骨骼肌,不会因穿刺刺激发生肌肉强直及痉挛现象。婴幼儿因动脉血采集困难,可采用“动脉化”静脉血标本。 1.2 采血器材 塑料注射器和玻璃注射器均可使用。但塑料注射器采集的标本可靠性不稳定,抽血后存放15min其二氧化碳分压(PaCO 2 )开始下降,同时,小气泡能够牢固的附着在塑料注射器内壁上,难以从样本中排出空气,影响结果的准确性 [3] 。罗谷容报道 [4] 应用ABG动脉血气针(预设型)进行穿刺可保证血样不混入空气,明显减轻疼痛。应用5号小针头穿刺桡动脉也可使疼痛减轻 [5] 。对需反复穿刺采血的病人可留置封闭式套管针 [6] 。 1.3 采血方法 股动脉采血多用直刺法,针头与皮肤呈90°进针。桡动脉采血用斜刺法,触摸动脉搏动最强处以30~45°角进针。还可从解剖学角度定位,以桡骨茎突为基点,向尺侧移动1cm,再向肘的方向移动0.5cm作为进针点 [7] 。对小儿可在B超引导下行桡动脉穿刺 [8] 。对留置封闭式套管针可用非肝素化注射器采血1ml [6] ,由原有留置的动脉导管内采血。王俊娥等 [9] 研究认为只需抽取6ml动脉血后取样,减少了血液浪费,避免了反复穿刺造成的疼痛及并发症。马爱兰 [10] 报道采取使用两个三通管的方法,即在原有的一个三通管与输液器之间再连接一个三通管,20ml注射器连接于该三通管的侧端,在留取血气分析标本前先抽取肝素及5~8ml动脉血,留取标本后将动脉血回输及肝素抗凝,避免了血液浪费,并可准确控制输入肝素的量,避免影响患者的凝血功能。2 影响因素及控制 2.1 病人状态的稳定性 病人若心理状态不稳定,在短时间内可以影响病人的呼吸状态,从而影响血液中pH值、PaˉCO2 、PaO 2 等不稳定参数的结果。如由于害怕取样,有些病人呼吸急促,引起pH值、PaO 2 增加,PaCO 2 减少 瞬间憋气则会使pH值、PaO2 减少,PaCO2 增加。在采血时必须向患者进行解释,力求穿刺准确,一针见血,必要时应用局麻药,减轻病人痛苦,使病人处于情绪稳定状态。在婴幼儿,部分患儿的家长往往把患儿用衣物“封闭”起来,或由于在保温箱中接受较长时间治疗,同时为了保暖使通风较差,造成CO 2 的重复性呼吸,出现PaCO 2 增高的假象 若患儿长时间啼哭不止,由于通气量加大,将使PaCO 2呈非病理性下降 [11] 。因此,护士在采血前应对患者状态进行评估,对有CO 2 重复性呼吸的患儿,要通风30min,啼哭患儿待呼吸平稳后30min再行采血,以提高血气分析结果的准确性。 2.2 治疗因素 吸氧及吸氧浓度对PaO2 有直接的影响。采血前,应停止吸氧30min [12] 。如果病情不允许,采血时要记录给氧浓度。当改变吸氧浓度时,要经过15min以上的稳定时间再采血。同样,机械通气病人取血前30min呼吸机设置应保持不变。临床用碱性药物、大剂量青霉素钠盐、氨苄青霉素等输入人体后短期内会引起酸碱平衡暂时变化,从而掩盖了体内真实的酸碱紊乱,以致造成误诊,因此采血应在病人用药前30min进行。含脂肪乳剂的血标本会严重干扰血气电解质测定,还会影响仪器测定的准确性和损坏仪器。应尽量在输注乳剂之前取血,或在输注完脂肪乳剂12h后,血浆中已不存在乳糜后才能送检,而且血气申请单上必须注明病人使用脂肪乳剂及输注结束时间 [13] 。 2.3 抗凝剂的影响 血气分析所使用的动脉血标本必须抗凝,而肝素钠是唯一可使用的抗凝剂。肝素溶液对血气测定值的影响主要是稀释。稀释对PaCO 2 、HCO 3- 测定值影响最大。正常动脉血当稀释5%时,PaCO 2下降0.27kPa(-2.0mmHg),碳酸氢根浓度、BE下降1.2mmol/L,PaO2 上升0.53kPa(+4.0mmHg),pH无影响。美国B-D公司经过一系列测定,发现肝素溶液稀释的2ml血样中因有0.25ml的死腔肝素(塑料注射器),其稀释会使PaCO 2 由40mmHg降低至35mmHg。而其公司生产的预设型动脉血气针内含100单位固体肝素锂,无液体稀释效应,结果可靠。采用肝素钠抗凝时,应将肝素钠与血液样本的比例控制在1∶20以下,即5ml和2ml注射器取血量分别应3.3ml和2ml,否则误差极大 [13] 。 2.4 标本的存放 血液中含有可呼吸的活性细胞(白细胞、网织红细胞),它们在取样后仍然继续消耗氧气产生CO 2 ,一般动脉血样本体外37℃保存,每10min PaCO 2 增加1mmHg,pH减少0.01 [3] 。因此抽血后应立即送检,一般从标本采集到完成测定,时间不超过30min。遇特殊情况不能立即测定时,应放在含有冰水的容器中,但保存时间不超过2h。测定前要在室温下放置数分钟,因为温度每下降1℃可使pH上升0.014,对PaO2 、PaCO2 也有影响[12] 。 2.5 患者体温的影响 温度会影响pH、PaCO2 、PaO 2 的测定值。患者体温高于37℃,每增加1℃,PaO 2 将增加7.2%,PaO 2 增加4.4%,pH降低0.015 体温低于37℃时,对pH和PaCO2 影响不明显,而对PaO 2 影响较显著。体温每降低1℃,PaO2 将降低7.2% [14] 。因此,必须在化验单上注明患者的实际体温,实验室测定时即可应用仪器中的“温度校正”按钮,校正到患者的实际温度,保证测定结果的准确性。 我公司供应各种血气分析仪定标气(配置各种进口钢瓶) 重庆科利仪器仪表成套研究所是重庆地区一家以分析仪器仪表成套、技术服务和传感器代理为主的高科技企业。她座落在“仪表城”重庆北碚美丽的缙云山脚下,“质量第一,服务至上”是我们的工作准则,我们可为阁下提供以下服务。 医用血气分析仪标准气体部:12年专业血气生产经验,可为各种型号的血气分析仪提供标准气体。 我公司专业生产康仁-348血气分析仪标准气 丹麦雷度ABL-700血气分析仪标准气 我公司产品服务对象 拜尔(Bayer) 系列血气分析仪 康仁 248 348  系列血气分析仪 美国 NOVA 公司 系列血气分析仪 美国 IL 公司 系列血气分析仪 丹麦 ABL 公司 系列血气分析仪 瑞士 AVL 公司 系列血气分析仪 德国 premier X 系列血气分析仪 其它类型血气分析仪 详细请登陆公司网站 http://www.87keli.com 电话 023-68117577 86027668 68860363 邮箱 cq87keli@163.com

  • 【转帖】血气分析仪使用过程中注意的问题

    血气分析能反映机体的呼吸和代谢功能,随着急诊医学的发展,血气分析已成为危重病人监测的重要内容之一,其结果对医生的诊断、治疗起着直接的导向作用。护士是血气分析标本的采集者,正确留取和处置标本在减少或消除偶然误差、保证血气分析结果的可靠性方面起着不可忽视的作用。现将有关问题综述如下。1 标本采集 1.1 采血部位 理论上从全身任何动脉采集标本均可。理想的部位应是表浅易于触及、穿刺方便、体表侧支循环较多、远离静脉和神经的动脉。桡动脉较为理想,但痛觉敏感,对循环衰竭病人不易成功。股动脉粗大,对循环衰竭的病人及儿童适用 [1] 。陈辉英 [2]报道对破伤风患儿首选颞浅动脉,因额顶枕部无骨骼肌,不会因穿刺刺激发生肌肉强直及痉挛现象。婴幼儿因动脉血采集困难,可采用“动脉化”静脉血标本。 1.2 采血器材 塑料注射器和玻璃注射器均可使用。但塑料注射器采集的标本可靠性不稳定,抽血后存放15min其二氧化碳分压(PaCO 2 )开始下降,同时,小气泡能够牢固的附着在塑料注射器内壁上,难以从样本中排出空气,影响结果的准确性 [3] 。罗谷容报道 [4] 应用ABG动脉血气针(预设型)进行穿刺可保证血样不混入空气,明显减轻疼痛。应用5号小针头穿刺桡动脉也可使疼痛减轻 [5] 。对需反复穿刺采血的病人可留置封闭式套管针 [6] 。 1.3 采血方法 股动脉采血多用直刺法,针头与皮肤呈90°进针。桡动脉采血用斜刺法,触摸动脉搏动最强处以30~45°角进针。还可从解剖学角度定位,以桡骨茎突为基点,向尺侧移动1cm,再向肘的方向移动0.5cm作为进针点 [7] 。对小儿可在B超引导下行桡动脉穿刺 [8] 。对留置封闭式套管针可用非肝素化注射器采血1ml [6] ,由原有留置的动脉导管内采血。王俊娥等 [9] 研究认为只需抽取6ml动脉血后取样,减少了血液浪费,避免了反复穿刺造成的疼痛及并发症。马爱兰 [10] 报道采取使用两个三通管的方法,即在原有的一个三通管与输液器之间再连接一个三通管,20ml注射器连接于该三通管的侧端,在留取血气分析标本前先抽取肝素及5~8ml动脉血,留取标本后将动脉血回输及肝素抗凝,避免了血液浪费,并可准确控制输入肝素的量,避免影响患者的凝血功能。2 影响因素及控制 2.1 病人状态的稳定性 病人若心理状态不稳定,在短时间内可以影响病人的呼吸状态,从而影响血液中pH值、PaˉCO2 、PaO 2 等不稳定参数的结果。如由于害怕取样,有些病人呼吸急促,引起pH值、PaO 2 增加,PaCO 2 减少 瞬间憋气则会使pH值、PaO2 减少,PaCO2 增加。在采血时必须向患者进行解释,力求穿刺准确,一针见血,必要时应用局麻药,减轻病人痛苦,使病人处于情绪稳定状态。在婴幼儿,部分患儿的家长往往把患儿用衣物“封闭”起来,或由于在保温箱中接受较长时间治疗,同时为了保暖使通风较差,造成CO 2 的重复性呼吸,出现PaCO 2 增高的假象 若患儿长时间啼哭不止,由于通气量加大,将使PaCO 2呈非病理性下降 [11] 。因此,护士在采血前应对患者状态进行评估,对有CO 2 重复性呼吸的患儿,要通风30min,啼哭患儿待呼吸平稳后30min再行采血,以提高血气分析结果的准确性。 2.2 治疗因素 吸氧及吸氧浓度对PaO2 有直接的影响。采血前,应停止吸氧30min [12] 。如果病情不允许,采血时要记录给氧浓度。当改变吸氧浓度时,要经过15min以上的稳定时间再采血。同样,机械通气病人取血前30min呼吸机设置应保持不变。临床用碱性药物、大剂量青霉素钠盐、氨苄青霉素等输入人体后短期内会引起酸碱平衡暂时变化,从而掩盖了体内真实的酸碱紊乱,以致造成误诊,因此采血应在病人用药前30min进行。含脂肪乳剂的血标本会严重干扰血气电解质测定,还会影响仪器测定的准确性和损坏仪器。应尽量在输注乳剂之前取血,或在输注完脂肪乳剂12h后,血浆中已不存在乳糜后才能送检,而且血气申请单上必须注明病人使用脂肪乳剂及输注结束时间 [13] 。 2.3 抗凝剂的影响 血气分析所使用的动脉血标本必须抗凝,而肝素钠是唯一可使用的抗凝剂。肝素溶液对血气测定值的影响主要是稀释。稀释对PaCO 2 、HCO 3- 测定值影响最大。正常动脉血当稀释5%时,PaCO 2下降0.27kPa(-2.0mmHg),碳酸氢根浓度、BE下降1.2mmol/L,PaO2 上升0.53kPa(+4.0mmHg),pH无影响。美国B-D公司经过一系列测定,发现肝素溶液稀释的2ml血样中因有0.25ml的死腔肝素(塑料注射器),其稀释会使PaCO 2 由40mmHg降低至35mmHg。而其公司生产的预设型动脉血气针内含100单位固体肝素锂,无液体稀释效应,结果可靠。采用肝素钠抗凝时,应将肝素钠与血液样本的比例控制在1∶20以下,即5ml和2ml注射器取血量分别应3.3ml和2ml,否则误差极大 [13] 。 2.4 标本的存放 血液中含有可呼吸的活性细胞(白细胞、网织红细胞),它们在取样后仍然继续消耗氧气产生CO 2 ,一般动脉血样本体外37℃保存,每10min PaCO 2 增加1mmHg,pH减少0.01 [3] 。因此抽血后应立即送检,一般从标本采集到完成测定,时间不超过30min。遇特殊情况不能立即测定时,应放在含有冰水的容器中,但保存时间不超过2h。测定前要在室温下放置数分钟,因为温度每下降1℃可使pH上升0.014,对PaO2 、PaCO2 也有影响[12] 。 2.5 患者体温的影响 温度会影响pH、PaCO2 、PaO 2 的测定值。患者体温高于37℃,每增加1℃,PaO 2 将增加7.2%,PaO 2 增加4.4%,pH降低0.015 体温低于37℃时,对pH和PaCO2 影响不明显,而对PaO 2 影响较显著。体温每降低1℃,PaO2 将降低7.2% [14] 。因此,必须在化验单上注明患者的实际体温,实验室测定时即可应用仪器中的“温度校正”按钮,校正到患者的实际温度,保证测定结果的准确性。 医用血气分析仪标准气体部:12年专业血气生产经验,可为各种型号的血气分析仪提供标准气体。 康仁-348血气分析仪标准气 丹麦雷度ABL-700血气分析仪标准气 拜尔(Bayer) 系列血气分析仪 康仁 248 348  系列血气分析仪 美国 NOVA 公司 系列血气分析仪 美国 IL 公司 系列血气分析仪 丹麦 ABL 公司 系列血气分析仪 瑞士 AVL 公司 系列血气分析仪 德国 premier X 系列血气分析仪 其它类型血气分析仪

  • 【分享】蛋白测定(FIB)标准操作规程(SOP)

    原理:在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入试剂。加入试剂后,采用波长为660nm的光照射样本。凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定,可以做出凝血曲线,通过PercentageDetection Method方法求得凝血时间。一、仪器:(一)型号:Sysmex CA—1500自动血液凝血分析仪(二)分析和计算参数:1.处理量:约120个测试/小时2.所需样本量:10μl 3.检验时间:在最长检验时间之内测出结果,典型最长检验时间:100秒4.重复性:CV≤4%5. 计算参数:纤维蛋白原浓度(Fbg)二、试剂及配套品:(一)试剂:1. 凝血酶试剂(Thrombin Reagent)(1)商标:德灵(DADE BEHRING)(2)包装规格:Pack for 10×1ml(3)代码:B4233 G25 E0533 (961) W(4)成分:牛凝血酶冻干粉(lyophilized preparation of bovine thrombin)(近似100 NIH units/ml)

  • 雪迪龙3080烟气分析仪性能等方面问题

    如题,有谁用过雪迪龙的3080烟气分析仪吗?我们单位想选购一台烟气分析仪,目前比较中意这款,二氧化硫量程分为0-500和0-5000两种,这款分析仪测高量程的准确度好不好?在抗CO和高湿度干扰方面性能怎么样?有用过的大大,请分享使用体验,谢谢!

  • TOC分析仪在工业凝结水回收中的应用

    [size=17px]在工业生产中,蒸汽作为一种热能载体被广泛应用于发电、石油、化工、印染、造纸、轻纺、酿造、橡胶、陶瓷等工业领域中。尤其是化学工厂和石化工厂这些能耗很大企业,在它们的生产过程中,需要大量的蒸汽传输能量。蒸汽被用来裂解、加热和处理碳氢化合物以及为了进一步处理,制备成其它化合物。大量的工业用水和以煤炭为主的能源被使用来产生蒸汽, 而蒸汽释放出部分热能后生成的凝结水往往因为受到不同程度的污染被直接排放,造成大量的热能和水资源浪费。[/size][size=17px]源水通过净化工艺、除盐生产出蒸汽需要很多工序,耗费大量的人力和金钱。使用完的凝结水有的很干净,还可以继续使用;有的比较干净,需要进一步纯化;有的凝结水已经被污染,要排放到污水厂。[/size][size=17px]净化使用过的回流凝结水要比从原水生产出纯净水经济很多,特别是在我国华北、西北等水资源匮乏地区,尽可能提高凝结水的再循环使用,有非常重大而且现实的意义。[/size][size=17px]2 国内外凝结水回收系统的发展现状[/size][size=17px]据不完全统计,全国作为工业热力蒸汽锅炉有60多万台,蒸发量已达到200多万吨/小时。其耗煤量约占全国煤产量的三分之一以上,辅助设备的耗电力量约占全国电产量的十分之一。因此,节煤、节电及节水的潜力和前景极为巨大。目前我国绝大部分企业的凝结水和余热没有进行回收。仅仅是一次性使用,用完后直接排放到污水厂。实行凝结水回收的很多企业中,其回收系统也还没有达到充分利用热能、节水和环境保护的要求。[/size][size=17px]以石化行业为例,目前我国石化行业凝结水回收率的平均水平为40%左右,而国际平均水平为70%以上。另一方面,国内各石化企业的凝结水回收率相差较大:高的在70%以上,低的回收率低。[/size][size=17px]而在国外,这种凝结水回收设施已经是非常成熟了。建造一个适用于化学工厂和石化工厂的锅炉/蒸汽系统的成本与建造一个专门生成蒸汽供许多发电单位使用的工厂的成本相差不大。因此,世界上出现了许多蒸汽/发电,多种经营的工厂;蒸汽/电力公司与用户单位联合起来,把供气-使用-回收-再利用做成相互服务和监督一条龙的优化体系,的满足供应商和用户之间的需求和利益。此外,多余的电可以卖给公共电网或其它的电力公司/用户。[/size][size=17px]化学/石化工厂和电力/蒸汽公司都是要计算经济效益的。他们的联合系统是建立在独立的优化、监督和核算的基础上。电力公司关注的是化学和石化工厂使用后回流蒸汽的纯度,化学和石化工厂关注是蒸汽供应的纯度,以及自己生产工艺中,材料、润滑油的泄露。[/size][size=17px]这种相互的质量检查是非常严格的,不然就会影响化学和石化工厂的产品质量。蒸汽污染的程度要求有机污染物检出限是10PPB。这些污染的来源主要是石油产品,蒸汽循环过程中机械泵的机械油渗漏,以及换热器的泄露等。[/size][size=17px]相关资料:[url=https://www.hach.com.cn/product-categories/codfenxiyi]哈希(HACH)中国官网:哈希COD在线分析仪_水质COD分析/检测仪[/url][/size]

  • 凝聚胺法交叉配血标准操作规程

    1. 原理 凝聚胺(polymatching)法首先利用低离子介质降低溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,促进血清(浆)中的抗体与红细胞相应抗原结合,再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚胺溶液,中和红细胞表面的负电荷,缩短细胞间距,形成可逆的非特异性聚集,并使IgG型抗体直接凝集红细胞。加入中和液后,仅由凝聚胺引起的非特异性聚集,会因电荷中和而分散,而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。2. 标本采集:2.1 标本种类:抽取静脉血3-4ml待凝固后分离血清,将细胞配成5%盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。2.2 标本要求:抗凝和干燥管均可,如用抗凝血主张用EDTAK2(mg/dz)抗凝标本应无溶血,切标签齐全。3. 标本储存:急诊标本30分钟内完成操作,标本应至4℃冰箱保存7天。4. 标本运输:室温运输。5. 标本拒收标准:细菌污染。溶血标本,标签不齐全不能作测定。6. 试剂:6.1 试剂名称:凝聚胺试剂(polymatching)6.2 试剂生产厂家:(台资)珠海贝索生物技术有限公司。6.3 试剂组成:试剂1. 低离子介质(LowLonic Medium,LIM).试剂打开使用后,可置室温贮存,未开封者2-10度贮存,有效期为2年。试剂2. 凝聚胺溶液(PolybreneSolution).贮存及有效期同上。试剂3. 重悬液(ResuspendingSolution).贮存及有效期同上。试剂4. 8.5%生理盐水。7. 仪器:7.1 血型血清索离心机:XTL-4.7 上海离心机械研究所7.2 离心机:上海手术器械厂7.3 电热恒温水箱:北京长源实验设备厂7.4 显微镜:OLYMPUS(日本)8. 操作步骤及结果判断:8.1 供受者红细胞用生理盐水配成3-5%的细胞悬液。加样量均为:血清2滴,红细胞悬液1滴。主管:受血者血清+供者红细胞悬液;次管:受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳对照管另设)。8.2 各管分别加低离子介质0.6ml混匀置室温1分钟。加凝聚胺溶液2滴,混匀,置室温15秒。8.3 1000g(3000rpm),离心18秒,弃上清液,管底保留约2滴液体。轻摇试管,观察是否形成凝块。如未形成凝块,则重做前面试验。8.4 加入2滴重悬液,轻轻混合,肉眼或显微镜下观察结果。8.5 凝块在1分钟内分散,试验结果为阴性,供受者血液配合;反之,如依照为不同强度的凝块,试验结果判为阳性,供受者血液不配合。实验结果必须在3分钟内判读。9. 操作性能: 快速简便,特异性强,灵敏度较高,重复性好。10. 超出范围结果处理:10.1 细胞自凝: 在冬天气温较低时,某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性;遇此现象可用37℃-40℃生理盐水洗涤红细胞并置37℃水溶中轻轻摇动,观察结果。10.2 若病人血清(血浆)含有肝素,如洗肾患者能影响配血,须多加4-6滴polybrene溶液以中和肝素。10.3 红细胞悬液为5%为宜,过浓或过淡可使抗原抗体比例不适当,反应不明显易误判。10.4 各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集,部分溶血时,可溶性血型物质中和了相应的抗体。11. 方法局限性:11.1 试管,滴管吸头和玻片必须清洁干燥,防止溶血。11.2 操作方法应按规定,先加血清,然后再加红细胞悬液,以便容易核实是否漏加血清。11.3 离心时间不宜过长或过短,速度不宜过快或过慢,以防假阳性或假阴性结果。11.4 观察时应注意红细胞呈特异性凝集,继发性凝固及线状排列的区别。

  • 【分享】醋酸甲萘氢醌的荧光光谱分析法及其应用

    醋酸甲萘氢醍(Menadiol Acetate,MA)是一种维生素类药物,其片剂中含维生素Kt.这类药物的主要作用是参与肝脏合成Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ 、X等凝血因子,用于梗阻性黄疽及胆瘘、慢性腹泻、早产儿、新生儿出血以及长期大量应用香豆素类和水杨酸类药物所致的凝血酶原过低引起的出血,亦可预防长期应用广谱抗生素和磺胺类药物所引起的继发性维生素K缺乏症“一.测定MA的主要方法有紫外可见分光光度法等 .利用其自身的荧光性质进行荧光分析的文献尚未见报道,本文系统地研究了不同介质条件下MA的荧光性质,结果表明 环糊精( CD)和溴化十六烷基三甲铵(CTMAB)虽然都有增敏作用,但相对于 CD来说,CTMAB不仅有增稳作用,而且其增敏效果也比 CD好.该法与药典记载的方法相比,该法简便、快速.

  • 化学计量学将催生“傻瓜”式分析仪器乎?——未来科学仪器将走向何方?

    化学计量学将催生“傻瓜”式分析仪器乎?——未来科学仪器将走向何方?

    进入20世纪之后,分析化学已经发展成为一门拥有众多仪器分支的现代分析化学学科和化学信息学科。伴随着大量现代分析仪器出现带来的“数据爆炸时代”,化学计量学得以快速发展并已成为现代分析化学中非常活跃的研究领域。那么化学计量学在分析仪器的研制方面有什么样的“指导思想”及指导作用?能否指引分析仪器研制领域的“蹊径”?带着这些疑问,仪器信息网编辑采访了化学传感器专业委员会主任委员、湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室原主任吴海龙教授。采访中,吴海龙教授介绍,化学计量学注重分析策略的研究,是分析化学中的“高级医生”。我们希望通过化学计量学研究,设计出“傻瓜”式实用分析仪器,让用户得到最大的便利”。您认为,化学计量学在分析仪器研制方面有什么样的指导意义呢?——————————————————相关话题————————————————————化学计量学能给分析仪器带来什么?——访湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室吴海龙教授 http://www.instrument.com.cn/news/20111216/071983.shtml

  • 高科技仪器让你脱离苦恼

    随着科学技术的发展,检验技术日新月异,各种检验仪器不断进入临床检验科。由于各医院病床数、门诊量、资金以及检验工作人员素质的不同,在仪器购置和管理方面也会有所不同,特别是我国加入WTO后,医疗市场对外开放,医疗服务行业竞争激烈,检验科在仪器配置及管理中如何讲究效益,就成为值得考虑的问题。现在我们将本科室在仪器购置及管理方面的一些作法和体会简介如下:  一、仪器的购置1、收集信息:根据医院床位数、门诊量/日、临床科室的设置和各专科病人数、标本量/日以及原有仪器配置,并考虑3-5年后科室的业务发展,结合经济实力,初选出3个品牌HPV分型仪器,作全面比较:主要在HPV分型仪器的性能特点,如准确性、精密度、检测速度、条码系统、自动检测功能、自动重测功能、各种提示功能、冷藏试剂室、急诊标本插入、24小时待机状态、配套的中文软件系统、校标液、质控物、试剂以及国产试剂能否上机应用、价格与性能比、厂家的售后服务、代理商的实力和信誉等方面进行比较。  2、实地考察:通过以上资料的比较,对相关液相芯片仪器有了理性认识。然后到有同型号仪器的医院进行考察,主要是观看实物的液相芯片,询问仪器的使用情况、仪器的性能、存在的问题及注意事项。最后通过综合评价,从三个品牌种选择一个适合本科室的仪器推荐给医院设备科。如1998年我科准备购置一台全自动生化分析仪,当时我科每日生化标本约30份,;平均每日约进行300个测试。在众多的仪器中,我们初步选出三个著名品牌同档次的仪器进行比较。三个品牌的仪器各有所长,我们则着重考虑仪器是否24小时处于待机状态;急诊标本是否可以随到随做,优先出结果;仪器、试剂、校准物、质控物是否配套;条件成熟的情况下,国产试剂能否替代原装配套试剂。这样,我们认为贝克曼CX4或CX5更适合我科。而在此之前,我科已购置了一台贝克曼EL-ISE离子分析仪。考虑到仪器的价格和不浪费原有仪器,最后购置了贝克曼CX-4CE全自动生化分析仪。又如我科购置凝血仪时,在以上原则的基础上,更注重仪器的价格性能比,在考虑社会效益的同时,也重视投资回报,根据科室每日凝血四项测定标本很少超过10个的情况,最后放弃了全自动凝血仪,而选择了CYFRA21-1半自动凝血仪。在购置电化学发光免疫分析仪时也存在类似情况,最后在罗氏CYFRA21-1分析仪和CA242分析仪中选择了后者。选择仪器时还应结合临床科室的设置,仪器的价格和是否增加病人的额外负担等因素综合考虑。如血球计数仪不论时三分群还是五分类,其白血球分类结果均为“初筛”,而五分类血球计数仪的价格是三分群的二倍甚至更高,其消耗试剂的成本也较三分群血球计数仪高出许多。显而易见,在没有血液病专科的中小医院选择三分群的血球计数仪是较为合理的。6、仪器保养落实到人:我科检验人员虽然都是经过上机前操作培训,能够熟练使用仪器,但由于需要轮换,而且要值夜和外出体检,常有不在班上的时候。针对上述情况,我们根据人员特长和相对稳定等因素,将仪器的保养落实到人,实行定人负责CA242仪器的较大保养,在科主任的指导下调校仪器和质量控制,保证仪器正常运作。总之,通过以上管理,减轻了工作人员的劳动强度,提高了工作效率,比较充分地发挥了仪器的社会效益和经济效益。

  • 【原创】康仁348血气分析仪详细资料

    康仁348血气分析仪详细参数 产品特点:自动化免保养,独有Ready SensorTM(待发电极),低成本, 产品介绍: 产品参数: 分析时间 少于50秒,操作系统汉化软件,中文菜单 测量参数范围: 酸硷度pH: 6.001-8.000 pH 氢离子H+ : 10.0-997.70 nmol/L 二氧化碳分压pCO2: 5-250 mmHg 0.67-33.33 kPa 钠离子Na+: 80-200 mmol/L 钾离子K+: 0.50-9.99 mmol/L *钙离子Ca2+: 0.5-50 mmol/L *氯离子Cl-: 40-160 mmol/L 血细胞比容Hct: 12-75 % (*注意:请选择Ca2+或Cl-) 计算参数范围 实际碳酸氢根HCO3-act: 0-60 mmol/L 标准碳酸氢根HCO3-std: 0-60 mmol/L 二氧化碳总量ctCO2: 0-60 mmol/L 组织间液剩余碱BE(ecf): ±29.9 mmol/L 血浆剩余碱BE(B): ±29.9 mmol/L 钙离子值Ca++(7.4): 0.2-5.0 mmol/L 阳离子间隙Anion Gap: ±60.0 mmol/L 计算血氧参数范围 氧饱和度O2SAT: 0-100 % 氧总量ctO2: 0-40 mL/dL 肺泡动脉氧分压差: PO2(A-a) 0-1 0.00-99.86 kPa 动脉肺泡氧分压的比值: PO2(a/A) 0-1 氧分压与吸氧浓度之比: 0-5 PO2/FIO2 全血红蛋白ctHb: 2-25 g/dL 20-250 g/dL 1.2-15.5 mmol/L 检测透析液 可测量碳酸氢盐或乙酸盐透析液中的钠离子值,钾离子值和钙离子值。 样本 标准抗凝剂抗凝的全血样本血浆/血液(只限于电解质测定) 样本量 针筒 : 95μL 毛细管 : 70μL 全自动分样: 40μL 连网功能: 两个RS232接口 仪器体积与重量 宽:386mm 长 :380mm :高:371mm 重: 9.1kg

  • 【分享】紫外分析仪的分类及用途介绍

    紫外分析仪按照用途不同可以分为三大类,有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列,他们之间有区别,也有不同的用途。 三用紫外分析仪具有消耗功率小、热量低、可以长时间连续使用等特征,三用紫外分析仪可应用在科学实验工作、药物生产和研究、染料涂料橡胶、石油等化学行业、纺织化学纤维、粮油、蔬菜、食品部门、地质、考古等行业。 暗箱式紫外分析仪是提供白光和紫外光照射的装置,具有重量轻、灯管启辉快、无频闪的优点。暗箱式紫外分析仪主要用于蛋白质电泳观察和照相。 可照相紫外分析仪是提供紫外光照射的装置,该仪器选用电子镇流器,具有重量轻、灯管启辉快、无频闪的特点。可照相紫外分析仪可用于核酸电泳凝胶样品的观察、照相等方面。

  • TOC总有机碳分析仪应用领域

    TOC总有机碳分析仪应用领域TOC分析仪常应用于制YY水(纯化水、注射用水)的在线监测和实验室测试,以及清洁验证;环保测试、电子行业、食品行业等。水中有机物的污染情况被越来越重视。TOC的检测必不可少,各种类型的TOC分析仪器在这些部门也得到了比较广泛的应用。TOC分析仪/TOC测定仪由两部分组成,高温消解装置,分析装置1、发电厂核和化石燃料。冷凝液/循环流、冷却水、锅炉供水和废水中的TOC。为减少排放到大气的 CO2 量,已经开发出CO2处理技术,例如:从化石燃料发电厂排放的CO2用乙醇胺溶液吸收。2、卫生防疫和水质监测目前,卫生防疫和水质监测部门越来越重视水中有机物的污染情况。TOC的检测必不可少,各种类型的TOC分析仪在这些部门也得到了比较广泛的应用。3、化学和石油工业检查冷却水与设备冷凝回流物中有机溢出。无机化学药品如H2SO4、H2O2的产品纯度。废水中的有机负载与产品损失。4、其他应用如食品与饮料工业中检查原水质量及中水纯度。检查输入和再循环回路中的水:防止成膜(filming)或起雾(hazing)。快速检查产品损失和过程泄露。检测微生物的生长。测定供水中的有机酸,避免设备腐蚀。监控冷凝水中的油,防止损坏热交换器。锅炉供水 — TOC值可用于监控油和脂肪的水平。之所以重要,因为油和脂肪可导致泡沫或夹带并变成腐蚀品的粘着核,如:铁锈,从而损坏锅炉。TOC的监控也防止水垢的形成。测定清洁剂中的油污染。测定水泥产品中的 CaCO3 。因为水泥是碱,含有大量的Ca,慢慢与大气中的CO2反应形成 CaCO3,导致水泥变质和影响其耐久性。 使用TOC分析仪和固体进样装置可进行测定。

  • 【讨论】做仪器分析的分析员要不要学电路?

    看了毛毛的帖子,想和大家讨论一下,做仪器分析的人员要不要学电路? 以前的化学工作多数都是手工操作,分析人员都是学化学出身。现在的分析仪器越来越多,化学分析工作智能化,自动化程度越来越高,高校也开设有仪器分析这门课程,各位版友对仪器分析人员要不要学电路有何看法,欢迎讨论。

  • 【分享】精微高博高性能比表面及孔径分析仪荣获“2010科学仪器优秀新产品”奖

    精微高博高性能比表面及孔径分析仪荣获“2010科学仪器优秀新产品”奖2011年4月26日,由中国仪器仪表行业协会、中国仪器仪表学会分析仪器分会、仪器信息网(www.instrument.com.cn)联合主办,中国分析测试协会协办的中国科学仪器行业目前最高级别峰会——“2011中国科学仪器发展年会(ACCSI 2011)” 在北京京仪大酒店隆重召开。年会主办方在大会现场对“2010中国科学仪器优秀新产品”举行了隆重的颁奖仪式。 “2010年科学仪器优秀新产品”评选活动于2010年3月份开始筹备,截止到2011年2月28日,共有234家国内外仪器厂申报了497台2010年度上市的仪器新品。经仪器信息网编辑初审、2011中国科学仪器发展年会新品组委会初评,在所有申报的仪器中仅有四分之一进入了入围名单。共有60位业内资深专家、20位资深用户参与了此次科学优秀新产品的评选,最终仅有28台仪器获得了“2010科学仪器优秀新产品”奖。其中,2010年度申报的33台物性测试仪器及设备中,仅有12台入围。北京粉体协会理事长胡荣泽研究员会上揭晓了物性测试和光学仪器类“2010科学仪器优秀新产品”获奖名单。入围的12台仪器中,仅有三家仪器新品榜上有名,与精微高博新品一道获此项殊荣的另外两台仪器都出自国际知名的跨国公司(如下)。精微高博自主创新的高性能比表面及孔径分析仪的脱颖而出,充分显示出JW系列分析仪器制造水平达到了国内领先水平,JW系列高性能比表面及孔径分析仪得到国内外客户的普遍认可。物性测试和光学仪器类“2010科学仪器优秀新产品”获奖名单 file:///C:/Program%20Files/Tencent/QQ/Users/498819089/Image/K83)}F12$W

  • 煤气在线分析仪的工作原理图

    监测目的:冶炼产生的烟气中含CO,CO2,N2,O2等成分,通过煤气分析仪将烟气中的CO,CO2,O2等含量分析出来,再选择C0含量、02含量合格的烟气进行回收利用,将大大降低冶炼的成本。 分析仪组成:煤气分析仪系统一般由取样单元、气体处理单元、气体分析仪、标校单元、反吹单元、PLC控制单元组成。 工作原理:样气从采样探头进来后分2个支管,一支到放散管路,另一支经过采样泵、过滤器、冷却器,然后分两路分别进人氧气分析仪及红外分析仪,出来的气体经过缓冲罐后进行放散。 红外分析仪用来分析C0、C02的成分。氧分析仪采用磁力机械式原理。 煤气分析仪维护要点:1) 排水:每天检查冷凝器、汽水分离器、排水蠕动泵的状态,确保流量计内无积水,如有积水应查明原因并排除;2) 流量调整:进人分析仪的流量确保在1L/min,放散流量计的流量等于泵的额定流量减去进人分析仪的流量;3) 探头:每2个月对探头不锈钢烧结滤芯进行清洗,并对采集管进行清灰除尘;4) 滤芯、滤纸更换:雾过滤器滤芯应2月更换一次,高分子薄膜过滤器滤纸每周更换一次;5) 标定:每3个月对氧分析仪和红外线分析仪进行一次标定。

  • 【原创大赛】关于JJF1383-2012《便携式血糖分析仪校准规范》可行性的分析

    【原创大赛】关于JJF1383-2012《便携式血糖分析仪校准规范》可行性的分析

    关于JJF1383-2012《便携式血糖分析仪校准规范》可行性的分析 便携式血糖分析仪简称血糖仪,主要用于糖尿病患者对自身血糖值的监测,目前部分医疗机构也将血糖仪用于临床诊断。按照卫生局的要求用于临床诊断的血糖仪需每半年校准一次,但对于血糖仪国家却一直缺少相应的检定规程或校准规范。直到2012年才颁布了《便携式血糖分析仪校准规范》,并于2013年3月开始实施。但该规范的可行性却值得思考。 一、概念问题 血糖仪按检测技术可以分为电化学法和光反射技术两大类,根据《规范》第4项概述所描述内容,我们可以认为该《规范》适用于这两类血糖仪。但概述的最后一句话却存在问题,《规范》将血糖仪定性为:主要用于新鲜毛细血管全血的葡萄糖含量的快速测量,也可用于静脉全血、血清(浆)的葡萄糖含量的快速测量。首先该句话中最明显的错误在于也可用于静脉全血、血清(浆)的葡萄糖含量的快速测量。血糖仪应该是用于测量毛细血管全血的葡萄糖含量的,虽然也可用于测量静脉全血的葡萄糖含量,但会存在着较大误差。因为血糖仪主要用于患者自我监控,采血时采集的是指端的血,属于毛细血管全血。毛细血管全血的血糖值相对于静脉全血的血糖值要偏高10%-20%,为了真实的体现人体的血糖含量生产厂家多会对该数值进行修正。所以血糖仪在测量静脉全血血糖值时会存在较大的误差,必须进行修正才能进行测量。而对血清(浆)的葡萄糖含量的快速测量,应该仅仅是适用于光反射法的血糖仪,而不适用于电化学法的血糖仪,这从血糖仪的原理上看也是显而易见的。 最早的光反射法血糖仪也称为水洗式血糖仪,该种仪器使用时先将血液涂抹在试纸条上,待反应完成后,再将试纸条上的血液清洗干净后进行测量,此时的试纸条多数变色为蓝色。现在这种血糖仪的试纸条上多有一层网膜用于过滤血液的颜色,免去了清洗步骤,使用更加方便。可见这种血糖仪是利用试纸与葡萄糖反应后颜色发生更改变进行测量的,由于要将血液的颜色清除,所以基本不受血液中其他物质的干扰,所以可以用于血清(浆)的葡萄糖含量的测量。而电化学法血糖仪的工作原理是建立在电化学葡萄糖传感器的基础上的,是电化学酶法测定葡萄糖,其反应过程如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307010733_448531_1638093_3.jpg在检测血液时,血液中的葡萄糖在葡萄糖氧化(脱氢)酶的催化下发生反应释放出电子, 改变试纸条电阻值,达到改变检测电路中电流强弱的效果,最终实现对人体血液中葡萄糖含量的检测。血糖仪主要用于人体全血血糖值的测量,全血中包含血浆,红细胞,白细胞,血小板,血浆是水,糖,脂肪,蛋白质,钾盐和钙盐的混合物。由于血糖仪使用时不会对血液进行任何前处理,所以血液中的所有成分均会对试纸条电阻值产生一定的影响。所以血糖仪在设计制造时,一般都是使用全血来绘制仪器的测量曲线的。所以很明显,使用全血绘制出的曲线是不适用于血清(浆)葡萄糖含量的测量的,如果使用会产生极大误差。该情况通过使用GB/T19634-2005《体外诊断检验系统自测用血糖监测系统通用技术条件》所推荐的回收试验法可以轻松验证。 二、测量标准 《规范》第6.2.1条规定需要使用血糖标准物质,但是截至目前由于电化学法血糖仪仅适用于全血血糖值的测量,所以尚无专用于血糖仪的标准物质,而通过查阅《规范》附录C发现,这里所说的血糖标准物质实际上是冻干粉血清标准物质,该标准物质实际是用于校准用于血糖测量的生化分析仪的标准物质,由于是血清标准物质所以不适用于电化学法血糖仪的检测。 三、建议使用的校准方法 在对血糖仪进行校准时,我建议还是应该将仪器部分和试纸部分分开检测,因为根据GB/T19634-2005《体外诊断检验系统自测用血糖监测系统通用技术条件》的要求,我们可以推断试纸还可能存在着15%的批间差,而血糖仪的试纸误差最大仅为20%,如果仅仅整体判定,血糖仪容易受试纸误差的影响而出现误判。这里我仅简单介绍一下血糖仪整体性能的校准。 在校准中我建议还是应该参照GB/T19634-2005《体外诊断检验系统自测用血糖监测系统通用技术条件》规定的方法,使用人体全血,或模式生物(如:兔子、小白鼠等)的全血,采用比对法和回收试验法进行校准。开始校准前采集全血,加入制造厂商建议的抗凝剂(如:肝素锂、肝素钠),静置12小时,此时该血样的血糖值将下降到2mmol/L附近。此时分别用血糖仪和生化分析仪测量该血样,记录数据。之后向该血样加入葡萄糖溶液,调整血样的血糖值到预期浓度后,再用血糖仪和生化分析仪对血样进行测量。上述步骤重复数次,直到测得值涵盖低值、中值、高值,中值应适当增加测量点。然后将使用血糖仪测量的一组数根据制造商提供的换算公式计算得到的静脉血果与生化分析仪测量的结果进行比较,以生化分析仪测得的结果作为参考值,计算误差。 四、结束语 计量检测应该是一项十分科学、严谨的工作,而我们的校准规范却出现了如此明显的问题不能不让我们深思。只能说在规范的起草过程中,我们的技术人员过于浮躁,缺少了试验的严谨性,如果在起草的过程中多做了几组试验,多征求了几个知名生产

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