双调节器

一、实验目的该方案旨在开发一种基于导电性调节的双极电化学发光（The bipolar electrode based ECL，BPE-ECL）传感平台，用于无指示剂的均相生物分析。该平台通过导电性生物传感技术与ECL报告系统的结合，实现了在无需外源电活性指示剂的情况下进行目标检测。研究以miRNA-21的检测为示范，探索该方案的可行性和应用前景。二、实验使用的仪器设备和耗材试剂1. 仪器设备超微弱发光分析仪：BPCL-2，结合光电倍增管（PMT）操作电压为-800V，用于测量ECL发光强度。电化学工作站：用于施加电位。电导率仪：用于测量溶液的电导率。电泳仪：用于聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），验证核酸杂交链式反应（HCR）。生物分子成像仪：用于电泳结果成像。2. 耗材试剂聚二甲基硅氧烷（PDMS）：用于制作传感和报告池。Ru(bpy)32+和TPrA：作为ECL检测体系的核心试剂。氯金酸（HAuCl4）：用于电极金属化处理。合成核酸：由Sangon Biotech提供，包括探针DNA、H1、H2及目标miRNA-21等。人乳腺癌细胞：用于miRNA-21的实际应用检测。超纯水：18.2 MΩcm，作为所有实验的溶剂。三、实验过程1. BPE传感器的制作(1). ITO玻璃板的准备：从供应商处采购电阻小于6Ω/平方的ITO玻璃板，并在其上制作导电BPE，确保传感池包含BPE的阴极和驱动电位的阳极，而报告池包含BPE的阳极和驱动电位的阴极。(2). 电沉积金：为了提高导电性，分别在BPE的阴极和驱动电位的阴极上进行金电沉积。2. 杂交链式反应（HCR）的进行(1). 反应混合：在超纯水中混合探针DNA、H1和H2，浓度分别为0.5 μM、5 μM和5 μM。(2). 目标miRNA-21的添加：将不同浓度的miRNA-21加入混合物中，37°C孵育2小时以进行HCR反应。3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）验证：(1). 电泳条件：在TBE缓冲液（1×）中，恒定电压80V，室温下进行2小时电泳。(2). 成像分析：使用生物分子成像仪拍摄凝胶，以验证探针DNA、H1和H2的杂交情况。4. BPE-ECL传感检测(1). 准备工作溶液：在报告池中加入200μL含有5mM Ru(bpy)32+和5mM TPrA的PBS缓冲液（0.1 M，pH 7.0），在传感池中加入HCR孵育后的样品。(2). ECL测量：使用循环伏安法，电位范围为1.0-4.5V，扫描速率为100 mV/s，进行ECL测量。每个样品测量三次，计算标准偏差。四、实验结果与讨论1. HCR反应和导电性变化的验证(1). PAGE分析（图1A）：短核酸（探针、H1、H2）在低分子量位置显示荧光带，而miRNA-21诱导的核酸聚合物在高分子量位置显示。这验证了目标miRNA-21触发了探针、H1和H2的杂交反应。(2). 导电性测量（图1B）：混合短核酸后溶液的导电性显著增加，而加入miRNA-21后，导电性显著下降。这表明生成的长核酸聚合物导电性较差。(3). ECL测量（图1C）：ECL强度在短核酸（22 bp）溶液中显著高于长核酸（1250 bp），进一步验证了导电性对BPE-ECL系统的重要影响。(4). ECL响应的验证（图1D）：相较于无miRNA-21存在的情况（曲线g），miRNA-21存在时ECL响应显著降低（曲线h），因为miRNA-21诱导的HCR生成了导电性较差的核酸聚合物。图1. (A) PAGE分析: (a-c通道) 探针、H1、H2；(d通道) H1 + H2；(e通道) 探针 + H1 + H2；(f通道) 探针 + H1 + H2 + miRNA-21。(B) 对应PAGE相同条件下的导电性比较。(C) 5 μM短链（22 bp）和长链（1250 bp）核酸溶液的ECL响应比较。(D) BPE-ECL生物测定在无miRNA-21 (g) 和有1 pM miRNA-21 (h) 情况下的ECL响应。2. 分析条件的优化(1). 探针浓度（图2A）：ECL强度差值（ΔECL）随着探针浓度的增加而增加，在浓度超过0.5 μM后达到平台期。因此，选用0.5 μM作为最佳探针浓度。(2). H1/H2浓度（图2B）：随着H1/H2浓度的增加，ΔECL响应持续增强，在5 μM时达到饱和，表明5 μM为最佳H1/H2浓度。(3). 温度（图2C）：ΔECL响应随着温度升高至37°C后增加，随后略有下降，表明最佳反应温度为37°C。(4). 反应时间（图2D）：ΔECL响应随HCR反应时间的延长而增加，在120分钟后达到最大，选择120分钟作为最佳反应时间。图2. (A) 探针浓度，(B) H1/H2浓度（[H1]:[H2] = 1:1），(C) 温度，和 (D)反应时间对ΔECL响应的影响。所有实验中的miRNA-21浓度均为1 pM。3. 传感系统的性能评估(1). 检测限与线性范围（图3）：不同浓度miRNA-21的ECL响应如图3A所示。ECL强度与miRNA-21浓度的对数呈良好线性关系（图3B），线性范围为1 fM至10 nM，检测限为0.33 fM。图3. (A) 不同浓度miRNA-21的ECL响应: (a&minus i) 空白, 1 fM, 10 fM, 100 fM, 1 pM, 10 pM, 100 pM, 1 nM, 10 nM。(B) ECL强度与miRNA-21对数浓度之间的线性关系。(2). 选择性（图4A）：高结构类似物（miRNA-122、miRNA-141、miRNA-155）的检测结果表明，BPE-ECL传感系统对miRNA-21具有良好的特异性。(3). 稳定性和重复性（图4B, 4C）：ECL信号在八次重复测量中稳定，RSD为2.56%，三种不同浓度miRNA-21的RSD分别为3.2%、2.4%和1.4%，表明系统具有良好的稳定性和重复性。(4). 实际应用（图4D）：检测不同数量MCF-7细胞裂解液中的miRNA-21，ECL信号随细胞数量增加而下降，验证了该传感平台在临床样品检测中的应用潜力。图4. (A) 不同miRNA类似物的ECL响应，miRNA-122、miRNA-141和miRNA-155浓度为10 pM，miRNA-21浓度为1 pM。 (B) BPE-ECL生物传感平台的稳定性。 (C) BPE-ECL传感器对不同浓度miRNA-21响应的重现性。 (D) 不同数量MCF-7细胞裂解液的ECL响应。五、结论本方案提出了一种基于导电性调节的BPE-ECL生物传感平台，该平台利用目标miRNA-21诱导的HCR反应生成长链核酸聚合物，导致传感池导电性降低，进而减少报告池的ECL信号输出。该平台具备传统BPE-ECL传感器的优点，通过物理分离传感和报告反应有效避免了干扰，且无需外源电活性指示剂。该方案简单、灵敏、快速，并在实际样品检测中表现出良好的应用前景。未来，该方案有望进一步应用于包括DNA、小分子、蛋白质、细胞和细菌等多种目标的定量和定性检测。*因学识有限，难免有所疏漏和谬误，恳请批评指正*资料出处：免责声明:1.本文所有内容仅供行业学习交流，不构成任何建议，无商业用途。2.我们尊重原创和版权，如有疏忽误引用您的版权内容，请及时联系，我们将在第一时间侵删处理！

据中国信托业协会7月21日消息，发挥信托制度功能，服务经济与社会发展，是信托业的使命。在“十四五”开局之年，信托业将秉持全面社会责任原则，继往开来，推进信托文化建设，加强投资者教育，巩固脱贫攻坚成果助力乡村振兴，践行新发展理念，服务中国特色社会主义新时代。　　完整、准确、全面贯彻新发展理念，是确保“十四五”时期我国发展开好局，实现高质量发展目标的根本保证。信托业以其特有的功能定位和制度优势，将发挥举足轻重的作用。　　践行协调发展，探索服务信托。我国发展过程中的不平衡现象是一个长期存在的问题，突出表现在区域之间、城乡之间、不同职业群体之间，及经济和社会、物质文明和精神文明等方面关系。服务信托可以补充社会保障体系，满足人们基本生活需要，发挥社会公平调节器，维护社会稳定；可以整合公共服务，降低公共服务机构的管理成本，缓解社会公共服务供给压力。在社会生活领域，服务信托能够发挥子女教育、养老抚幼、关爱特殊群体的作用；培育和传承优良家风，塑造平等互助、诚实信用的社会风尚，建设社会精神文明。　　践行共享发展，助力共同富裕。“十四五”规划纲要提出，要“发挥慈善等第三次分配作用，改善收入和财富分配格局”。公益与慈善信托是我国慈善事业的重要组成部分，是实现第三次分配的重要方式。信托业可以发挥信托的权利转换功能和信托产品设计灵活性的优势，回应人民对美好生活新的多样化需求，增强人民在生产生活中的获得感、幸福感、安全感。　　践行创新发展，服务科技创新。知识产权综合运用是科技强国战略的重要组成部分。在国家立法保障、产业政策支持的背景下，信托公司可以综合运用股权、债权、投贷联动、产业基金、知识产权信托等方式开展知识产权投融资业务。探索与融资担保公司合作，开发适合知识产权的信用担保产品，支持小微企业知识产权融资。　　践行绿色发展，助力双碳目标。开展绿色信托业务是信托业转型发展的重要方向。经过多年深入的理论研究与大量的业务实践，信托业在绿色信托业务领域积累了丰富经验。在实施“十四五”规划的历史背景下，绿色信托业务被赋予了新的使命。信托业要以支持“双碳”目标为抓手，以支持国家发展战略为宗旨，结合自身发展定位和资源禀赋，坚守风险防控底线，将环境、社会责任与治理（ESG)理念纳入业务决策与风险管理全流程，探索差异化绿色信托发展道路。在清洁能源、交通运输、城市环境、绿色建筑等领域，研究开展碳资产抵质押融资信托、碳资产投资信托、碳资产托管服务信托等创新业务模式以及绿色公益慈善信托等特色业务模式。　　新时代的信托行业将是支持实体经济发展、优化公共服务供给、建设第三次分配体系方面不可或缺的组成部分，在我国经济与社会发展的历史进程彰显特有的行业功能和价值。

2023年5月28日至29日，由西藏自治区科学技术厅、上海市科学技术委员会、林芝市人民政府、西藏自治区科学技术协会和中国可再生能源学会综合系统专委会联合主办，西藏自治区能源研究示范中心、林芝市科学技术局、上海新能源科技成果转化与产业促进中心、珠江水利委员会珠江水利科学研究院和珠江流域水土保持监测中心站参与承办的第八届“阳光论坛”暨西藏“双碳”战略机遇于可再生能源综合利用高端研讨会在林芝成功举办。林芝市政府副市长段刚辉、上海市科学技术委员会二级巡视员郑广宏、西藏自治区能源局副局长王云波出席会议并进行了致辞，西藏自治区科学技术厅副厅长扎西达杰主持会议开幕式并发表了讲话。 　　“阳光论坛”由西藏自治区能源研究示范中心与上海新能源科技成果转化与产业促进中心共同发起，至今已成功举办七届。“阳光论坛”针对西藏地区的自然资源优势和上海地区的技术人才优势，注重专业性、交流性、实践性，为沪藏两地新能源科学研究者、产品生产者和应用推广者搭建了涵盖资源、技术、产业、学术等多方面的交流与对接平台。论坛结合西藏科技的实际和西藏清洁能源发展需求，发挥论坛在促进学术交流、科研合作、技术支撑、联合攻关、服务产业、技术示范、成果转化、提供决策、建言献策等方面的突出作用。 　　在全党上下积极开展学习贯彻习近平新时代中国特色社会主义思想主题教育之际，通过第八届“阳光论坛”会议的召开，积聚西藏清洁能源资源优势和内地人才科技资源优势，推动西藏清洁能源科技创新事业的发展，各参会单位坚持不懈用习近平新时代中国特色社会主义思想凝心铸魂，从而切实加强党的思想建设。 　　论坛以“双碳战略机遇与绿色清洁新能源”为主题，通过设定政策解读、院士主旨报告、行业发展对话及专家报告等会议环节，全面解读和探讨西藏“双碳”战略机遇与可再生能源综合利用专业知识。会议邀请了西藏自治区发展和改革委员会、西藏自治区水利厅、西藏自治区气象局、西藏自治区生态环境厅、西藏自治区人民政府国有资产管理委员会、西安交通大学、上海交通大学、西藏大学、国网西藏电力有限公司、华能西藏雅鲁藏布江水电开发投资有限公司、三峡集团西藏能源投资有限公司、大唐西藏能源开发有限公司、中国能源建设集团西北电力建设工程有限公司、西藏昂彼特堡能源科技有限公司等共计84家与会议主题相关的行政主管部门、科研院所、区内外高校及企业代表参会，参会人数突破130人，为历届之最。 　　水利水电规划设计总院新能源研究院副院长姜海和西藏自治区发展和改革委员会能源局清洁能源产业专项组办公室副主任德庆边旦分别就“可再生能源发展政策及未来发展形式”和“西藏清洁能源发展规划及政策”进行了政策解读，分析了国际新能源产业的发展态势及西藏地区新能源产业的发展规划及政策，参会嘉宾及代表对解读内容进行了热烈的提问和探讨。同时，特邀中共第十九届、第二十届中央候补委员、中国科学院院士何雅玲教授作了题为“碳中和愿景下的储能型光热电站规模化发展路径探讨与展望”的主旨报告，分析了储能型光热电站在“碳中和”愿景下的发展路径和未来的发展展望。中国工程院院士多吉老师委托西藏地勘局地热地质大队水工环勘查院副院长周鹏作了题为“西藏地热资源概况与地热产业发展思考”的主旨报告，分析了当前西藏地区地热资源的储备情况及西藏地热产业发展的思考。中国科学院院士谭天伟教授也对论坛会议的召开进行了视频祝贺。另外，会议还组织了西藏自治区科学技术厅、西藏自治区发展和改革委员会能源局代表，长三角太阳能光伏技术创新中心、华东理工大学、中国建筑西南设计研究院专家代表及西藏昂彼特堡能源科技有限公司企业代表举行了西藏自治区清洁能源发展对话，大家根据自身所处行业及工作岗位，积极探讨当前西藏地区新能源行业的发展现状及西藏地区可再生能源综合利用的前景规划。 　　西藏是青藏高原的主体，被誉为“地球第三极”“世界屋脊”，是全球气候调节器、亚洲水塔、物种基因库，是重要的国家生态安全屏障，在国家双碳目标下，在碳达峰关键期和窗口期的“十四五”期间，做好“碳达峰、碳中和”工作被列为开局起步的重要任务之一。此次论坛的举办也受到了多家行政主管部门、科研院所和区内外高校的高度重视及大力支持，通过第八届“阳光论坛”会议的召开，定将助力西藏加快推进以水、风、光为主的国家清洁能源基地建设。