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融合基因检测

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  • 抗体融合蛋白:双特异性抗体与蛋白融合的原理与应用

    [font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白是一种将抗体片段与功能蛋白融合表达的重组蛋白,具有抗体的特性和功能蛋白的活性。它可广泛应用于免疫诊断、免疫治疗、抗体纯化、抗体和抗原的定量分析以及免疫导向药物的制备等领域。根据结合的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段的不同,可以将抗体融合蛋白分为[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]与[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体([/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]scFv[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b])[/b][/url]融合蛋白。制备抗体融合蛋白的方法主要有化学交联法和基因工程技术,其中基因工程技术是目前主要的方法。在制备过程中,需要注意两蛋白间的接头序列的长度,以确保蛋白质的折叠和稳定性。抗体融合蛋白在免疫学、生物制药和医学等领域具有广泛的应用前景,为疾病的诊断、治疗和药物研发提供了新的工具和方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体如何与蛋白融合[/font][font=Calibri]?[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体是一种特殊的抗体,具有两个不同的抗原结合位点。通过技术手段,可以将双特异性抗体与另一种蛋白质融合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①使用基因工程技术,将双特异性抗体的基因与目标蛋白质的基因进行融合,然后通过表达载体在细胞内表达融合蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②使用化学手段,将双特异性抗体与目标蛋白质进行化学偶联。这需要使用特定的化学偶联剂,将双特异性抗体的特定基团与目标蛋白质的特定基团连接起来。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要注意的是,融合蛋白质的功能和性质取决于其组成成分的特性和比例,因此在融合过程中需要谨慎选择和设计组成成分,以确保融合蛋白质具有所需的功能和性质。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体融合蛋白具有广泛的应用,包括但不限于以下方面:[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①免疫诊断:抗体融合蛋白可以用于检测抗原,如病毒、细菌、肿瘤标志物等。通过将抗体片段与荧光蛋白、酶等标记物结合,可以实现对抗原的高灵敏度检测。[/font][font=宋体]②免疫治疗:抗体融合蛋白可以用于治疗肿瘤、感染性疾病等。通过将抗体片段与细胞毒素、免疫调节因子等效应分子结合,可以实现对肿瘤细胞的靶向杀伤或调节免疫反应。[/font][font=宋体]③抗体纯化:抗体融合蛋白可以用于分离和纯化抗体。通过将抗体片段与亲和标签结合,可以利用亲和层析等技术实现对抗体的纯化和富集。[/font][font=宋体]抗体和抗原的定量分析:抗体融合蛋白可以用于定量分析抗体和抗原的浓度。通过将抗体片段与荧光染料等标记物结合,可以利用流式细胞术等技术实现对抗体和抗原的定量分析。[/font][font=宋体]④免疫导向药物的制备:抗体融合蛋白可以用于制备免疫导向药物,即将药物与抗体片段结合,利用抗体的特异性结合能力,将药物定向引导至病变部位,提高药物的疗效并降低副作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 抗体融合蛋白结构:融合蛋白与单抗区别有哪些?

    [font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白([/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]融合蛋白)是指在基因水平上将目的基因同免疫球蛋白部分片段基因相连,并在真核或原核表达系统中表达的重组蛋白。抗体融合蛋白具有抗体的特性及融合功能蛋白的活性,可广泛应用于免疫诊断、免疫治疗、抗体纯化及抗体和抗原的定量分析等,特别可用于免疫导向药物的制备。根据结合的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段的不同,可以将抗体融合蛋白分为[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白与单链抗体([/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体])融合蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体融合蛋白结构:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、单链抗体融合蛋白研究表明,抗体可变区的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端空间结构上与互补决定区([/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体])形成的抗原结合部位十分接近,有的抗体可变区[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端残基甚至直接参与抗原结合部位的形成,如果将效应蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端结合,可能对抗体可变区的空间构型造成较大影响,从而降低抗体与抗原的结合能力。因此,通常将蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端进行结合,形成抗体融合蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在结构上是将抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区与功能蛋白进行融合,可将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端或[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端与目的基因进行融合。根据结合蛋白的不同,可以有多种构型。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体融合蛋白作用原理:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]含有抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白与[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]融合蛋白含有抗体的可变区,可以进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应,其作用原理为利用抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原特异性结合的特性,通过这种特性的引导,将具有生物活性的蛋白靶向引导至细胞的特定部位,进而发挥一定的生物效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不含抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]该类融合蛋白含有的抗体功能区为[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区,不能进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段的作用为延长药物在血浆内的半衰期、增加融合蛋白的稳定性等。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白药理作用的发挥依赖于功能蛋白部分,利用受体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]配体之间的相互作用产生一系列的生物学效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗体融合蛋白制备:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]最初抗体融合蛋白制备的方法为化学交联法,但这种方法制备的抗体融合蛋白组成不均一、性能不稳定、免疫源性大,随着基因工程技术的发展,该技术已被淘汰。目前主要利用基因工程技术来进行抗体融合蛋白的制备。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]其制备原理为:将抗体基因与目的蛋白基因通过一段接头序列([/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体])进行链接,然后将链接产物亚克隆至载体中,并用原核或者真核表达系统进行表达。制备抗体融合蛋白过程中,一个关键的问题是两蛋白间的接头序列[/font][font=Calibri](Linker)[/font][font=宋体]的长度,[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]的长短对蛋白质的折叠和稳定性非常重要。如果接头序列太短,可能影响两蛋白高级[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]结构的折叠,从而相互干扰;如果接头序列太长,又涉及免疫原性的问题。抗体融合蛋白与双特异性抗体抗体融合蛋白是将抗体的部分片段与目的蛋白进行融合表达得到的重组蛋白,若将两个具有不同抗原特异性的抗体片段连接至同一蛋白,即可得到双特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单克隆抗体与抗体融合蛋白区别:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]单克隆抗体抗体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]结构:[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]型[/font][/font][font=宋体][font=宋体]制备方法:杂交瘤技术[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]基因重组[/font][/font][font=宋体][font=宋体]表达系统:真核系统[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]原核系统[/font][/font][font=宋体][font=宋体]真核系统[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]原核系统[/font][/font][font=宋体][font=宋体]作用原理:特异性识别抗原,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段引起[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ADCP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]等作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]结构:具有多种结构[/font][font=宋体]制备方法:基因重组[/font][font=宋体][font=宋体]表达系统:真核系统[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]原核系统[/font][/font][font=宋体][font=宋体]作用原理:功能蛋白与靶分子间的受体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]配体的相互作用[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以参考:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 用于自来水浊度检测的多传感器信息融合技术

    【作者】:张远,罗大庸. 【题名】:用于自来水浊度检测的多传感器信息融合技术[J]. 【期刊】:自动化与仪表. 2003(01)【年、卷、期、起止页码】:【全文链接】:https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?filename=ZDHY200301003&dbcode=CJFD&dbname=CJFD2003&v=SnkKPS5TJT7Uk_J-pDNgqjAhY2vWERKt6DIVBh8Fjh1pW6yQNW7oZW6DjwS8G0D6

  • 抗体融合蛋白与单抗差异详解

    [font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白,亦被称为[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]融合蛋白,是通过在基因层面上巧妙地将目标基因与免疫球蛋白的部分基因片段相互连接,随后在真核或原核表达系统中实现表达而得到的一种重组蛋白。这种独特的蛋白不仅继承了抗体的卓越特性,更融合了功能蛋白的活性,使其在多个领域展现出广泛的应用前景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在免疫诊断领域,抗体融合蛋白能够精准识别并绑定抗原,为疾病的早期发现和诊断提供了有力工具。在免疫治疗领域,它则能够引导药物直达病灶,提高治疗效果并减少副作用。此外,抗体融合蛋白在抗体纯化、抗体和抗原的定量分析等方面也发挥着重要作用,特别是在免疫导向药物的制备中,其重要性更是不言而喻。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据与[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段结合方式的不同,抗体融合蛋白可分为多个类型,包括[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]以及[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体([/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]scFv[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b])[/b][/url]融合蛋白。这些不同类型的抗体融合蛋白各具特色,为科学研究和临床应用提供了丰富的选择。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]结构[/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、单链抗体融合蛋白[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]研究表明,抗体可变区的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端空间结构上与互补决定区([/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体])形成的抗原结合部位十分接近,有的抗体可变区[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端残基甚至直接参与抗原结合部位的形成,如果将效应蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端结合,可能对抗体可变区的空间构型造成较大影响,从而降低抗体与抗原的结合能力。因此,通常将蛋白与抗体片段的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端进行结合,形成抗体融合蛋白。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在结构上是将抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区与功能蛋白进行融合,可将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端或[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端与目的基因进行融合。根据结合蛋白的不同,可以有多种构型。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]作用原理[/font][/b][font=宋体]含有抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白与[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]融合蛋白含有抗体的可变区,可以进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应,其作用原理为利用抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原特异性结合的特性,通过这种特性的引导,将具有生物活性的蛋白靶向引导至细胞的特定部位,进而发挥一定的生物效应,也就是所谓的“生物导弹”。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不含抗体可变区的抗体融合蛋白[/font][font=宋体][font=宋体]该类融合蛋白含有的抗体功能区为[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区,不能进行抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体反应,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段的作用为延长药物在血浆内的半衰期、增加融合蛋白的稳定性等。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白药理作用的发挥依赖于功能蛋白部分,利用受体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]配体之间的相互作用产生一系列的生物学效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体融合蛋白制备[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]最初抗体融合蛋白制备的方法为化学交联法,但这种方法制备的抗体融合蛋白组成不均一、性能不稳定、免疫源性大,随着基因工程技术的发展,该技术已被淘汰。目前主要利用基因工程技术来进行抗体融合蛋白的制备。其制备原理为:将抗体基因与目的蛋白基因通过一段接头序列([/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体])进行链接,然后将链接产物亚克隆至载体中,并用原核或者真核表达系统进行表达。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]制备抗体[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]过程中,一个关键的问题是两蛋白间的接头序列[/font][font=Calibri]( Linker )[/font][font=宋体]的长度,[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]的长短对蛋白质的折叠和稳定性非常重要。如果接头序列太短,可能影响两蛋白高级[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]结构的折叠,从而相互干扰;如果接头序列太长,又涉及免疫原性的问题。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体融合蛋白与双特异性抗体[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体融合蛋白是将抗体的部分片段与目的蛋白进行融合表达得到的重组蛋白,若将两个具有不同抗原特异性的抗体片段连接至同一蛋白,即可得到[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]单克隆抗体与抗体融合蛋白区别[/font][/b][font=宋体] [/font][img=单克隆抗体与抗体融合蛋白区别,690,155]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403081113369902_7816_5907840_3.png!w690x155.jpg[/img][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 关于融合蛋白的CE-SDS纯度怎么做?

    想问下大家伙,融合蛋白的CE-SDS纯度怎么做,由于其自身带有大量的糖以及二硫键,在做CE-SDS时与单抗相比,明显峰变宽,这肯定不是最佳纯度检测方法,想问下CE纯度究竟该怎么做呢?

  • 【讨论】电穿孔/电融合有关技术方面资料太少

    正在研究包括电穿孔/电融合有关技术方面的课题,这方面资料太少,回看高效基因导入-电穿孔在生命科学研究中的应用还这么不方便,本网站视乎互动方面不是很亲民的,也可能是个人活动太少无经验吧

  • 融合蛋白是什么?融合蛋白和单抗的区别及优势?

    [font='calibri'][size=13px]融合蛋白[/size][/font][font='calibri'][size=13px]是什么?[/size][/font][font='calibri'][size=13px]融合蛋白和单抗的区别[/size][/font][font='calibri'][size=13px]及优势?[/size][/font]融合蛋白是指将目标蛋白与免疫球蛋白融合而产生的新型重组蛋白,其中,目标蛋白可以是细胞因子、受体、抗原肽或者其他具有生物学活性等功能蛋白质。融合蛋白具有较强的生物活性,还具有一些抗体性质,可以用于疾病治疗,可以通过延长血浆半衰期,加强其治疗能力,同时,降低肾小球清除率,可以提高药物在体内的药物浓度。单抗即单克隆抗体,是由单一的B细胞克隆产生的抗单一表位的抗体,具有多个优点,包括高度的特异性:能够特定的针对单一的抗原表位,选择性的杀伤靶细胞,具有更强的疗效;安全性:由于单抗只针对靶细胞,对机体的其他细胞影响不大,相比其他药物不良反应少;多样性:不同的单抗结合,不同的抗原表位作用机制各不相同,可以针对不同的疾病选择相应的单抗。融合蛋白和单抗具有各自的优点和作用特点,近年来,对这两种相关药物的研究越来越多,对于一些恶性肿瘤等相关性疾病的治疗得到了较大的提高。因此,融合蛋白和单抗具有上述区别,但用于疾病的治疗各自有优势。单克隆抗体定制服务推荐:义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商,目前已成功交付了数以万计的抗体项目,客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。针对定制单克隆抗体,义翘神州提供了一套全面的解决方案。我们将与您通力合作,完成从抗原设计、纯化和抗体验证的完整过程。义翘神州拥有包括杂交瘤、噬菌体抗体库和单B细胞在内的抗体发现平台, 我们可根据您感兴趣的靶点、抗体应用和时间表等,来选择最合适的技术平台。 此外,义翘神州还提供ELISA、WB、流式细胞术、IHC、基于细胞的筛选、亲和力检测等多种表征和筛选技术,确保最终鉴定到最佳的抗体,以满足研究、诊断和治疗领域等应用。单克隆抗体定制服务:https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services

  • 转基因检测技术知多少~~~

    事件一:7月4日,俄罗斯总统普京签署法令,禁止在俄境内种植转基因作物、养殖转基因动物、生产转基因食品,并禁止俄罗斯进口转基因食品,违者将处以罚款。=======================================================================事件二:7月29日,美国总统奥巴马签署了一项有关转基因食品销售的法律,要求生产商在食品包装上标注其是否含有转基因成分,从而让消费者“买得明白”。======================================================================= 美俄两个超级大国在转基因领域的大动作,代表着一个趋势,那就是政府部门对转基因食品的监管会越来越严格,立法越来越完善,因此对检测的技术要求也会越来越高。那么目前国内转基因发展现状,转基因成分的检测技术都有哪些,依据什么原理,准确度怎么样呢,就由小编为大家简单介绍一下。~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~据国际农业生物技术应用服务组织(ISAAA)统计报道,目前国内共批准60项转基因作物事件,分别为转基因玉米17项、转基因阿根廷油菜12项、转基因大豆10项、转基因棉花10项、转基因西红柿3项、转基因水稻2项、转基因杨树2项及转基因甜椒、转基因甜菜、转基因矮牵牛花和转基因木瓜各1项。转基因技术的核心是对物种遗传物质进行人为改造,导入外源基因,从而获得预期的目的性状。因此可以通过检测材料中是否含有外源启动子、终止子、标记基因、目的基因(抗虫、抗除草剂、抗病和抗逆等基因)及其表达产物来判断是否含有转基因成分。目前国内外对转基因成分的检测从原理上可以分为两类,基于外源蛋白靶标检测和基于外源核酸成分检测。基于外源蛋白靶标的检测技术主要是以免疫分析技术为基础,利用转基因作物产生的特定的外源蛋白与抗体的特异性识别进行检测和定量的技术。常见的基于外源蛋白靶标的转基因检测技术包括酶联免疫吸附技术(ELISA)、蛋白印迹(Western blot)检测技术、免疫层析试纸条技术及蛋白质芯片技术(Protein chip)等。ELISA方法和免疫层析试纸条法快速准确,但仅可检测一种目标蛋白,而蛋白质芯片可通过设计不同的探针阵列和特定的检测方法,使一次反应同时检测多个蛋白,具有通量高、微型且自动化等优点,但背景信号高、蛋白质活性难以长久保持。蛋白质检测方法往往不能检测加工食品,而且受目的蛋白质在转基因作物中的表达部位、表达时间及环境等的影响,限制了其应用。而核酸成分,尤其是DNA,因其稳定性好,在加工过程中不易降解,被广泛用于转基因检测中。基于外源核酸成分的检测方法主要包括 PCR 技术、恒温扩增技术、基因芯片技术等。PCR技术已经成为转基因作物及产品日常检测工作中应用最广泛的技术,国内以及国际发布的食品和饲料中转基因产品的检测标准方法大都采用的PCR技术原理,应用普通PCR方法或实时荧光定量PCR可以对检测样品进行定性和定量检测。在此基础上,新的PCR技术如巢式和半巢式 PCR、多重 PCR、PCR-免疫层析等技术也成功应用于转基因成分的检测中。同 PCR 检测技术相比,恒温扩增技术具有特异性强、等温高效、操作简单、耗时较短、产物易检测及设备要求低等优势, 在快速检测中具有良好的前景。基因芯片综合了 PCR 技术和分子杂交的优点,可用于一种转基因作物中多个基因的平行检测或对多种转基因作物进行同时检测,其快速简便、自动化、微型化、高通量、准确度高等优点,使其在转基因作物检测方面具有广阔的应用前景。数字 PCR 是一种基于单分子 PCR 的对DNA分子直接计数的绝对定量方法,不需要标准品作为参考,融合了定量 PCR的准确性及基因芯片的高通量,因此有望成为绝对定量新标准,也有潜力解决转基因检测通量和劳力成本的问题。目前, 国内外针对转基因成分的检测主要以DNA为检测对象的核酸扩增检测技术为主,但是却面临着两大挑战:1、Talen和CRISPR等基因组编辑技术在转基因研发中的应用;2、加工技术水平和加工精度的提高, 导致DNA的提取难度加大,提取质量下降。但是我们相信,正是在这些挑战的激励下,我们的检测技术会不断地发展,检测人员的水平也会不断地提高。行路难!行路难!多歧路,今安在?长风破浪会有时,直挂云帆济沧海。

  • Fc融合蛋白:定义、种类及其在生物医药中的应用

    [font=宋体][b][font=宋体]什么是[/font][font=Calibri]fc[/font][font=宋体]融合蛋白?[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]是一种由免疫球蛋白(如[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等)的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段与目标蛋白序列融合而成的新型重组蛋白。通过将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域与其他蛋白质或肽段融合,可以赋予这些蛋白质或肽段新的特性和功能,同时利用[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域的稳定性和免疫系统的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体相互作用,增强融合蛋白的稳定性和半衰期。例如,普通重组[/font][font=Calibri]IL-2[/font][font=宋体]的体内半衰期较短,只有[/font][font=Calibri]6.9[/font][font=宋体]分钟,这限制了其在体内的持续作用时间。然而,通过与免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合,重组[/font][font=Calibri]IL-2/Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在体内半衰期延长了近[/font][font=Calibri]700[/font][font=宋体]倍,从而使其能够在体内更长时间地发挥作用。此外,延长半衰期还可以降低药物的剂量和频率,减少潜在的副作用和毒性。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白有哪些?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]是一种由至少两个结构域组成的蛋白,这些结构域由被连接起来的独立基因编码,因此能够作为一个单元被转录和翻译,产生单克隆多肽。现在几乎所有的重组蛋白都是利用融合结构域制备,也被称为[/font][font=宋体]“标签”(参阅重组蛋白标签的完整列表)。因此,融合蛋白又称融合标签蛋白或嵌合蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]大体上有两种类型的融合蛋白:第一种是由两个蛋白或蛋白亚单位端对端融合,通常由一个[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]连接,第二种是来自两个供体的氨基酸穿插在融合蛋白产物中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白应用:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]融合蛋白最重要的三个用途是:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]作为克隆基因纯化的辅助手段[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]作为报告的表达水平[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]作为组织化学标签,使蛋白质在细胞、组织或生物体中的位置可视化[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白在纯化中可以通过亲和层析简单方便地纯化,如葡萄球菌蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]、谷胱甘肽[/font][font=Calibri]-S-[/font][font=宋体]转移酶[/font][font=Calibri](gst)[/font][font=宋体]、麦芽糖结合蛋白[/font][font=Calibri](mbp)[/font][font=宋体]和纤维素结合蛋白。 重组融合蛋白最常用作报告构建体的融合伙伴,包括 β[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]半乳糖苷酶、荧光素酶和绿色荧光蛋白 [/font][font=Calibri](GFP)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光融合蛋白[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在融合蛋白中,最多的一类称为荧光蛋白,如绿色荧光蛋白([/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体])、橙色荧光蛋白([/font][font=Calibri]OFP[/font][font=宋体])和黄色荧光蛋白([/font][font=Calibri]YFP[/font][font=宋体])。 绿色荧光蛋白 [/font][font=Calibri](GFP) [/font][font=宋体]等荧光蛋白能够直接观察动态细胞内过程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]绿色荧光蛋白([/font][font=Calibri]GFP[/font][font=宋体])是一种荧光蛋白,最初是从水母维多利亚发光管中分离出来的。 与荧光素酶不同,[/font][font=Calibri]GFP [/font][font=宋体]具有不需要任何底物、荧光素以及 [/font][font=Calibri]ATP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]O2 [/font][font=宋体]或 [/font][font=Calibri]Mg2+ [/font][font=宋体]的优势。 [/font][font=Calibri]GFP [/font][font=宋体]在被蓝光或紫外线激发时会发出绿光,在许多情况下可用于活的、完整的细胞和生物体,从而确保 [/font][font=Calibri]GFP [/font][font=宋体]作为自发荧光蛋白的功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]融合蛋白标签[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在融合标签中,既有短序列(如[/font] [font=Calibri]PolyHis[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PolyArg[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]FLAG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]c-Myc[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Streptag [/font][font=宋体]等),也有大蛋白([/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MBP [/font][font=宋体]等)。 在许多情况下,短序列不会影响分子的三级结构及其生物学特性,而大融合分子更常用于增强所需蛋白质的溶解度。 与短序列标签不同,需要从重组构建体中去除大的融合标签。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]有许多融合标签,既包含经过充分验证的标签,也包含最近开发的具有各种特性和不同优缺点的标签。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font]

  • 植物细胞原生质体制制备与融合

    植物细胞原生质体制制备与融合2006-11-20 17:14植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示,逐渐将眼光转向细胞融合,试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。1937年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。196O年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶,成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体,开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备(1)取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强,再生与分生比例较高。常用的外植体包括:种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗2~3次,然后浸人 70%酒精消毒后,再放进 3%次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次,并用无菌滤纸吸干。(2)酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液:反应液应是一种PH值在5·5~5·8的缓冲液,内合纤维素酶0.3%~3.0%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等,②酶解:除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃~30℃,2~4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标,说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应,避免脆弱的原生质体受到更多的损害。(3) 分离 在反应液中除了大量的原生质体外,尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取200~400目的不锈钢网或尼龙布j叭i过滤除渣,也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。(4) 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂,应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤2~4次。 (5) 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁,此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中,则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察,残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测,基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外,尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合(1)化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器,试剂易于得到,因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇(PEG)纳合成钙高pH诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法(在无菌条件下进行):按比例混合双亲原生质体-----滴加 PEG溶液,摇匀,静置----滴加高钙高pH值溶液,摇匀,静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。(2)物理法诱导融合 1979年Senda等发明了微电极法诱导细胞融合。1981年Zi。。mann等提出了改进的平行电极法,现简介如下:将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后,插入微电极,接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲,则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂,作用条件比较温和,而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当,亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因,要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近,有人提出以X射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤,融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移;致死量处理后合u可能产生没再仅体万染色体w划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法,大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型.2) 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体,发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3) 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成,可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种,某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4) 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或DNA片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞,一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养(液体或固体),再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞:若一方细胞大,另一方细胞小,则大。小细胞融合的就是杂合细胞;若~方细胞基本无色,另一方为绿色,则自绿色结合的细胞是杂合细胞;如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征,则可作为识别杂合的标志;发现h述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出,移置再牛培养基培养。(2)以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信,但实验者有时会受到仪器的限制,工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补:不同基山叨的白化突变株出aBxAh,可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补:甲细胞株缺外源激素A不能生长,乙细胞株需要提供外源激素B才能生长,则甲株与乙株融合,杂合细胞在不含激素A、B的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选:假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性(如抗卡那霉素),则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选:根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点,用它处理受体原生质体,只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复,等等。 (3)采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株,可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP,见8.2.2.2)和随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。(4)根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

  • 植物细胞原生质体制制备与融合

    植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示,逐渐将眼光转向细胞融合,试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。1937年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。196O年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶,成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体,开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备(1)取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强,再生与分生比例较高。常用的外植体包括:种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗2~3次,然后浸人 70%酒精消毒后,再放进 3%次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次,并用无菌滤纸吸干。(2)酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液:反应液应是一种PH值在5·5~5·8的缓冲液,内合纤维素酶0.3%~3.0%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等,②酶解:除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃~30℃,2~4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标,说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应,避免脆弱的原生质体受到更多的损害。(3) 分离 在反应液中除了大量的原生质体外,尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取200~400目的不锈钢网或尼龙布j叭i过滤除渣,也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。(4) 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂,应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤2~4次。 (5) 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁,此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中,则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察,残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测,基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外,尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合(1)化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器,试剂易于得到,因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇(PEG)纳合成钙高pH诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法(在无菌条件下进行):按比例混合双亲原生质体-----滴加 PEG溶液,摇匀,静置----滴加高钙高pH值溶液,摇匀,静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。(2)物理法诱导融合 1979年Senda等发明了微电极法诱导细胞融合。1981年Zi。。mann等提出了改进的平行电极法,现简介如下:将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后,插入微电极,接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲,则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂,作用条件比较温和,而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当,亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因,要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近,有人提出以X射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤,融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移;致死量处理后合u可能产生没再仅体万染色体w划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法,大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型.2) 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体,发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3) 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成,可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种,某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4) 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或DNA片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞,一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养(液体或固体),再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞:若一方细胞大,另一方细胞小,则大。小细胞融合的就是杂合细胞;若~方细胞基本无色,另一方为绿色,则自绿色结合的细胞是杂合细胞;如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征,则可作为识别杂合的标志;发现h述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出,移置再牛培养基培养。(2)以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信,但实验者有时会受到仪器的限制,工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补:不同基山叨的白化突变株出aBxAh,可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补:甲细胞株缺外源激素A不能生长,乙细胞株需要提供外源激素B才能生长,则甲株与乙株融合,杂合细胞在不含激素A、B的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选:假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性(如抗卡那霉素),则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选:根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点,用它处理受体原生质体,只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复,等等。 (3)采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株,可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性(RFLP,见8.2.2.2)和随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。(4)根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

  • 重组蛋白是什么?融合蛋白和重组蛋白的区别

    [font=宋体][b]什么是重组蛋白?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production][b]重组蛋白[/b][/url]的产生是应用了重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]或重组[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合蛋白和重组蛋白的区别[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、重组蛋白[/font][/font][font=宋体]重组蛋白是指应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点,现已被广泛采用。[/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白是指通过重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术将你要表达的目的蛋白基因同表达载体上融合蛋白基因相连,这样表达出的蛋白质就会是同时具有目的基因蛋白和融合基因蛋白两个部分的重组蛋白。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白与重组蛋白不是一个层次上对立的概念,融合蛋白表达只是重组蛋白表达的一种策略,融合表达是一种方法。因为融合表达具有表达效率高、产物稳定而且水溶性好、易于鉴定和纯化等优点,现已被广泛采用。融合蛋白又称标签([/font][font=Calibri]Tag[/font][font=宋体]),常用的[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总结:在生物制药领域,重组蛋白具有较高的活性和纯度,更易吸收,安全性也更高的特点。重组蛋白的利用率也更高。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]为了生产重组蛋白,基因被分离并克隆到表达载体中。重组蛋白的生产需要蛋白表达系统、蛋白纯化系统和蛋白识别系统。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]获取重组蛋白的基本步骤:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]目标基因的扩增。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]插入克隆载体。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]亚克隆到表达载体中。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]转化到蛋白表达宿主中[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]细菌[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大肠杆菌[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、酵母细胞、哺乳动物细胞或杆状病毒[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]昆虫细胞系统[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]重组蛋白鉴定试验[/font][font=Calibri](Western blot[/font][font=宋体]或荧光[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]大规模生产。[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]大规模发酵[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7.[/font][font=宋体]分离和纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要考虑多种因素:[/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]选择哪个宿主系统?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]如何分离和纯化重组蛋白?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]选择适当的表达宿主或使用正确的纯化方法并不容易,应考虑目标重组蛋白的性质。下面列出了一些重要因素:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]? 膜结合[/font][font=宋体]? 溶解度[/font][font=宋体]? 单或多结构域[/font][font=宋体][font=宋体]? 大小[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]分子量[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体]? 表达位置[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]对于大多数没有足够经验来表达和分离重组蛋白的人来说,重组蛋白的生产是非常耗时的。许多生物公司为各种不同规模的重组蛋白表达提供良好的服务,例如义翘神州[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]参考重组蛋白生产的详细服务清单)[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州提供重组蛋白和[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]等相关信息,详情可以关注[/font][font=宋体][font=宋体]融合蛋白:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组蛋白生产:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-production[/font][/font]

  • 我国肺癌检测技术获突破性进展 新技术使部分肺癌检测提速减价

    最新发现与创新 中国科技网讯 经3年多临床攻关,复旦大学附属肿瘤医院陈海泉教授领衔的课题组,发明了一种能快速准确检测携带“ALK融合基因”的肺癌分子诊断技术,可为患者节省巨额检测费用,并为晚期肺癌患者选择“有特效的”分子靶向药物进行个性化治疗赢得宝贵时间。相关论文已发表在最近出版的国际著名肿瘤学期刊《临床癌症研究》上。 “ALK融合基因”是癌基因,存在于3%—7%的非小细胞肺癌中,以该癌基因为靶点的分子靶向药物Crizotinib可显著提高肺癌患者的生存率。但如何快速而准确地诊断出携带“ALK融合基因”的肺癌,一直是世界性难题。目前,国际上“ALK融合基因”检测技术复杂,至少需2天时间完成,每例价格高达1500美元。 陈海泉在一次研究中意外发现,当“ALK融合基因”发生断裂后,人体内的“激酶域”表达会显著增高,而“非激酶域”则不表达或低表达。根据这一特点,陈海泉课题组创造性地发明了一种“实时定量的ALK融合基因检测”新技术,通过检测“ALK融合基因”断裂点前后ALK基因的表达水平差异,快速而准确地诊断出ALK融合基因。经验证,应用该新技术对950例非小细胞肺癌标本的检测结果发现了40例携带“ALK融合基因”的阳性标本,敏感性、特异性均达100%。此外,该技术还具有高通量、低成本等优势,可在90分钟内完成48例样本的检测,每例检测成本不超过30元。 据悉,为表彰陈海泉的杰出贡献,美国胸科医师学院已决定,在即将举行的2012年年会上授予其“阿尔弗雷德·索弗研究奖”。(通讯员 孙国根 记者 王春) 《科技日报》(2012-09-24 一版)

  • Fc融合蛋白的类别、优势及其应用领域

    [font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]:根据是否需要发挥[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段结合[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]来介导抗体依赖细胞介导的细胞毒性([/font][font=Calibri]antibody-dependentcell-mediated cytotoxicity[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体])或结合补体[/font][font=Calibri]C1q[/font][font=宋体]来介导补体依赖的细胞毒性([/font][font=Calibri]complement-dependent cytotoxicity[/font][font=宋体], [/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体])等的生物学活性,可将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白分为溶细胞性([/font][font=Calibri]cyto-lytic[/font][font=宋体])和非溶细胞性([/font][font=Calibri]non-lytic[/font][font=宋体])[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]溶细胞性融合蛋白[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由功能性蛋白与天然或活性提高的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合而成。不仅具有功能蛋白的生物学活性和长效血浆半衰期,并且保留 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段介导 [/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]效应的能力,可以靶向杀伤功能蛋白受体阳性细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]非溶细胞性融合蛋白[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由功能性蛋白与活性降低的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合,通过对[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段上补体受体结合域或糖基化模式的突变改造,调节[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]与相关受体的结合亲和力,降低或消除[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]效应,只保留功能蛋白的生物学活性和 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段长效体内半衰期,而不产生细胞毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白优势有哪些?[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]延长半衰期:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在血浆内有较长的半衰期。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与新生[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体([/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体])的结合并呈[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]依赖性:在[/font][font=Calibri]pH 7.4[/font][font=宋体]的生理条件下,[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]不结合;在细胞内涵体[/font][font=Calibri]pH 6.0~6.5[/font][font=宋体]的酸性条件下,两者结合,从而避免了融合蛋白在细胞内被溶酶体等快速降解。另外,[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段能够增大分子体积,不易被肾小球滤过,也从一定程度上延长了半衰期。这就是[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白长效原理。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]增强稳定性:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白通过[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]铰链区的二硫键连接形成稳定的二聚体。如果对二硫键进行基因工程改造,还可以使[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白形成更稳定的六聚体复合物。另外,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域可以独立折叠,确保分子的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]发挥生物学效应:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白可以结合不同的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体,包括[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ [/font][font=Calibri](CD64)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ [/font][font=Calibri](CD32)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅲ [/font][font=Calibri](CD16)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ和[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体],从而介导不同的生物学功能,如炎症反应、抗体依赖性细胞毒性([/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体])和补体依赖性细胞毒性([/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体])、调节细胞因子分泌等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]蛋白的应用[/font][/font][/b][font=宋体]在临床方面[/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体])大部分 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白药物的作用机制为受体与配体之间的相互作用,同时辅以 [/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]片段的多种生物学功能。截止 [/font][font=Calibri]2014[/font][font=宋体]年 [/font][font=Calibri]9 [/font][font=宋体]月,已有 [/font][font=Calibri]9 [/font][font=宋体]种人 [/font][font=Calibri]IgG-Fc [/font][font=宋体]融合蛋白药物经美国食品及药品监督管理局([/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体])批准临床使用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体])[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白也可以作为一种新型疫苗形式,将病原体的部分抗原肽与 [/font][font=Calibri]IgG-Fc [/font][font=宋体]片段进行融合,诱导机体产生抗原特异性免疫应答。研究表明,[/font][font=Calibri]HIV-1 Gag p24[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]gp120 V3 [/font][font=宋体]以及流感病毒 [/font][font=Calibri]HA [/font][font=宋体]胞外域与小鼠 [/font][font=Calibri]IgG2a-Fc [/font][font=宋体]的融合疫苗,可提高小鼠抗原特异性体液免疫反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体])[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白较传统蛋白类药物具有多种新特性,在全世界范围内受到广泛关注。随着相关技术与理念的不断进步,[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]融合蛋白在临床治疗、医学生物研究等领域必将发挥更大的作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在疫苗方面[/font][font=宋体][font=Calibri](1) [/font][font=宋体]疫苗设计的关键在于有效活化抗原递呈细胞([/font][font=Calibri]antigen presenting cell[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]),由于 [/font][font=Calibri]APC [/font][font=宋体]表面能够表达 [/font][font=Calibri]FcR[/font][font=宋体],所以抗原[/font][font=Calibri]-Fc [/font][font=宋体]融合蛋白能够作为抗原运载工具,借助[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段靶向结合 [/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体],缩短抗原在血浆中的游离时间,减少蛋白酶对抗原的降解,提高抗原半衰期,从而加强抗原的递呈。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](2) [/font][font=宋体]转染抗原[/font][font=Calibri]-Fc [/font][font=宋体]基因的[/font][font=Calibri]DC [/font][font=宋体]细胞,不仅能够持续表达抗原[/font][font=Calibri]-Fc [/font][font=宋体]融合分子,产生较长效的免疫激活,还可以克服其他体外抗原刺激方法不可避免的问题,如抗原 [/font][font=Calibri]MHC [/font][font=宋体]复合物解离或细胞 [/font][font=Calibri]MHC[/font][font=宋体]分子降解。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](3) [/font][font=宋体]由于细胞内能够结合 [/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]并影响免疫反应的受体蛋白如[/font][font=Calibri]FcRL[/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]TRIM21[/font][font=宋体]等不断被发现,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白类疫苗能结合的受体不仅仅局限于[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]表面的[/font][font=Calibri]FcR[/font][font=宋体],应用前景也将大大扩展。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[/font][font=Calibri]FC[/font][font=宋体]融合蛋白表达服务,更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins[/font][/font]

  • Fc融合蛋白结构、功能、与优势

    [font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白是一种由免疫球蛋白(如[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等)的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段与目标蛋白序列融合而成的新型重组蛋白。通过将[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域与其他蛋白质或肽段融合,可以赋予这些蛋白质或肽段新的特性和功能,同时利用[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域的稳定性和免疫系统的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体相互作用,增强融合蛋白的稳定性和半衰期。例如,普通重组[/font][font=Calibri]IL-2[/font][font=宋体]的体内半衰期较短,只有[/font][font=Calibri]6.9[/font][font=宋体]分钟,这限制了其在体内的持续作用时间。然而,通过与免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]片段融合,重组[/font][font=Calibri]IL-2/Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在体内半衰期延长了近[/font][font=Calibri]700[/font][font=宋体]倍,从而使其能够在体内更长时间地发挥作用。此外,延长半衰期还可以降低药物的剂量和频率,减少潜在的副作用和毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]结构域[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白的主要特点是含有[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段,这也是影响其理化性质和生物学活性的关键因素。类似于单克隆抗体的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段,融合蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段可以延长功能蛋白在血浆中的半衰期,增加分子的稳定性,并且能够特异性地结合体内的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体,发挥相应的生物学功能。此外,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段还可以特异性地结合[/font][font=Calibri]protein A[/font][font=宋体],有利于简化[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白的纯化过程,对相关生物制品的研发制备具有重要意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白功能[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]功能蛋白能特异性地识别某个靶点分子,并决定了融合蛋白的药理活性。功能蛋白的种类很多,可以是能结合内源性受体(或配体)的可溶性配体(或受体),或其他需要延长半衰期的活性物质,如细胞因子、毒素、酶等。功能蛋白的作用各不相同,主要包括抗炎性感染、抗病毒感染、抗瘤免疫、抗移植排斥、治疗痛觉过敏以及自身免疫性疾病的治疗等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri][url=http://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins]Fc[/url][/font][font=宋体][url=http://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins]融合蛋白[/url]的优势[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①延长半衰期:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白在血浆内有较长的半衰期。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与新生[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体([/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体])的结合并呈[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]依赖性:在[/font][font=Calibri]pH 7.4[/font][font=宋体]的生理条件下,[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]不结合;在细胞内涵体[/font][font=Calibri]pH 6.0~6.5[/font][font=宋体]的酸性条件下,两者结合,从而避免了融合蛋白在细胞内被溶酶体等快速降解。另外,[/font][font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]段能够增大分子体积,不易被肾小球滤过,也从一定程度上延长了半衰期。这就是[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白长效原理。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②增强稳定性:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白通过[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]铰链区的二硫键连接形成稳定的二聚体。如果对二硫键进行基因工程改造,还可以使[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白形成更稳定的六聚体复合物。另外,[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域可以独立折叠,确保分子的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③发挥生物学效应:[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白可以结合不同的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体,包括[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ [/font][font=Calibri](CD64)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ [/font][font=Calibri](CD32)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅲ [/font][font=Calibri](CD16)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅰ、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]Ⅱ和[/font][font=Calibri]FcRn[/font][font=宋体],从而介导不同的生物学功能,如炎症反应、抗体依赖性细胞毒性([/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体])和补体依赖性细胞毒性([/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体])、调节细胞因子分泌等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可参看:[/font][font=Calibri]http://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins[/font][/font]

  • 融合标签蛋白纯化常见问题解析

    [font=宋体][font=宋体]融合标签是已知的蛋白或多肽[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]可融合到目标蛋白上。在重组蛋白中,常常将目的蛋白末端与一些标签进行融合表达,这是为什么呢?常见的融合标签有哪些呢?它们都有什么区别呢?下面是[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]融合标签蛋白纯化[/b][/url]常见问题解析分享:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:什么是融合标签?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:融合标签是指利用 [/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]体外重组技术,在目的蛋白 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端或 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端进行融合表达的特定蛋白、多肽或寡肽标签。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:融合标签有什么作用?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:重组蛋白通过融合标签与包被在固相基质上的特异配基结合,使重组蛋白定向固定并得以纯化,大大简化了重组蛋白的检测,同时既能保留天然蛋白的大部分结构,又能实现增加溶解度,防降解,促进分泌,便于纯化等功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:融合标签的分子量和功能有关吗?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:蛋白融合标签的分子量越大,对蛋白质本身的功能影响越大,所以大分子融合标签一般只用于检测或蛋白纯化等。常见的小分子量的融合标签,因其具有很多商品化的标签抗体,可以节省使用者制备目的蛋白的单克隆抗体的时间与成本。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:是否所有的融合标签都需要切除?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:融合标签较小,免疫原性也很弱,一般不需要切除,对蛋白质的后续应用和研究不会产生影响。但是有些大标签是需要切除的,例如:[/font][font=Calibri]Dsb [/font][font=宋体]蛋白、[/font][font=Calibri]FkpA [/font][font=宋体]蛋白、[/font][font=Calibri]GST [/font][font=宋体]蛋白、[/font][font=Calibri]SUMO [/font][font=宋体]标签等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]为了便于将重组蛋白的融合标签去除,在设计构建载体时需要在标签蛋白和目的蛋白之间加上蛋白酶识别位点,常用的蛋白酶位点有:[/font][font=Calibri]HRV 3C [/font][font=宋体]蛋白酶切位点、[/font][font=Calibri]TEV [/font][font=宋体]蛋白酶切位点、肠激酶切位点、[/font][font=Calibri]SUMO [/font][font=宋体]蛋白酶切位点等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]:融合标签加在 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端或 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端,有什么区别?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]:蛋白融合标签对于 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端或 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端的选择性对重组蛋白的结构与特性会造成一定的影响。例如,对于较难表达或较容易降解的蛋白,可将融合标签选择在 [/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’ 端,可以提高重组蛋白的稳定性,也可减小对重组蛋白的免疫原性。但是重组蛋白为分泌蛋白,在其分泌到高尔基体的过程中,处于 [/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’ 端的融合标签会随着 [/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]’ 端信号肽的切除而切除,从而失去作用。在目的蛋白结构未知的情况下,可以分别于两端构建标记的表达克隆,以确定哪个更有效。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以参看义翘神州蛋白标签:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag[/font][/font]

  • 玻璃融合枪

    我们要用玻璃融合枪,来融合安培瓶,就是那种玻璃房用的,有乙炔和氧气导管,燃烧的东西,不知道哪位有这东西

  • 转基因检测方法

    "20世纪70年代以来,随着生物技术的飞速发展,尤其是基因工程技术的成熟,转基因技术在农作物的改造中得到广泛运用,转基因农作物的面积越来越大。正是因为转基因品种具有他独特的优势,比如具有很强的抗病虫害能力、高产、减少劳动投入等,给种植的人带来了巨大的经济效益,也降低了成本和人的劳动。但由于转基因食品对于人体的影响,并未经受长期的检验或者有明确的论点证明,因此转基因食品遭到大多数国家及其民众的反对和质疑。将未经验证安全可靠的食品投入市场为民所食用,是极度不安全也是不负责任的做法。因此国家食品安全法指出必须对转基因食品进行标识。而且个人认为,改变传统生物进化的做法是有违进化论,以及人类生命特征发展的。基因是决定一个个体的基础,倘若基因变了,对于食用者真的就没有一丝改变么,而这发生的改变是好是坏如今依旧无法定论。因此对于转基因食品应该做出检测并贴出明确的标识。对转基因食品的检测方法,目前主要有对外源基因的检测和对外源蛋白质的检测二大类。1. 外源基因的检测现阶段对于外源基因的检测主要是对转入的外源基因进行PCR扩增,进而在做紫外检测或荧光检测。PCR技术全称“聚合酶链反应技术”,这是一种聚合反应,是在体外由引物介导的DNA聚合酶催化的,能在短时间内准确地大量复制序列。目前英格尔检测公司(ICAS)是用自己独立的实验室,通过这种方法在做转基因检测。2.蛋白质印迹法蛋白质印迹法将电泳的较高的分离能力、抗体的特异性和显色酶反应的灵敏性结合起来,是检测复杂混合物中特异蛋白质的最有力的工具之一,普遍用于分离、检测特异的目的蛋白质,灵敏度为1-5ng。它可确定一个样品中是否含有低于或超过预定限值水平的目的蛋白质,特别用于不可溶蛋白质的分析。

  • 蛋白标签类型有哪些?融合标签的优缺点介绍

    [font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]蛋白标签[/b][/url]是指与靶蛋白相连的融合蛋白(参阅什么是融合蛋白)的亚结构域或肽序列。有许多在重组蛋白生产中广泛应用的蛋白标签。蛋白标签是一种方便有效的工具,可以提高重组蛋白的溶解性、简化蛋白纯化,并提供了一种在蛋白表达和纯化过程中跟踪蛋白的简便方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]根据不同的应用,融合标签主要分为三类:表位标签、亲和标签和荧光标签。[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①表位标签往往是短肽序列,可用于免疫学应用,如[/font][font=Calibri]Western Blot [/font][font=宋体]和免疫共沉淀。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②亲和标签一般较长,可用于蛋白纯化或增加蛋白溶解度。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③荧光标签可用于活细胞和死细胞,并广泛用于影像学研究,如细胞定位和共表达实验。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]标签揭秘选择[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端还是[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端?[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选择将标签融合到目标蛋白的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端还是[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端,很大程度上取决于蛋白本身:蛋白的折叠方式,以及您选择的末端是否有功能要求。例如,如果[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端在蛋白内部折叠,那么您收到融合蛋白信号的可能性非常小;或者,如果蛋白在标签融合末端进行翻译后剪切,那么标签将从目标蛋白中移除。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]如果有资源或准备开展新型实验,最好同时克隆[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端和[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端标签的构造,从而确定最佳选择。一研究小组发现,与[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端的标签融合蛋白相比,更多的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端融合蛋白定位于目标亚细胞腔隙。但是,需要强调的是,虽然[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端标签蛋白的定位和表现往往符合预期,但并不是始终可以预测。融合蛋白定位是否正确,可通过免疫荧光进行检测;免疫印迹有助于确认融合蛋白的大小是否正确并以预期的水平表达,免疫共沉淀有助于评估融合蛋白与已知底物的相互作用方式。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]融合标签优缺点:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]优点:无需特异性蛋白即可分离目标蛋白;有时可在纯化后裂解标签;可将多个标签连接到同一蛋白上,增加其功能;避免免疫沉淀中出现抗体干扰;荧光标签可用于显示活细胞中的蛋白;多种标签供选择,适合不同的应用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点:某些标签可能会影响蛋白功能;可能需要多次尝试才能找到最佳标签位置,导致实验成本增加。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注义翘神州蛋白标签页:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag[/font][/font]

  • 原始与现代的融合!

    原始与现代的融合!

    [b][color=#cc0000]原始与现代的融合![/color][color=#cc0000][img=,640,426]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/05/202105071659085460_1684_1841897_3.jpg!w640x426.jpg[/img][/color][/b]

  • PanGIA生物技术公司融合AI与尿液活检技术,助力癌症早期检测

    随着对癌症相关研究的深入,化学治疗、靶向治疗、免疫治疗等治疗手段不断推陈出新,癌症治疗水平得到了长足的进步。而癌症患者的精准治疗离不开分子生物学及诊断技术的发展,液态活检作为新兴的检测技术在肺癌临床中的应用日趋成熟。而尿液检测是临床最常见的检测项目之一,不仅可以反映肾脏、肝脏、泌尿系统、内分泌系统等疾病状况,也可间接反映全身代谢性及循环等系统的功能。在生物医学研究中,蛋白质组学被广泛应用于生物标志物(Biomarkers)的发现和鉴定。随着技术的发展,尿液蛋白质组学分析成为备受关注的生物标志物发现研究领域之一。一方面,尿液中含有由肾脏滤过的血浆蛋白质以及由泌尿系统分泌的蛋白质,通过分析尿液中的蛋白质组成,可以了解人体健康状况和疾病状态的变化。另一方面,更重要的是,与变化较为稳定的血液蛋白组相比,尿液蛋白组能够更早期、更敏感地反映身体内由于疾病而产生的变化。再加上尿液作为一种无创可得的样本,使得尿液成为疾病诊断,尤其是早期检测的生物标志物的理想样本之一。[color=#0070c0][b]因此,尿液也被誉为寻找生物标志物的“金矿”,挖掘这个潜在金矿可能会极大地加快精准医疗的发展。[/b][/color][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/73ad66a9-8eec-4eff-be45-3c455d562e13.jpg[/img][/align][align=center]图源:PanGIA[/align]总部位于美国的生物技术公司PanGIA即将完成一个为期三年的关于前列腺癌液体活检的临床研究。同时,PanGIA公司计划启动额外的临床研究,目标是实现各种癌症类型的早期检测,所有这些研究都将由PanGIA液体活检平台提供支持。[b][color=#0070c0]PanGIA液体活检平台是什么?[/color][/b]PanGIA 是一种基于尿液的非侵入性机器学习驱动的生物分子特征液体活检平台,目前该领域还存在很大的空白。这项创新技术[b][color=#0070c0]融合了人工智能(AI)和基于尿液的液体活检技术[/color][/b],旨在[color=#0070c0][b]对癌症进行早期诊断、监测和管[/b][/color]理,从而有可能挽救无数生命。通过在全球范围内提高癌症诊断的可用性和可扩展性,[b][color=#0070c0]PanGIA液体活检平台有望改变癌症检测和治疗方式。[/color][/b]这项研究最初在2020年获得IRB(伦理审查委员会)批准并开始,招募了在美国各地进行前列腺活检的泌尿科医生。虽然研究结果尚未公布,但结果的高灵敏度和特异性催生了PanGIA生物技术公司计划进行进一步研究。[align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/487d7def-9056-4234-9d31-3f39293871af.jpg[/img][/align]该公司现在正在准备在另外10种癌症类型上开展后续研究。这些包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、肾癌、膀胱癌、结肠直肠癌、胃癌、胰腺癌、肝癌和脑癌。该公司目前正在全美范围寻找医学专业人员建立临床研究点,并将在ClinicalTrials.gov网站上列出研究结果。这项扩大的研究预计将在2024年年中启动。PanGIA公司的方法结合了分子生物学、计算生物学和机器学习的细微差别。这种结合有助于检测与疾病相关的模式,重点是对一系列疾病的非侵入性检测,这种方法的主要重点是各种癌症的早期第一阶段检测。【1】 BNN Breaking [url]https://bnnbreaking.com/breaking-news/health/pangia-biotech-to-extend-cancer-detection-studies-with-proprietary-liquid-biopsy-platform/[/url][来源:仪器信息网译] 未经授权不得转载[align=right][/align]

  • 融合标签分类:表位标签、亲和标签和荧光标签的区别

    [font=宋体]在生物学研究中,融合标签作为一种强大的工具,广泛应用于蛋白质纯化、定位和功能分析等方面。而在众多的融合标签中,表位标签、亲和标签和荧光标签是三种常见的分类。它们各自具有独特的特性和应用,为生物学研究提供了便利。表位标签主要用于蛋白质的检测和识别,通过特定的抗体与表位结合,实现对目标蛋白质的精准定位。亲和标签则依赖于其与特定配体的亲和力,用于蛋白质的纯化和分离。荧光标签则以其独特的发光性质,为蛋白质在细胞内的定位和动态变化提供了直观的观察手段。本文将深入探讨这三种标签的区别及其在各自领域的应用。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]为什么要考虑融合标签?融合标签的优缺点:[/font][/b][font=宋体]优点:[/font][font=宋体]①无需特异性蛋白即可分离目标蛋白[/font][font=宋体]②有时可在纯化后裂解标签[/font][font=宋体]③可将多个标签连接到同一蛋白上,增加其功能[/font][font=宋体]④避免免疫沉淀中出现抗体干扰[/font][font=宋体]⑤荧光标签可用于显示活细胞中的蛋白[/font][font=宋体]⑥多种标签供选择,适合不同的应用[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]缺点:[/font][font=宋体]①某些标签可能会影响蛋白功能[/font][font=宋体]②可能需要多次尝试才能找到最佳标签位置,导致实验成本增加[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]标签揭秘:表位标签、亲和标签和荧光标签[/font][font=宋体][/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]融合标签主要分为三类,适用于不同的应用:表位标签、[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/affinity-tag][b]亲和标签[/b][/url]和荧光标签。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]表位标签往往是短肽序列,可用于免疫学应用,如[/font] [font=Calibri]Western Blot [/font][font=宋体]和免疫共沉淀。[/font][/font][align=center][font=宋体] [/font][img=表位标签抗体+序列,534,481]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403051443476642_6751_5907840_3.png!w534x481.jpg[/img][/align][font=宋体]亲和标签一般较长,可用于蛋白纯化或增加蛋白溶解度。[/font][align=center][font=宋体] [/font][img=亲和标签抗体+序列,500,284]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403051444164170_2397_5907840_3.png!w500x284.jpg[/img][/align][font=宋体]荧光标签可用于活细胞和死细胞,并广泛用于影像学研究,如细胞定位和共表达实验。[/font][align=center][img=荧光标签抗体+序列,537,191]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403051444342533_295_5907840_3.png!w537x191.jpg[/img][/align][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]标签揭秘选择[/font] [font=Calibri]C [/font][font=宋体]端还是 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端?[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]选择将标签融合到目标蛋白的[/font] [font=Calibri]C [/font][font=宋体]端还是 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端,很大程度上取决于蛋白本身:蛋白的折叠方式,以及您选择的末端是否有功能要求。例如,如果 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端在蛋白内部折叠,那么您收到融合蛋白信号的可能性非常小;或者,如果蛋白在标签融合末端进行翻译后剪切,那么标签将从目标蛋白中移除。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]如果您有资源或准备开展新型实验,最好同时克隆[/font] [font=Calibri]C [/font][font=宋体]端和 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端标签的构造,从而确定最佳选择。一研究小组发现,与 [/font][font=Calibri]N [/font][font=宋体]端的标签融合蛋白相比, 更多的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端融合蛋白定位于目标亚细胞腔隙。但是,需要强调的是,虽然 [/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]端标签蛋白的定位和表现往往符合预期,但并不是始终可以预测。[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b]融合蛋白[/b][/url]定位是否正确,可通过免疫荧光进行检测;免疫印迹有助于确认融合蛋白的大小是否正确并以预期的水平表达,[url=https://cn.sinobiological.com/services/ip-co-ip-service][b]免疫共沉淀[/b][/url]有助于评估融合蛋白与已知底物的相互作用方式。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag][b]蛋白标签[/b][/url]详情可以查看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 融合创新,质领未来丨第七届检验检测产业峰会在苏州成功举办

    我要测网讯 4月19日,以“融合创新,质领未来”为主题的第七届检验检测产业峰会在苏州市成功举办。本届产业峰会由中国认证认可协会指导,我要测网、南京市产品质量监督检验院(南京市质量发展与先进技术应用研究院)及中国认证认可协会检测分会联合举办,来自检验检测的管理者、学者、专家和企业家等400余人围绕数字化、智能化等检验检测关注的话题,深入探讨新形势下,检验检测行业高质量发展大计。检验检测作为国家质量基础设施的重要组成部分,是国家重点支持发展的高技术服务业、科技服务业和生产性服务业。本次大会重点聚焦数字化、智能化、能力验证、半导体、建筑材料、食品等话题深入探讨了新形势下如何通过创新发展,来推动检验检测行业高质量、高效率的可持续发展。[align=center][img=会议现场.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/d258267e-5655-4703-912e-06801fed9099.jpg[/img][/align][align=center]会议现场[/align][align=center][img=周琦秘书长.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/88b9bd6d-58c1-480b-9bf8-c79f1871bb39.jpg[/img][/align]CCAA科学技术委员会秘书长兼检测分会副会长周琦先生担任了本次会议上午的主持工作。[align=center][img=中国认证认可协会常务副会长兼秘书长黄继先.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/d74837e7-cfac-4995-85b0-da6de8435c58.jpg[/img][/align]会议伊始,中国认证认可协会常务副会长兼秘书长黄继先先生作为指导单位致辞。黄秘书长首先代表本次会议的指导单位,对第七届检验检测产业峰会的召开表示热烈祝贺,并预祝活动成功。肯定了本次年会和峰会的主题,“融合创新质领未来”,重点关注数字化、智能化等议题,这些话题与当前时代发展的主题和行业焦点紧密结合。同时他回顾了中国检验检测事业的成长历程及其在各个产业中的重要性,强调了行业协作与自律对于未来发展的重要性。检验检测产业的前沿趋势,探讨如何通过数字化、智能化技术推动产业升级。[align=center][img=南京质检院周院长.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/63558419-3280-4fd8-88c0-f4172802d24a.jpg[/img] [/align][align=center]南京市产品质量监督检验院(南京市质量发展与先进技术应用研究院)院长 周骏贵[/align]南京市产品质量监督检验院院长周骏贵先生作为主办单位代表以“检测科技融合创新助力机构竞争力提升”为主题进行了精彩分享。他从行业发展的问题和难点出发,就如何融合创新助力机构竞争力提升这个话题提出了以下四点观点。第一,创新体制机制,增挂科研院所,打造创新高地,提升原始创新能力;第二,超前部署,打造软硬一体化服务平台,提升技术引领能力;第三,技术需求驱动,应用场景导向,提升关键技术攻关能力;标准创新,推动成果转化应用,提升科技产业化能力。他重点就内部、外部、绿色化、数智化等方面详细分析了融合提升效能的方法路径。最后他表示无论是内部创新,还是外部创新,都要顺应产业的发展,科技创新的需求,才能更好的发展。[align=center][img=中国国检测试控股集团股份有限公司副总经理张永贵.jpg,700,466]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/97f63fea-c7b6-42c0-8031-944ec525312a.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:检验检测领域的数字化实践及启示[/align][align=center]中国国检测试控股集团股份有限公司副总经理 张永贵[/align]中国国检测试控股集团股份有限公司副总经理张永贵先生在主题为“检验检测领域的数字化实践及启示”的报告中表示从检验检测领域数字化现状来看,在优化生产关系和发展生产力这两个方面,尤其主要聚焦降本增效、管理水平提升、不断在局部扩展应用场景,提升客户的体验和满意度等。从双碳平台、材料数据库、水泥工厂智能化实验室系统、建筑结构云监测系统、智慧水库信息化系统、入河排口污染溯源及动态管理项目等实践案例进行具体分享,他表示未来国检集团也将把数字化的投入和力量用在发展新质生产力上。[align=center][img=胜科纳米(苏州)股份有限公司董事长 李晓旻.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/af788bc3-b2ce-4847-9b92-583b5149b22f.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:半导体分析测试行业发展趋势及前景[/align][align=center]胜科纳米(苏州)股份有限公司董事长 李晓旻[/align]半导体第三方检测分析市场在半导体产业链专业化分工浪潮下应运而生。胜科纳米(苏州)股份有限公司董事长李晓旻先生带来了主题为“半导体分析测试行业发展趋势及前景”的报告,与大家共同研讨半导体行业周期性发展规律及应对策略。重点阐述了半导体行业周期性发展规律及应对策略,深入剖析了半导体产业未来主流发展趋势、Labless商业模式的企业实践与市场验证,并且呼吁半导体企业敬畏行业周期,摒弃行业内卷,聚焦增量市场,加强科技创新与人才培养,把握市场先机。他指出,在当前半导体行业快速发展的大趋势下,整个行业正经历着跌宕的周期性调整,谁能从行业周期性规律中提高预见性,聚焦增量市场,谁就能把控新的价值增长点,赢得先机。[align=center][img=上海建科检验有限公司 党委副书记、总经理 李维涛.jpg,700,466]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/672a6d14-413b-436f-9fd1-358521f225bf.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:检验检测数字化转型在建设工程领域的思考与探索[/align][align=center]上海建科检验有限公司党委副书记、总经理 李维涛[/align]在主题为“检验检测数字化转型在建设工程领域的思考与探索”的演讲中,上海建科检验有限公司的党委副书记兼总经理李维涛先生,基于当前工程检测行业的特性和现状,深入探讨了针对建设工程检验检测领域数字化转型的策略、手段和途径。他同时还探讨了建立数字化实验室的概念,并提出了一套具体的数字化实验室建设规划。此外,他还针对几个具有代表性的实验室场景进行了数字化改造的实际操作分享。[img=上海程析智能科技有限公司 总经理 黄华.jpg,700,466]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/1efda85e-db87-4a36-84ec-442076673003.jpg[/img][align=center]报告主题:数智实验室,检测行业的新质生产力基座[/align][align=center]上海程析智能科技有限公司总经理 黄华[/align]上海程析智能科技有限公司的总经理黄华先生在主题为“数智实验室,检测行业的新质生产力基座”的报告中阐述了他对于检测行业未来发展的见解,他提出的核心观点是利用数字化技术来打破信息壁垒,实现整个检测生态系统的高效协同。黄华先生强调,通过构建中央指挥中心,可以促进各部门之间的信息流通,实现检测与委托的无缝连接,并提供一体化的服务,不仅可以增强企业的业务扩展能力,还能推动产业升级,从而为整个产业创造更多价值。黄华先生还指出,当前检测机构的试验设备和信息化进程大体上经历了三个阶段:单设备运行、一体化检测工位、物资质量检测综合管控平台,每一个阶段都有其显著特征,而随着物联网、人工智能、大数据等现代信息技术的不断进步,检测机构和实验室将逐步向数字化和智能化转型。[align=center][img=建科股份新经济集团常安城市公共安全技术有限公司副总经理 陈达虎.jpg,700,466]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/1e8e6bd1-5569-4026-9786-3e8cc7ad226b.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:智慧化监测赋能城市基础设施检测新航道[/align][align=center]建科股份新经济集团常安城市公共安全技术有限公司副总经理 陈达虎[/align]建科股份新经济集团常安城市公共安全技术有限公司副总经理陈达虎先生带来主题为“智慧化监测赋能城市基础设施检测新航道”的报告。他表示从检验检测开始开始出发,很多城市公共安全存在着风险情况,主要是在于燃气爆炸、房屋倒塌、桥梁、城市内涝等,同事随着城市公共基础设施建设的年限周期越来越长,这些问题会突出,城市安全发展市是国家和社会的关注的重点,近两年在燃气跟内涝的事故频发,建立整个城市的安全监测智能化体系非常有必要。[align=center][img=华测检测认证集团股份有限公司集团副总裁,建筑工程及工业服务事业部总裁曾啸虎.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/f51bf185-c941-414b-a838-88a5d7a841f2.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:通过华测检测的数字化实践展望TIC机构数字化创新的需求和路径[/align][align=center]华测检测认证集团股份有限公司集团副总裁,建筑工程及工业服务事业部总裁 曾啸虎[/align]市场环境要求企业采用更高效的生产方式,企业经营要从信息化走向自动化、智能化。华测检测认证集团股份有限公司集团副总裁曾啸虎先生在主题为“通过华测检测的数字化实践展望TIC机构数字化创新的需求和路径”的报告中从华测以创新为驱动力的数字化建设、华测对数字化的理解和实践、对TIC机构数字化的思考等展开分享。他表示数字化不是一蹴而就,也无法通过一次性购买来实现;数字化需要多种要素的加持、自上而下的规划及自下而上地务实地演进;华测在数字化方面做了一些工作并取得了成果。同时,他强调数字化的成长需要全员创新的环境,以及企业开放透明的氛围,最后,他提出了一系列建议供业界同仁参考。[align=center][img=中金国际张亮.jpg,700,466]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/8cbe5a0b-b4a5-4e83-a8e7-94e36f8d6c07.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:能力验证在行业仪器应用趋势分析、实验室检测质量控制中的应用[/align][align=center]北京中实国金国际实验室能力验证研究有限公司副总经理/高级工程师 张亮[/align]能力验证被广泛认为是证明实验室能力的重要工具,其通过评价参加实验室在实验室间比对过程中的表现,能够证明实验室的能力和水平,也能识别潜在或新出现的问题。北京中实国金国际实验室能力验证研究有限公司副总经理/高级工程师张亮先生带来主题为“能力验证在行业仪器应用趋势分析、实验室检测质量控制中的应用”的报告,他重点分享了中实国金多年参加能力验证检验检测机构的基础数据,通过多维度数据分析和规律研究,总结和分析出检测机构所使用仪器情况的相关变化趋势,助力更多的检测机构能够利用能力验证结果持续提升机构检验检测水平。[align=center][img=中广测副主任曾莉.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/bb236cf6-f3f2-4793-b176-c4b7f27cd0bb.jpg[/img][/align]下午的会议由广东省科学院测试分析研究所(中国广州分析测试中心)副所长(副主任)/高级工程师曾莉女士主持。[align=center][img=中国认证认可协会傅博士.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/8ea3ea10-a3ef-45d0-92de-16c1a28165d7.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:检验检测报告规范性研究[/align][align=center]中国认证认可协会 技术专家/博士 傅斌友[/align]检验检测是高新技术服务业,也是生产性服务业和科技服务业,其中检验检测报告于检测机构而言至关重要。中国认证认可协会技术专家/博士傅斌友先生在本次会议上作了主题为“检验检测报告规范性研究”的报告,就检验检测报告的规范性研究,从其研究背景、方法以及结果层面展开了详细剖析,并发布了食品行业、建筑材料行业、轻工行业及纺织服装行业的检验检测报告格式模板。同时他表示欢迎检验检测机构同仁能够与协会合作,共同研制制定剩下的其他行业检验检测报告模板,为咱们检验检测行业的健康发展、高质量发展共同发力。[align=center][img=北京信立方科技发展股份有限公司我要测网事业部 李晨晖.jpg,700,466]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/54eaa566-a430-45d6-a3d8-68d07658af61.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:从网络大数据看第三方检测市场发展[/align][align=center]北京信立方科技发展股份有限公司我要测网事业部 李晨晖[/align]北京信立方科技发展股份有限公司我要测网事业部李晨晖先生作为主办方代表,作了主题为“从网络大数据看第三方检测市场的发展”的报告。李晨晖先生结合官方数据及我要测网平台大数据进行分享,有针对性的提出我要测网的解决方案。在行业新发展机会中,他表示低空经济技术复杂程度高,检测标准更为严格。在此背景下,国内低空经济产业端布局加速,逐渐步入商业化落地阶段,第三方检测行业有望受益。未来,我要测网将继续服务好行业同仁,与第三方优秀的检测机构共同携手助力检验检测行业高质量发展。[align=center][img=德国莱茵TUV大中华区产品服务事业群副总裁 夏波.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/0b0c0846-7204-4aa4-b7a1-451167ee2d5c.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:TIC机构助力中国新兴产业跨越“绿色壁垒”[/align][align=center]德国莱茵TUV大中华区产品服务事业群副总裁 夏波[/align]德国莱茵TUV大中华区产品服务事业群副总裁夏波先生带来了主题为“TIC机构助力中国新兴产业跨越'绿色壁垒'"的报告中表示”在当今全球供应链和贸易格局发生深刻变革的时代,中国企业面临着日益严峻的环境友好型标准,即所谓的“绿色壁垒”。这些障碍给企业带来了多方面的挑战,包括经营复杂性的提升、对技术和创新需求的提升、成本的压力增加以及供应链管理的复杂性加大。为了应对这些挑战,企业必须采取主动策略以改善其产品的环境性能,并在海外建立生产设施以分散风险。德国莱茵TUV,凭借其专业能力和全球资源,为中国企业提供支持,协助它们提升产品品质、拓展国际市场,并加强其国际竞争力,进而成功克服绿色壁垒,迈向可持续发展的道路。[align=center][img=上海微谱检测科技集团股份有限公司总裁 贾梦虹.jpg,700,466]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/7db191d8-936c-47ae-b221-666b6e352012.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:技术型检测机构的发展与实践分享[/align][align=center]上海微谱检测科技集团股份有限公司总裁 贾梦虹[/align]新材料产业被纳入国家战略性新兴产业计划,位列七大战略新兴产业之中,并且在“中国制造2025”规划中,新材料是十个关键发展方向之一。上海微谱检测科技集团股份有限公司总裁贾梦虹先生分享了主题为“技术型检测机构的成长之路与实践经验”的报告,就近年来的公司快速发展经验进行分享。贾梦虹先生主要以微谱的创立及成长历程和实际案例为例,介绍了在新材料和化学品领域提供的技术服务、分析方法的开发、成分分析服务以及失效分析服务等。[align=center][img=必维国际检验集团 消费品事业部销售运营总监陆欣.jpg,700,466]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/81f08b44-0900-420d-9bc4-e0c3194d1c40.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:[/align][align=center]聚焦TIC行业—让设备管理搭乘数字化精益专列[/align][align=center]必维国际检验集团消费品事业部销售运营总监 陆欣[/align]必维国际检验集团消费品事业部销售运营总监陆欣女士在主题为TIC行业的可持续发展,解决设备投资的关键问题,需要将设备的整个生命周期纳入到企业的发展过程中,从购买到维护,再到最终的升级或替换。通过这种方式,可以确保设备投资与企业的长期目标和战略保持一致。要实现这一目标,首先需要对企业内部与设备投资相关的流程进行全面梳理,确保信息流和决策过程的顺畅。接下来,可以通过引入数字化管理工具和方法,利用实时数据监控和分析来优化设备使用效率,预测维护需求,减少故障时间,从而全面提升生产效率。通过这种整合和数字化的方法,不仅能够提高单个设备的性能,还能在整个生产系统中实现协同效应,为企业的持续增长和竞争力提升奠定坚实的基础。[align=center][img=广电计量检测集团股份有限公司总经理助理、数据科学分析与评价事业部总经理 于莉莉.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/2f4ccb19-f0df-4a02-b874-b845775cc67a.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:“以数赋能乘数而上”—第三方检测机构如何激活数据资产[/align][align=center]广电计量检测集团股份有限公司总经理助理、数据科学分析与评价事业部总经理 于莉莉[/align]在当今大数据时代,广电计量检测集团股份有限公司总经理助理、数据科学分析与评价事业部总经理于莉莉女士在主题为“'以数赋能乘数而上'—第三方检测机构如何激活数据资产”的报告中全方位解析了第三方检测行业如何借力数据资产,实现检测效能提升、业务模式创新以及行业整体转型升级的战略布局。详尽阐述建立符合行业特性的数据治理体系的重要性,强调从数据的源头采集开始,通过科学有效地存储、处理和分析,开展数据管理评估与数据安全测试,全面激活沉睡的数据资产,将其转化为提升检测准确率和效率的有力工具,并通过深度挖掘数据价值,预见潜在风险,创新个性化服务方案。[align=center][img=深圳市计量质量检测研究院主任高级工程师朱雨田.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/202404/wycimg/6687f6e8-e51c-4924-ae26-bfea833a428a.jpg[/img][/align][align=center]报告主题:食品检测行业现状及智能检测需求思考[/align][align=center]深圳市计量质量检测研究院主任/高级工程师 朱雨田[/align]“食品安全检测直接关系到公众健康和社会稳定,食品检测行业的竞争也是日益激烈,转型势在必行,任重道远,”深圳市计量质量检测研究院主任/高级工程师朱雨田先生在主题为“食品检测行业现状及智能检测需求思考”的报告中说道。我国的食品安全检测市场广阔,行业发展快速,但由于食品检测主要依赖人工,人均产出不高,自动化的水平有限,尽管对检测质量的要求极高,但行业的发展依然受到了阻碍。因此,为了推动食品检测实验室的未来发展,有必要引入高度集成、可定制的自动化、智能化和信息化解决方案,这将是提升食品检测效率和质量的关键所在。第七届检验检测产业峰会在苏州的成功举办,为检验检测行业提供了一个重要的交流与合作平台。 本次峰会议题围绕着检测认证行业的数字化、智能化创新路径和手段展开,深入分析了在检测认证领域内实施数字化和智能化的实际操作案例,并就检测认证机构如何适应数字化时代的挑战和机遇进行了探讨。来自政府、产业、学术、研究和应用领域的代表们在峰会上互动交流,分享心得,激发灵感,共同努力为检测认证行业的优质发展提供集体的解决方案。在4月18日的举办的仪器及检测3i奖颁奖晚会上,2023年度TIC优秀第三方检测机构之“坚如磐石奖”与“行业先锋奖”重磅公布![url=https://www.woyaoce.cn/news/500071.html][color=#c00000]点击查看详情[/color][/url][size=14px][color=#707d8a][ 来源:我要测 ] 未经授权不得转载[/color][/size][size=14px][color=#707d8a][i]编辑:张圣斌[/i][/color][/size]

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    各位前辈好,有谁做过融合蛋白的还原性毛细管电泳分析吗?做单抗的话分离效果很好,但是做单链融合蛋白的就很少,烦请赐教,不胜感激

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    [align=center][font=黑体][size=29px]近红外与表面增强拉曼光谱融合技术快速检测花生油中黄曲霉毒素B[/size][/font][font=黑体][sub][size=29px]1[/size][/sub][/font][/align][font=宋体][size=24px]一、研究背景[/size][/font][font=&][size=18px]在黄曲霉毒素B[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px](aflatoxinB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px],AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px])是一种典型的真菌毒素,它是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物。AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]是目前已知的化学物质中致癌性最强的一种,主要对肝脏功能造成严重损伤,故AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]是国家市场监督管理总局指定的食品安全必检指标之一。油料作物(如花生、玉米等)由于其含水率高,在储存与加工过程中容易发生霉变,从而受到AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]的污染。因此,相关部门需要加大对粮油食品中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]的检测力度,防止食品安全事件的发生。[/size][/font][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/08669a2c-6a78-45e4-8630-e00658616895.jpg[/img][/align][font=&][size=18px]目前,在食品真菌毒素的光谱快速、无损检测应用中仍采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]或SERS单一技术手段。从理论角度来看,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]反映的是电偶极矩变化引起的振动,SERS反映的是分子极化引起的振动,两种光谱信息在分子信息表达上具有互补性。因此,有必要将两种光谱信息进行融合,实现信息互补,以提高检测精度[/size][/font][font=&][size=18px]。[/size][/font][font=&][size=18px]本研究以花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]为检测指标,分别采集其[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]和SERS光谱,使用上海如海光电光谱仪进行测试。[/size][/font][font=宋体][size=32px]2、 [/size][/font][font=宋体][size=24px]研究[/size][/font][font=宋体][size=24px]内容[/size][/font][font=&][size=18px]2.1光谱数据分析结果[/size][/font][font=&][size=18px]以含有不同浓度AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]的5条代表性的花生油待测样本的SERS光谱如图1A所示。图1A中主要的SERS特征谱带及其归属为:597cm[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?1[/size][/sup][/font][font=&][size=18px](C-O伸缩振动)、742cm[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?1[/size][/sup][/font][font=&][size=18px](C-H面外弯曲振动)、835cm[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?1[/size][/sup][/font][font=&][size=18px](C-H伸缩振动)、1249cm[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?1[/size][/sup][/font][font=&][size=18px](C-H面内弯曲振动)、1343cm[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?1[/size][/sup][/font][font=&][size=18px](CH[/size][/font][font=&][sub][size=18px]3[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]变形振动)、1486cm[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?1[/size][/sup][/font][font=&][size=18px](C=C伸缩振动)和1557cm[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?1[/size][/sup][/font][font=&][size=18px](C-C伸缩振动)。由于SERS光谱区域(500~1800cm[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?1[/size][/sup][/font][font=&][size=18px])信噪比高且包含了主要的特征谱带,故本研究中将此区域用于AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]的定量分析。含有不同质量浓度AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]的5条代表性的花生油待测样本的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱如图1C所示。图1C中[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]特征谱带及其归属为:930~970nm(CH[/size][/font][font=&][sub][size=18px]2[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]与CH[/size][/font][font=&][sub][size=18px]3[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]一阶倍频伸缩振动)、1090~1130nm(C-H伸缩振动)、1210~1240nm(CH[/size][/font][font=&][sub][size=18px]2[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]二阶倍频伸缩振动)和1270~1300nm(C=O二阶倍频伸缩振动、C=O合频振动及N-H伸缩振动)。AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]特征谱带有着密切关系,这是由于花生油中的蛋白质、碳水化合物以及脂肪酸易受到AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]的影响,从而影响分子的振动。无论是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]还是SERS光谱,在光谱采集过程中带入干扰信息往往是无法避免的,故需要对光谱数据进行预处理。经AIRPLS基线校正、MSC光散射校正、S-G平滑以及Min-Max归一化处理之后的SERS与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱分别如图1B与1D所示,与原始光谱(图1A与1C)对比发现,预处理后的SERS和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱的基线漂移得到了抑制,光谱信号更加平滑,为后续的定量分析起到了积极的作用。[/size][/font][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/1eb35b76-6822-4889-838f-8afd630f5f9a.jpg[/img][/align][font=&]图1.含有不同质量浓度AFB1的花生油待测样本的SERS与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱[/font][align=center][/align][font=&][size=18px]2.2HSIC-VSIO算法参数设置合理性验证[/size][/font][font=&][size=18px]对HSIC-VSIO算法参数设置合理性进行验证:在设置不同的参数情况下,分别对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]和SERS光谱数据筛选特征变量,并将每次筛选的特征变量进行融合建立PLSR模型,记录RMSEC、RMSEP、和RPD值进行对比分析。[/size][/font](1) [font=&][size=18px]WBMS中二值矩阵的行的数量M[/size][/font][font=&][size=18px]首先,将σ的值分别设置为10% 然后,将M的值分别设置为1000、1500、2000和2500进行对比分析。由表1中的运行结果可知,模型的性能受M的影响并不大。但是,如果M的值越大,模型的计算量将显著增大,综合考虑模型精度与计算量,将M设置为1000是合理的。[/size][/font][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/7605c355-04cb-4982-be30-de305d979bdf.jpg[/img][/align][font=&][size=18px](2)从所有模型中挑选出具有较小RMSECV值的模型的比例σ首先,将M的值设置为1000 然后,将σ的值分别设置为10%、20%、30%和40%进行对比分析。由表2中的运行结果可知,当σ=10%时,模型的性能最优。具体表现为,RMSEC和RMSEP值较小,R2C、R2P和RPD值较大,故将σ设置为10%是合理的。[/size][/font][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/9111abc1-e636-4844-a71f-2e78ee1791dc.jpg[/img][/align][font=&][size=18px]2.3各方法检测结果[/size][/font][font=&][size=18px]将[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱数据、SERS光谱数据、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱直接融合数据以及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱特征层融合数据分别构建PLSR多元校正模型检测花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量。PLSR建模过程中,最佳隐变量数(latentvariables,LVs)由5折交互验证产生的RMSECV值所确定。各方法的检测结果如表3所示。由表3可知,基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱数据定量检测结果如下:LVs=10,RMSEC=0.2812,=0.9533,RMSEP=0.3447,=0.9211,RPD=3.5601,花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量PLSR预测值与真实值之间的关系如图2A所示。基于SERS光谱数据定量检测结果如下:LVs=8,RMSEC=0.2105,R[/size][/font][font=&][sup][size=18px]2[/size][/sup][/font][font=&][sub][size=18px]c[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]=0.9726,RMSEP=0.2349,R[/size][/font][font=&][sup][size=18px]2[/size][/sup][/font][font=&][sub][size=18px]p[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]=0.9689,RPD=5.6705,花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量PLSR预测值与真实值之间的关系如图2B所示。基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱直接融合数据定量检测结果如下:LVs=10,RMSEC=0.1923,R[/size][/font][font=&][sup][size=18px]2[/size][/sup][/font][font=&][sub][size=18px]c[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]=0.9836,RMSEP=0.2117,R[/size][/font][font=&][sup][size=18px]2[/size][/sup][/font][font=&][sub][size=18px]p[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]=0.9703,RPD=5.8026,花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量PLSR预测值与真实值之间的关系如图2C所示。基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱特征层融合数据定量检测结果如下:LVs=9,RMSEC=0.1569,R[/size][/font][font=&][sup][size=18px]2[/size][/sup][/font][font=&][sub][size=18px]c[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]=0.9908,RMSEP=0.1827,R[/size][/font][font=&][sup][size=18px]2[/size][/sup][/font][font=&][sub][size=18px]p[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]=0.9854,RPD=8.2761,花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量PLSR预测值与真实值之间的关系如图2D所示。由HSIC-VSIO筛选的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱特征变量如图2E所示,其中部分特征变量覆盖了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]特征谱带930~970、1090~1130、1210~1240和1270~1300nm。由HSIC-VSIO筛选的SERS光谱特征变量如图2F所示,其中部分特征变量覆盖SERS特征谱带597、742、835、1249、1486和1557cm[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?1[/size][/sup][/font][font=&][size=18px]。[/size][/font][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/9f15cd6f-689e-4289-869c-2ad5ca9def43.jpg[/img][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/33e84c86-41e2-4fa3-9472-736d08686ce1.jpg[/img][font=&]图2.含花生油中[/font][font=&]AFB1含量PLSR预测值与真实值之间的关系及HSIC-VSIO筛选的光谱特征变量[/font][font=&][size=18px]2.4各方法检测结果对比分析[/size][/font][font=&][size=18px]各方法所建[/size][/font][font=&][size=18px]PLSR模型评价指标的变化趋势如图[/size][/font][font=&][size=18px]3[/size][/font][font=&][size=18px]所示[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]显然[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]由[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱数据构建的PLSR模型预测性能最差[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]主要在于花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量低[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]分子量小[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]内部含氢基团振动在近红外区域吸收的能量低[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]对应的光谱信号弱[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]影响了其检测精度。相较于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱数据构建的PLSR模型[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]由SERS光谱数[/size][/font][font=&][size=18px]据[/size][/font][font=&][size=18px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱直接融合数据以及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱特征层融合数据所构建的PLSR模型的预测性能均获得了提高。以[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱数据构建的PLSR模型的预测性能作为基准[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]SERS光谱数据、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱直接融合数据以及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱特征层融合数据所构建的PLSR模型的RMSEC分别降低了25.14%、31.61%和44.20% 分别提高了2.02%、3.18%和3.93% RMSEP分别降低了31.85%、38.58%和47.01% 分别提高了5.19%、5.34%和6.98% RPD分别提高了59.28%、62.99%和132.47%。综上所述[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]由SERS光谱数据构建的PLSR模型的预测性能明显提高[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]主要在于SERS技术通过增强基底Q-SERS获得拉曼增强效应使得花生油中痕量AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]的信号获得了放大[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]从而提高了其检测精度。相较于采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]或SERS光谱单一检测技术[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]将[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱与SERS光谱直接融合后[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]实现了光谱信息的互补[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]有助于检测精度的进一步提高。然而[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]光谱直接融合数据中包含大量的冗余甚至干扰变量[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]采HSIC-VSIO分别对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱筛选特征变量[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]然后将筛选得到的特征变量进行融合并构建PLSR模型[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]其检测精度获得了较大的提高。[/size][/font][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/42e90d75-2d2f-4624-9bd4-c9af44f0231a.jpg[/img][/align][align=center][font=&]图3.各方法所建[/font][font=&]PLSR模型评价指标变化趋势[/font][/align][font=&][size=18px]2.5真实样本检测分析结果[/size][/font][font=&][size=18px]从青岛普瑞邦生物工程有限公司购买一批含有AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]的花生油样本(AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量范围为:1.0×10[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?5[/size][/sup][/font][font=&][size=18px]~1.0×10[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?3[/size][/sup][/font][font=&][size=18px]μg/mL)。每个样本分别采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱特征层融合数据构建的PLSR模型(以下简称光谱特征融合方法)以及标准方法(HPLC)检测AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]检测结果如表4所示。将两种方法的检测结果做双侧配对t检验[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]结果表明两者无显著性差异(P=0.840.05)。根据检出限的计算公式3S[/size][/font][font=&][sub][size=18px]0[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]/K(S[/size][/font][font=&][sub][size=18px]0[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]为多个空白样本响应值标准差[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]K为校正曲线的斜率)[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]可估算得到光谱特征融合方法对AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量的检出限为5.27×10?6μg/mL。欧盟与中国设置的花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]最大残留限量分别为2.0μg/kg和20μg/kg。为了与上述标准进行对比[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]可将溶液(花生油+AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px])密度设为1g/mL[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]从而实现将5.27×10[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?6[/size][/sup][/font][font=&][size=18px]μg/mL粗略地转换为5.27×10[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?3[/size][/sup][/font][font=&][size=18px]μg/kg。故本研究提出的光谱特征融合方法可满足对花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量是否超标的定量检测。[/size][/font][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/22409e39-3d37-41e2-8440-29656a2cbb52.jpg[/img][/align][font=宋体][size=32px]3、 [/size][/font][font=宋体][size=24px]结论[/size][/font][font=&][size=18px]本研究提出了一种基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱特征层融合数据构建PLSR模型实现花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]快速、高精度检测的方法。与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]光谱数据、SERS光谱数据以及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱直接融合数据构建的PLSR模型相比[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱特征层融合数据构建的PLSR模型具有最佳的预测性能:RMSEC=0.1569[/size][/font][font=&][size=18px],R[/size][/font][font=&][sup][size=18px]2[/size][/sup][/font][font=&][sub][size=18px]c[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]=0.9908[/size][/font][font=&][size=18px], [/size][/font][font=&][size=18px]RMSEP=0.1827[/size][/font][font=&][size=18px],R[/size][/font][font=&][sup][size=18px]2[/size][/sup][/font][font=&][sub][size=18px]p[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]=0.9854[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]RPD=8.2761。同时[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]将本研究方法与标准方法分别检测真实的花生油样本中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]结果表明两者的检测性能无显著性差异(P=0.840.05)[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]本研究方法的检出限可换算[/size][/font][font=&][size=18px]为[/size][/font][font=&][size=18px]5.27×10[/size][/font][font=&][sup][size=18px]?3[/size][/sup][/font][font=&][size=18px]μg/kg[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]远远低于欧盟与中国设置的花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]最大残留限量2.0μg/kg和20μg/kg。综上[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]实验结果表明本研究方法可实现花生油中AFB[/size][/font][font=&][sub][size=18px]1[/size][/sub][/font][font=&][size=18px]含量的快速、高精度定量检测[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]验证了[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱融合的可行性与有效性[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px]尤其是经特征变量筛选后[/size][/font][font=&][size=18px],[/size][/font][font=&][size=18px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]与SERS光谱数据在特征层的融合能够最大限度地提高模型的检测精度。[/size][/font][font=宋体][size=24px]文献来源[/size][/font][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/64112a19-ce4a-45e0-b9bc-bfdc99d92d37.jpg[/img][font=&][size=24px]四、产品推荐[/size][/font][align=center][size=24px]RMS2[/size][size=24px]000[/size][size=24px]微型[/size][size=24px]拉曼光谱仪[/size][/align][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/6b384294-8350-4111-b126-03e47a63b5f8.jpg[/img][/align][font=&][size=18px]1、产品简介[/size][/font][font=&][size=18px]RMS2000(RamanMinimalSystem)是一款微型的785nm同轴共聚焦拉曼光谱仪,其采用全空间光设计,优化散热接口,采用N.A0.11数值孔径激发采集光路。配置超短焦、线扫描、浸入式探头,支持Windows、Linux和Windows多种操作平台和主控系统,随机配备手机端(Andorid)和电脑端采集分析软件。具备非凡的分辨率、灵敏度、穿透能力和抑制荧光干扰能力。既可以单独使用也可以作为核心部件集成进拉曼自动化系统,满足科研院所[/size][/font][font=&][size=18px]、[/size][/font][font=&][size=18px]相关监管机构与企业在无机/有机材料、生物生命[/size][/font][font=&][size=18px]、[/size][/font][font=&][size=18px]化学/化工、药物分析[/size][/font][font=&][size=18px]、[/size][/font][font=&][size=18px]食品安全[/size][/font][font=&][size=18px]、[/size][/font][font=&][size=18px]刑侦鉴定[/size][/font][font=&][size=18px]、[/size][/font][font=&][size=18px]环境污染检测等研究中的需求。[/size][/font][font=&][size=18px]2、产品特点[/size][/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]体积小巧,重量轻,只有100×80×26mm和280g[/font][font=&];[/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]空间光、微型共聚焦设计,最小光斑≤30μm[/font][font=&];[/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]高分辨率(~6cm[/font][font=&][sup]-1[/sup][/font][font=&]),高抑制荧光能力,能够轻松测量高荧光样品,获取拉曼光谱[/font][font=&];[/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]高灵敏度,500ms即可实现常规化学品的拉曼光谱,最低可以检测0.3%的分析纯酒精[/font][font=&];[/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]可配置线扫式探头,可以采集4.5mm*1mm的线扫光斑,降低样品照射功率密度[/font][font=&];[/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]可配置浸入式拉曼探头,用于过程分析检测[/font][font=&];[/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]支持手机和电脑双平台,方便户外现场直接测量[/font][font=&];[/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]超低功耗,无须额外电源供电,通过USB手机可以直接实现光谱采集分析[/font][font=&];[/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]强大的软件分析功能,支持常规的HQI,峰位检索,深度学习神经网络等算法[/font][font=&];[/font][font=calibri][size=13px]? [/size][/font][font=&]可以适配显微镜组成显微共聚焦拉曼。[/font][align=center][size=24px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]Pro近红外[/size][size=24px]光纤光谱仪[/size][/align][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/cf0e8561-65ef-4168-a0ff-1241aef74ea3.jpg[/img][/align][font=&][size=18px]1、产品简介[/size][/font][font=&][size=18px] [/size][/font][font=&][size=18px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]Pro是一款制冷型近红外光纤光谱仪,结构设计小巧,光谱范围可配置[/size][/font][font=&][size=18px];[/size][/font][font=&][size=18px]分辨率高,最佳可达0.3 nm;杂散光低,~0.5%。光谱范围依据选择不同可以覆盖950-1700 nm、950-2200 nm和950-2500 nm多种配置。制冷温度可以达到-20℃。具备良好的光谱响应稳定性和重现性,适[/size][/font][font=&][size=18px]用[/size][/font][font=&][size=18px]于激光测量、近红外测量,是一款科研级的高性能光纤光谱仪。[/size][/font][font=&][size=18px]2、产品特点[/size][/font]? [font=&]分辨率高,最佳可达0.3[/font][font=&] [/font][font=&]nm[/font][font=&];[/font][font=arial][size=12px]? [/size][/font][font=&]可适配如海带销的多芯密排集束光纤,光纤插拔强度一致性≦7%[/font][font=&];[/font][font=arial][size=12px]? [/size][/font][font=&]动态范围宽、信噪比高、稳定性好[/font][font=&];[/font][font=arial][size=12px]? [/size][/font][font=&]背景噪声≦3R[/font][font=&]MS[/font][font=&]([/font][font=&]10[/font][font=&] [/font][font=&]ms积分时间[/font][font=&]);[/font][font=arial][size=12px]? [/size][/font][font=&]配置USB、串口多种通讯接口,配置24PIN交互接口,配置专有DAC和ADC,可实现配套光源的使能、强度控制和功率反馈。[/font][来源:上海如海光电科技有限公司][align=right][/align]

  • 谈低度酒产品融合市场

    低度酒产品融合消费场景,有望持续实现用户圈层扩张  调研数据显示,中国消费者在不同场景下的酒品选择有一定差异。在社交娱乐场景中,低度酒的集中度较高,兰舟和RIO两大品牌的首选比例较高 而在自饮场景下低度酒的品牌相对分散,其中RIO、贝瑞甜心和兰舟都获得了一定的认可。

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