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佰蛋白测定仪

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    求购一台粗蛋白快速测定仪,用于饲料厂检测原料,要求快速,结果准确(跟凯斯定氮仪结果比对)。

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    做了一个新工艺,做蛋白纯化的工艺,用到了铜离子(用在蛋白复性中),想在成品或原液中检测铜离子的残留,不知道哪里能做。成品样品体系:蛋白溶液蛋白浓度:0.3mg/ml缓冲液:25mM醋酸钠体系,pH4.5原液中就是蛋白浓度要高些。想测定到ppm级就可以了。

  • 蛋白浓度测定方法:技术、应用与进展

    蛋白浓度测定方法:技术、应用与进展

    [b][font=宋体]一、引言[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质浓度测定是生物化学实验中的一项基本操作,对于了解蛋白质的性质、评估实验效果以及开展生物学研究具有重要意义。本文将详细介绍蛋白浓度测定的方法、技术原理、最新进展及其在生物医学研究中的应用。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、蛋白浓度测定方法概述[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①紫外[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]可见分光光度法[/font][/font][font=宋体]原理:利用蛋白质中特定氨基酸(如酪氨酸、色氨酸)在紫外光区的吸收特性,通过测量吸光度值来计算蛋白质浓度。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]应用:适用于大多数蛋白质的测定,尤其在实验室中广泛使用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②荧光光谱法[/font][font=宋体]原理:利用荧光染料与蛋白质结合后产生的荧光光谱,通过测量荧光强度来计算蛋白质浓度。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]应用:适用于具有荧光特性的蛋白质,具有高灵敏度。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③圆二色光谱法[/font][font=宋体]原理:利用圆二色光谱分析蛋白质的构象变化,从而推算蛋白质浓度。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]应用:常用于研究蛋白质的构象变化和稳定性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④电泳法[/font][font=宋体]原理:利用电泳技术将蛋白质分离,通过测量电泳带亮度或面积来计算蛋白质浓度。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]应用:常用于蛋白质分离和纯度鉴定。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]三、进展与技术优化[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①表面增强拉曼散射([/font][font=Calibri]SERS[/font][font=宋体])技术[/font][/font][font=宋体]原理:利用金属表面增强拉曼散射效应,提高信号强度,从而提高检测灵敏度。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]应用:适用于痕量蛋白质的检测,具有高灵敏度和高分辨率。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②纳米孔测序技术[/font][font=宋体]原理:利用纳米孔测序技术对蛋白质进行测序,通过电导变化检测蛋白质序列信息。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]应用:有助于蛋白质的精准鉴定和分子结构研究。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]四、[/b][/font][b][font=宋体]实际应用案例分析[/font][/b][font=宋体] [/font][align=center][img=蛋白浓度测定案例,690,310]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/01/202401231537106869_2656_5907840_3.png!w690x310.jpg[/img][font=宋体] [/font][/align][font=宋体][font=宋体]详情可以关注义翘神州更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]蛋白资源[/b][/url]详情:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review[/font][/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

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    作者:李寅;陈凤仪;张国添;杨辉;黄玉玲;谢清春;钟鸣; (广州市番禺区中心医院;广东药学院药物研究所;广州汉方现代中药研究开发有限公司;)摘要:目的:测定厄贝沙坦在人血浆中的蛋白结合率。方法:采用HPLC法测定厄贝沙坦的浓度。采用平衡透析法测定厄贝沙坦的人血浆蛋白结合率。结果:以Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾水溶液(磷酸调pH至2.6)(45∶55)为流动相,检测波长为245 nm,血浆样品中其他成分不干扰厄贝沙坦的测定,厄贝沙坦的线性范围为0.10~10.40μg/ml,定量下限为0.10μg/ml。厄贝沙坦的低、中、高浓度的蛋白结合率分别为93.0%、91.5%、92.3%。结论:厄贝沙坦具有较强的蛋白结合率。谱图:无

  • 人血白蛋白多聚体测定为何除以2

    人血白蛋白多聚体测定法本法系用分子排阻色谱法测定人血白蛋白多聚体含量。照分子排阻色谱法(附录Ⅲ D)测定。色谱条件与系统适用性试验 用亲水硅胶高效体积排阻色谱柱(SEC,排阻极限300kD,粒度10μm),柱直径7.5mm,长60cm;以含1%异丙醇的pH7.0 0.2mol/L磷酸盐缓冲液为流动相;检测波长为280nm ;流速为每分钟0.6ml。取每1ml含蛋白质为12mg 的人血白蛋白溶液20μl,注入色谱柱,记录色谱图,人血白蛋白单体峰与二聚体峰间的分离度应大于1.5,拖尾因子按人血白蛋白单体峰计算应为0.95~1.40。测定法 取供试品适量,用流动相稀释成每1ml约含蛋白质12mg的溶液,取20μl,注入色谱柱,记录色谱图60分钟(色谱柱长60cm)。按面积归一法计算,色谱图中未保留(全排阻)峰的含量(%)除以2,即为人血白蛋白多聚体含量请教:为何除以2呢?很奇怪呀

  • 半自动凯氏定氮仪测定食品蛋白

    正在做麸皮的蛋白测定,称样约0.2g,消化时硫酸用量是20ml,用的是半自动凯氏定氮仪,加的蒸馏水为50ml, 但不知道要加多少碱,和蒸馏时间设定多少呢?做了一个加碱70ml的,但蒸馏没有生成大量沉淀,溶液的颜色依然是蓝色的。还有就是硼酸的用量10ml可以吗?正在做麸皮的蛋白测定,称样约0.2g,消化时硫酸用量是20ml,用的是半自动凯氏定氮仪,加的蒸馏水为50ml, 但不知道要加多少碱,和蒸馏时间设定多少呢?做了一个加碱70ml的,但蒸馏没有生成大量沉淀,溶液的颜色依然是蓝色的。还有就是硼酸的用量10ml可以吗?

  • 省下一万维修费的蛋白测定仪维修心得

    [align=center][font='方正小标宋简体'][size=29px][color=#000000]省下一万维修费的蛋白测定仪[/color][/size][/font][font='方正小标宋简体'][size=29px][color=#000000]维修心得[/color][/size][/font][/align][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]最近开展[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]校园学生餐营养成分检测[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]工作,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]有一项蛋白质含量的测定[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]项目[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000],[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]我们使用一台进口的自动蛋白测定仪,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]在我们配制好各种溶剂开始预实验的时候,发现我们的[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]自动蛋白测定仪[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]开机自检不能通过,仪器提示接[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]收[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]液泵传感器超时,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]泵的声音也感觉不太正常,虽然这台仪器购买时间已有5年,但使用频率并不高,没怎么出力就出问题了,工作迫在眉睫,于是我们开始了故障排查。[/color][/size][/font]1、 [font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]发现问题源头。开机自检不能通过,我们排查了传感器连接线是否断路、接[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]收[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]液管路是否堵塞、接[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]收[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]液液面是否超过最低限度等,在拆掉机器后盖使用手动模式下泵送接[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]收[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]液时发现接[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]收[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]液泵运转[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]姿态稍有异常[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000],[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]并[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]发出咯咯的声音,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]怀疑是长期未用里面没有液体,影响泵的吸合,于是手动灌注液体,但无果,于是[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]我们初步判断接[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]收[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]液泵损坏[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]了[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]。[/color][/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211021627428025_1893_5814833_3.jpeg[/img]2、 [font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]联系售后。在和工程师沟通后,工程师同样判定接[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]收[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]液泵损坏,需要更换,连泵带工时费需要九千多,我们认为价格太高,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]看结构一点都不复杂,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]可以尝试自己维修[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]一下[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000],实在修不好再找售后也不会耽误工作。[/color][/size][/font]3、 [font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]尝试自己拆泵。[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]我们卸掉各种挡板,终于看见了问题泵,拆卸虽不易,好在实验工具也算趁手,总算把泵安全拆了出来,外观没有发现问题,与吸液装置(图2)连接也没有问题,只能继续拆卸中间减速齿轮盒(图5),[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]在把[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]它[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]拆开后发现有一个塑料齿轮[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]已经[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]破损[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]裂开[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]([/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]图6大齿轮[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000])[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000],[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]导致于小转动齿轮(图6小金属齿轮)[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]失去了咬合力,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]所以[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]马达[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]时常[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]空转,我们推测更换齿轮后可能会修复好故障。[/color][/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211021627430550_601_5814833_3.jpeg[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211021627431468_6465_5814833_3.jpeg[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211021627425419_7489_5814833_3.jpeg[/img][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000] [/color][/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211021627434697_5578_5814833_3.jpeg[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211021627428960_6569_5814833_3.jpeg[/img][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000] [/color][/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211021627436888_1917_5814833_3.jpeg[/img]4、 [font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]网上定制齿轮。[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]起初本想找维修电器或五金店看是否会有这种一致的齿轮,咨询几个专业维修人员才知道找这种齿轮需要匹配内外径,齿轮数,厚度,难度太大。一筹莫展之时想到万能的淘宝,应该有人做3D打印技术,功夫不负有心人,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]我们在淘宝找到了可以定制齿轮的卖家,经过沟通后,我们把自己破损的齿轮寄给了卖家,然后就静静等待卖家发货。[/color][/size][/font]5、 [font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]尝试安装齿轮。因为塑料齿轮的内径比嵌套金属齿轮的外径稍小,无法顺利组装。我们尝试用沸水浸泡塑料齿轮通过膨胀来扩大内径,但仍不能成功组装,接着我们尝试用锉刀稍微扩大塑料齿轮的内径(扩大太多,会失去咬合力),在橡胶锤的敲击下,组装得以完成。[/color][/size][/font]6、 [font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]仪器恢复正常。在把仪器复原后重新开机自检顺利通过,在手动模式下添加接[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]收[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]液可以观察到接[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]收[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]液泵运[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]转姿态正常[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000](声音稍大)。[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]通过本次维修我们学到了:第一,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]出现问题,逐步排查,由简入难,由表入里,可以通过排除法找出故障出在哪里,并及时向向[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]领导[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]汇报,寻求[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]支持[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]和帮助[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000];第二,需要同事帮助,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]齐心协力,集思广益,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]在我们拆泵的时候有[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]很多部件[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000],[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]需要和别的同事配合才能拆卸下来,在我们找不到替换配件时,大家一起想办法;[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]第三,需要大胆细心,我们拆的时候战战兢兢,装的时候小心谨慎,就怕装完了多出几个零件。[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]总之,通过本次维修让我们对[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]自动蛋白测定仪[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]有了更深的理解,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]也增强了自己的动手能力,[/color][/size][/font][font='仿宋_gb2312'][size=21px][color=#000000]在以后的实验中再出现类似问题时能够更加从容的应对。[/color][/size][/font]

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    β-乳球蛋白属于乳白蛋白还是属于乳球蛋白里面的一种成分?最近看到有两种版本,其一,说是属于乳白蛋白里面的一种成分,乳白蛋白包括α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和血清白蛋白。乳球蛋白即免疫球蛋白。其二,乳白蛋白包括α-乳白蛋白和血清白蛋白,乳球蛋白包括β-乳球蛋白和免疫球蛋白。现在不知道哪种说法对,请各位指教!!!谢谢!!!

  • 蛋白胨和胰蛋白胨

    本文引用自cheney《蛋白胨和胰蛋白胨简介》蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂,具有肉香的特殊气息。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类。它可以作为微生物培养基的主要原料,在抗生素、医药工业、发酵工业、生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大。不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽,因此存在着各种蛋白胨,一般来说,用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白(酪蛋白、肉类)和植物蛋白(豆类)等两种。能为微生物提供C源、N源、生长因子等营养物质。因此,蛋白胨从来源上可分为动物性蛋白胨和植物性蛋白胨。胰胨、肉胨、骨胨等都是动物性蛋白胨,而大豆蛋白胨等则是植物性蛋白胨。动物性来源的蛋白胨还有:蚕蛹蛋白胨、血液蛋白胨等。   不同来源的蛋白质和不同的水解条件,其水解物中组成可千差万别。所以胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶于水,过热不凝固,在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。可用作微生物和动物细胞培养基、特种功能性食品和化妆品的配料,也有用作啤酒等产品的稳定剂。胰蛋白胨,又称胰酪蛋白胨(Casein Tryptone)、胰酶消化酪蛋白胨(Pancreatic digest of casein),是一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。含有丰富的氮源、氨基酸等,可配制各种微生物培养基,用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定,以及无菌试验培养基、厌氧菌培养基等细菌生化特性试验用培养基的配置。胰蛋白胨还广泛应用于高品质的抗生素、维生素、医药工业,氨基酸、有机酸、酶制剂、黄原胶等发酵工业,生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大,临床用于抗炎消肿,工业上用于皮革制造,生丝处理,食品加工。在国际市场上,胰蛋白胨也属于货紧价昂的短线品种之一。   胰酪蛋白胨质量标准及其检验标准:   常规各项理化指标:   1. 澄清度(磷酸盐、碱性沉淀):无沉淀、澄清   2. 2%水溶液:透明   3. 酸碱度:6-7   4. 氨基氮:≥3%   5. 色氨酸:≥0.8%   6. 胨含量:≥80%   7. 总氮:≥13%   8. 水份:≤5%   9. 灰份:≤6%   10. 氯化钠:≤0.2%胰蛋白胨特指用胰蛋白酶酶解酪蛋白生成的蛋白胨产物,与一般蛋白胨的区别在于酶解工艺处理上,属于水解度更高、胨分子量更小更均衡的蛋白胨。

  • 有做蛋白提取的大佬吗

    对蛋白提取率有些疑问。我看文献都是先用国标测定样品的总蛋白,然后再用考马斯亮蓝法测定从样品中提取得到的提取物的蛋白含量。再通过比值计算提取率。我的疑问是为什么总蛋白和提取物种蛋白含量不用同一种方法测定呢,用两种方法测定蛋白含量不会有影响吗。可不可以总蛋白和提取物蛋白含量都用国标凯氏定氮法测定或者都用考马斯亮蓝法测定呢?

  • 【原创】粗蛋白测量方法

    什么是粗蛋白, 粗蛋白跟蛋白质又有什么区别,如何测量饲料中粗蛋白的含量,粗蛋白的含量高是不是一定代表着蛋白质的含量高。我想,当你看到这个题目时,肯定会联想到这一连串的问题中的其中几个。那么接下来,我就来详细介绍下粗蛋白的概念、粗蛋白测量和其他关于饲料中粗蛋白含量的问题。粗蛋白概念:粗蛋白不仅包括蛋白质这一物质,它涵盖的范围更广,包括含氮的全部物质。粗蛋白含量:下面我介绍几种常见物质的粗蛋白含量,仅供大家参考。薏苡仁 粗蛋白含量:13%-14%棉粕 粗蛋白含量:可达40%以上农大白早糯玉米 粗蛋白含量:3.41%蠡玉168 粗蛋白含量:9.63%台湾大青枣 粗蛋白含量:0.86%上文介绍了几种农产品或水果的粗蛋白含量情况,如果需要更多的资料,大家可自己查阅。粗蛋白测定:方法一:最简便也是最快键的方法,就是用蛋白质测定仪(参见www.top17.net/product/993.html)来测量。本标准参照采用ISO 5983—1979 《动物饲料──氮含量的测定和粗蛋白含量计算》。 1 主题内容与适用范围  本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。  本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。2 引用标准  GB 601 化学试剂 滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备3 原理  凯氏法测定试样中的含氮量,即在催化剂作用下,用硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,测出氮含量,将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。4 试剂4.1 硫酸(GB 625):化学纯,含量为98%,无氮。4.2 混合催化剂:0.4g硫酸铜,5个结晶水(GB 665),6g硫酸钾(HG 3—920)或硫酸钠(HG 3—908),均为化学纯,磨碎混匀。4.3 氢氧化钠(GB 629):化学纯,40%水溶液(m/V)。4.4 硼酸(GB 628):化学纯,2%水溶液(m/V)。4.5 混合指示剂:甲基红(HG 3—958)0.1%乙醇溶液,溴甲酚绿(HG 3—1220)0.5%乙醇溶液,两溶液等体积混合,在阴凉处保存期为三个月。4.6 盐酸标准溶液:邻苯二甲酸氢钾法标定,按GB 601制备。4.6.1 盐酸标准溶液:c(HCl)=0.1mol/L。8.3mL盐酸(GB 622,分析纯),注入 1 000mL蒸馏水中。4.6.2 盐酸标准溶液:c(HCl)=0.02mol/L。1.67mL盐酸(GB 622,分析纯),注入1 000mL蒸馏水中。4.7 蔗糖(HG 3—1001):分析纯。4.8 硫酸铵(GB 1396):分析纯,干燥。4.9 硼酸吸收液:1%硼酸水溶液1 000mL,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL,0.1%甲基红乙醇溶液7mL,4%氢氧化钠水溶液0.5mL,混合,置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。5 仪器设备5.1 实验室用样品粉碎机或研钵。5.2 分样筛:孔径0.45mm(40目)。5.3 分析天平:感量0.0001g。5.4 消煮炉或电炉。5.5 滴定管:酸式,10、25mL。5.6 凯氏烧瓶:250mL。5.7 凯氏蒸馏装置:常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式。5.8 锥形瓶:150、250mL。5.9 容量瓶:100mL。5.10 消煮管:250mL。5.11 定氮仪:以凯氏原理制造的各类型半自动,全自动蛋白质测定仪。6 试样的选取和制备  选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g,粉碎后全部通过40目筛,装于密封容器中,防止试样成分的变化。7 分析步骤7.1 仲裁法7.1.1 试样的消煮  称取试样0.5~1g(含氮量5~80mg)准确至0.0002g,放入凯氏烧瓶(5.6)中,加入6.4g混合催化剂(4.2),与试样混合均匀,再加入12mL硫酸(4.1)和2粒玻璃珠,将 凯氏烧瓶(5.6)置于电炉(5.4)上加热,开始小火,待样品焦化,泡沫消失后,再加强火力 (360~410℃)直至呈透明的蓝绿色,然后再继续加热,至少2h。7.1.2 氨的蒸馏(蒸馏步骤的检验见附录A)7.1.2.1 常量蒸馏法  将试样消煮液(7.1.1)冷却,加入60~100mL蒸馏水,摇匀,冷却。将蒸馏装置(5.7)的冷凝管末端浸入装有25mL硼酸(4.4)吸收液和2滴混合指示剂(4.5)的锥形瓶内。然后小心地向凯氏烧瓶(5.6)中加入50mL氢氧化钠溶液(4.3),轻轻摇动凯氏烧瓶(5.6),使溶液混匀后再加热蒸馏,直至流出液体积为100mL。降下锥形瓶,使冷凝管末端离开液面,继续蒸馏1~2min,并用蒸馏水冲洗冷凝管末端,洗液均需流入锥形瓶内,然后停止蒸馏。7.1.2.2 半微量蒸馏法  将试样消煮液(7.1.1)冷却,加入20mL蒸馏水,转入100mL容量瓶中,冷却后用水稀释至刻度,摇匀,做为试样分解液。将半微量蒸馏装置(5.7)的冷凝管末端浸入装有20mL硼酸(4.4)吸收液和2滴混合指示剂(4.5)的锥形瓶(5.8)内。蒸汽发生器 (5.7)的水中应加入甲基红指示剂数滴,硫酸数滴,在蒸馏过程中保持此液为橙红色,否则需补加硫酸。准确移取试样分解液10~20mL注入蒸馏装置(5.7)的反应室中,用少量蒸馏水冲洗进样入口,塞好入口玻璃塞,再加10mL氢氧化钠溶液(4.3),小心提起玻璃塞使之流入反应室,将玻璃塞塞好,且在入口处加水密封,防止漏气。蒸馏4min降下锥形瓶(5.8)使冷凝管末端离开吸收液面,再蒸馏1min,用蒸馏水冲洗冷凝管末端,洗液均流入锥形瓶内,然后停止蒸馏。  注:7.1.2.1和7.1.2.2蒸馏法测定结果相近,可任选一种。7.1.2.3 蒸馏步骤的检验  精确称取0.2g硫酸铵(4.8),代替试样,按7.1.2或7.2.2步骤进行操作,测得硫酸铵含氮量为21.19±0.2%,否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。 7.1.3 滴定  用7.1.2.1或7.1.2.2法蒸馏后的吸收液立即用0.1mol/L(4.6.1)或0.02mol/L(4.6.2)盐酸标准溶液滴定,溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。7.2 推荐法7.2.1 试样的消煮  称取0.5~1g试样(含氮量5~80mg)准确至0.0002g,放入消化管中,加2片消化片(仪器自备)或6.4g混合催化剂(4.2),12mL硫酸(4.1),于420 ℃下在消煮炉上消化1h。取出放凉后加入30mL蒸馏水。7.2.2 氨的蒸馏  采用全自动定氮仪(5.11)时,按仪器本身常量程序进行测定。  采用半自动定氮仪(5.11)时,将带消化液的管子插在蒸馏装置上,以25mL硼酸(4.4)为吸收液,加入2滴混合指示剂(4.5),蒸馏装置(5.7)的冷凝管末端要浸入装有吸收液的锥形瓶内,然后向消煮管中加入50mL氢氧化钠溶液(4.3)进行蒸馏。蒸馏时间以吸收液体积达到100mL时为宜。降下锥形瓶,用蒸馏水冲洗冷凝管末端,洗液均需流入锥形瓶内。7.2.3 滴定  用0.1mol/L的标准盐酸溶液(4.6.1)滴定吸收液,溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。8 空白测定  称取蔗糖0.5g,代替试样,按第7章进行空白测定,消耗0.1mol/L盐酸标准溶液(4.6.1)的体积不得超过0.2mL。消耗0.02mol/L盐酸标准溶液(4.6.2)体积不得超过0.3mL。9 分析结果的表述9.1 计算见下式:粗蛋白质(%)=(V2-V1)• c×0.0140×6.25/(m×V'/V) ×100 式中:V2── 滴定试样时所需标准酸溶液体积,mL; V1── 滴定空白时所需标准酸溶液体积,mL; c── 盐酸标准溶液浓度,mol/L; m── 试样质量,g; V── 试样分解液总体积,mL; V── 试样分解液蒸馏用体积,mL; 0.0140── 与1.00mL盐酸标准溶液〔c(HCl)=1.000mol/L〕相当的、以克表示的氮的质量。 6.25── 氮换算成蛋白质的平均系数。 9.2 重复性  每个试样取两个平行样进行测定,以其算术平均值为结果。  当粗蛋白质含量在25%以上时,允许相对偏差为1%。  当粗蛋白含量在10%~25%之间时,允许相对偏差为2%。  当粗蛋白质含量在10%以下时,允许相对偏差为3%。

  • 【求助】豆血红蛋白含量的测定方法

    最近要做大豆豆血红蛋白含量的测定,方法我已经知道,最后要比色,可是我查不到有关测定豆血红蛋白含量标线的方法!!!!太早的文献真的很难找到,希望各位大侠能多多指教,给与帮助!我将万分感谢 !

  • 【原创大赛】饲料中真蛋白的测定

    【原创大赛】饲料中真蛋白的测定

    ps:在论坛上找了半天没找到适合这篇文章的地,暂且先放这吧。饲料中真蛋白的测定方法1.前言饲料作为畜牧养殖生产中的重要生产资料,其营养价值的高低直接影响到畜牧养殖的效益,而饲料中蛋白质的含量是一项重要的指标,饲料中粗蛋白质包括真蛋白质和非蛋白质两部分含氮物质,后者主要包括游离氨基酸、硝酸盐、铵盐等,故不能反映出饲料蛋白质对动物的真正营养价值。有些不法生产商故意添加硫酸铵、尿素等非蛋白质来提高产品的粗蛋白含量,导致部分养殖场户存在一个误区,认为标签上标注的粗蛋白质高,营养价值就高,从而造成养殖效益的低下。本文在凯氏定氮方法的基础上进行相应的前处理从而达到测定真蛋白的目的。蛋白质经沸水提取并在一定碱性条件下,能与硫酸铜发生盐析作用而析出沉淀,此沉淀物不溶于热水,而非蛋白氮则易溶于水,用热水洗沉淀,将水溶性含氮物洗去,剩下的沉淀物再用凯氏定氮法测定,得出真蛋白质的含量。2.实验部分2.1 仪器与试剂粉碎机、40目分样筛、分析天平(感量0.1mg)、烧杯250ml、玻璃棒、漏斗(直径10cm)、定性滤纸(中速,12.5cm,15cm)、可控温干燥箱、K1100F全自动凯氏定氮仪、SH420石墨消解炉、可控温电炉浓硫酸(98%)、硫酸铜(分析纯)、硫酸铜溶液(10%)、硫酸钾、氢氧化钠溶液(40%)、氢氧化钠溶液(2.5%)、硼酸(20g/L,按混合指示剂:硼酸=1:100加入指示剂)、甲基红-溴甲酚绿混合指示剂[font=Times New Roman

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