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均质过程即是将原始样本与某种液体或溶剂混匀,得到成分分布均匀的溶液。实验室用均质器大体可分为:探头旋刃式均质器、超声波破碎均质器和敲打式均质器(拍击式、研磨珠式)三类。探头旋刃式均质器是通过研磨杵在均质管内转动,达到分离、混匀、破碎、均质的目的,适合处理韧性强的样品。用于分散动物/植物组织,配合裂解液做核酸、蛋白等的抽提,也可用于工业上树脂、色素制造悬浮/乳浊液等。具有低速、扭力大、无噪音等特点。使用方便,通过更换不同的探头,可以处理不同量的样品(0.2微升-数百升),操作简便,更适合单样品操作。缺点:不能同时处理多个样品,不同样品需要更换或清洗探头,增加样品间交叉污染的机会;不适合细菌、酵母及其他真菌等厚壁样品的处理。超声波破碎均质器用于各种组织/细胞裂解、细胞器、核酸、蛋白的提取,以及其他工业样品的乳化、均质。使用方便,通过更换不同的探头,可以处理不同量的样品;乳化、均质效果好,适合单样品操作。缺点:不能同时处理多个样品,不同样品需要更换或清洗探头,增加样品间交叉污染的机会;升温快,对生物样品不友好。敲打式均质器拍击式均质器通过捶击板不停地在袋上捶击。产生的压力可将袋中的物质击碎混匀。研磨珠均质器是将样品和相应的珠子放到试管里通过三维高速旋转、振动,靠研磨珠的高速敲打方式对样品进行研磨、均质将样品打碎,适用范围广。用于动物和植物组织、藻类、细菌、酵母、真菌或霉菌以及各类孢子体的破碎,DNA/RNA、蛋白的提取。能够高效地处理包括骨头、孢子、土壤等在内的顽固样品,通量高,不会交叉污染,操作简便、高效。处理脆性样品较好,缺点:不能处理大体积样品,单个样品单次处理量一般小于1.5ml,耗材和设备投入较高。
请教大家一下,实验室想买台小型的均质机用来做微胶囊前的均质处理,但不知道买什么样的好,请大家给推荐下,最好能有价格参考,多谢了!!!
在实验室自制发酵菌需要在严格的无菌条件下进行,以下是一般的步骤和注意事项: [color=initial]一、准备工作[/color] [list=1][*] 设备和材料准备 [list][*]超净工作台:提供无菌操作环境。[*]高压灭菌锅:对培养基、培养皿、移液管等进行灭菌。[*]恒温培养箱:提供适宜的温度进行菌种培养。[*]天平、量筒等:用于准确称量和量取试剂。[*]培养基原料:如蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、琼脂等,根据所需菌种选择合适的培养基。[*]无菌水、移液管、培养皿、锥形瓶等。[/list][*] 环境消毒 [list][*]在进行实验前,对实验室进行全面消毒,包括桌面、地面、墙壁等。可以使用紫外线照射、化学消毒剂擦拭等方法。[*]确保超净工作台的过滤器正常工作,开启超净工作台进行通风和紫外线照射,进一步净化操作环境。[/list][/list] [color=initial]二、菌种来源选择[/color] [list=1][*] 从自然界分离 [list][*]可以从土壤、水体、植物表面等环境中采集样品,通过稀释涂布法、平板划线法等分离出单一的菌种。[*]例如,从果园土壤中采集土样,经过一系列处理后,在特定的培养基上培养,挑选出具有发酵潜力的菌落进行进一步培养和鉴定。[/list][*] 已有菌种保藏中心获取 [list][*]如果实验室有菌种保藏条件,可以从专业的菌种保藏中心购买或申请所需的菌种,然后进行活化和培养。[*]在使用外来菌种时,要确保其来源可靠、无致病性和污染风险。[/list][/list] [color=initial]三、培养基制备[/color] [list=1][*]按照配方准确称量培养基原料,加入适量的蒸馏水溶解。[*]将溶解后的培养基装入锥形瓶中,用棉塞或硅胶塞封口。[*]将锥形瓶放入高压灭菌锅中进行灭菌,一般在 121℃下灭菌 15-20 分钟。[*]灭菌后的培养基在超净工作台中冷却至适宜温度(一般为 45-50℃),然后倒入无菌培养皿中,待其凝固备用。[/list] [color=initial]四、菌种培养[/color] [list=1][*]如果是从自然界分离菌种,将采集的样品进行适当处理后,用无菌移液管吸取少量样品,涂布在培养基表面。[*]如果是活化已有菌种,用无菌接种环从保藏菌种中挑取少量菌体,划线接种在培养基表面。[*]将接种后的培养皿放入恒温培养箱中,根据菌种的特性设置适宜的温度和培养时间。例如,乳酸菌一般在 37℃下培养 24-48 小时。[/list] [color=initial]五、菌种筛选和鉴定[/color] [list=1][*]观察培养皿中的菌落形态,挑选出具有所需发酵特性的菌落,如形态规则、生长旺盛、有特定颜色等。[*]对筛选出的菌落进行进一步的鉴定,可以通过显微镜观察菌体形态、生理生化试验、分子生物学方法等确定菌种的种类。[*]将鉴定后的菌种进行纯化培养,确保菌种的纯度。[/list] [color=initial]六、菌种保存[/color] [list=1][*] 短期保存 [list][*]可以将菌种接种在斜面培养基上,放入冰箱冷藏保存,一般可保存数周至数月。[*]定期转接菌种,以保持其活性。[/list][*] 长期保存 [list][*]采用冷冻干燥法、液氮保存法等进行长期保存。[*]冷冻干燥法是将菌种在保护剂的作用下冷冻干燥,然后密封保存于低温环境中。液氮保存法则是将菌种悬浮在液氮中,可长期保持菌种的活性。[/list][/list] [color=initial]七、注意事项[/color] [list=1][*] 严格无菌操作 [list][*]在整个实验过程中,要始终保持无菌意识,严格遵守无菌操作规范。所有操作都要在超净工作台中进行,使用的工具和材料都要经过灭菌处理。[*]避免交叉污染,不同菌种的操作要分开进行,使用的工具和培养皿等要专用。[/list][*] 安全防护 [list][*]对可能具有致病性的菌种进行操作时,要采取相应的安全防护措施,如佩戴手套、口罩、实验服等,在生物安全柜中进行操作。[*]严格遵守实验室的安全规定,避免发生意外事故。[/list][*] 记录和标识 [list][*]对实验过程中的每一个步骤都要进行详细记录,包括菌种来源、培养基配方、培养条件、鉴定结果等。[*]对培养的菌种进行明确标识,注明菌种名称、培养日期、保存条件等信息,以便于管理和使用。[/list][/list]