荧光猝灭定仪

fluorescence quenching 　　荧光猝灭是指荧光物质分子与溶剂分子之间所发生的导致： 　　①荧光强度变化 　　或 　　②相关的激发峰位变化 　　或 　　③荧光峰位变化 　　的物理或化学作用过程。与荧光物质分子发生相互作用而引起荧光强度变化和相关的激发峰位和荧光峰位变化的物质被称为荧光猝灭剂（quencher）。 　　荧光猝灭分为静态猝灭和动态猝灭。基态荧光分子与猝灭剂之间通过弱的结合生成复合物，且该复合物使荧光完全猝灭的现象称为静态猝灭。激发态荧光分子与猝灭剂碰撞使其荧光猝灭则称为动态猝灭。 　　荧光分子本身浓度增大使其荧光猝灭的现象称为浓度猝灭或自猝灭。由于荧光的再吸收、荧光物质发生化学变化而观察不到荧光的现象一般不称为荧光猝灭。在利用荧光进行定量、液体闪击计数等包含荧光过程的测定方法中，一定要注意溶剂、共存杂质、氧气等猝灭剂的影响。 　　利用某种物质对某一种荧光物质的荧光猝灭作用而建立的对该猝灭剂的荧光测定方法，即为荧光猝灭法。一般而言，荧光猝灭法比直接荧光测定法更为灵敏，具有更高的选择性。 　　分子结构和化学环境是影响物质发射荧光和荧光强度的重要因素. 至少具有一个芳环或具有多个共轭双键的有机化合物容易产生荧光,稠环化合物也会产生荧光.饱和的或只有一个双键的化合物,不呈现显著的荧光.最简单的杂环化合物,如吡啶,呋喃,噻吩和吡咯等,不产生荧光。 　　取代基的性质对荧光体的荧光特性和强度均有强烈影响.苯环上的取代基会引起最大吸收波长的位移及相应荧光峰的改变.通常给电子基团,如-NH2-,-OH,-OCH3,-NHCH3和-N(CH3)2等,使荧光增强;吸电子基团,如-CL,-Br,-I,-NHCOCH3,-NO2和-COOH,使荧光减弱.具有刚性结构的分子容易产生荧光。 　　大多数无机盐类金属离子不产生荧光,而某些情况下,金属螯合物却能产生很强的荧光. 溶剂的性质,体系的PH值和温度,都会影响荧光的强度. 荧光分子与溶剂或其他分子之间相互作用,使荧光强度减弱的现象称为荧光猝灭.引起荧光强度降低的物质称为猝灭剂.当荧光物质浓度过大时,会产生自猝灭现象。

在测汞的时候，觉得有荧光猝灭的现象，但是不能肯定，请高手来给讲讲荧光猝灭的问题，谢谢！[em09502]

在看有关荧光资料时，经常看到“荧光淬灭”和“荧光猝灭”这两个术语，感到有些困惑；这两个术语是代表一个意思还是两个意思？那位大侠知道请给解释一下？

高浓度的试剂荧光反而不强是荧光猝灭引起的吗？谁了解荧光猝灭的相关知识，介绍下，什么物质的测定容易产生荧光猝灭？

大家怎么理解荧光增强和荧光猝灭这两个概念的？有什么物质能够达到荧光增强或荧光猝灭的？还望各位不吝赐教！

碰到荧光猝灭现象，该如何解释？能详细分析下吗？谢谢大侠了！

[size=5][color=red][font=宋体][b]荧光熄灭：[/b][/font][/color][color=blue][font=宋体]指荧光物质分子与溶剂分子或溶质分子的相互作用引起荧光其哪个度降低或荧光强度与浓度偏离线性的现象。[/font][/color][/size][color=red][size=6][font=宋体][b] [/b][/font][/size][/color][color=red][size=6][font=宋体][b]熄灭原因[/b][/font][/size][/color][color=blue][size=6][font=宋体]：[/font][/size][/color][color=blue][size=6][font='Times New Roman'] [/font][/size][/color][color=blue][size=6][font=宋体]碰撞猝灭；氧的熄灭作用等。 [/font][/size][/color]

请教荧光猝灭法对于物质检测的应用领域及应用情况！

请问荧光猝灭分析的原理是什么

请问哪里可以找到荧光生色团烯类单体的荧光结构自猝灭效应的机理介绍和文献分享，谢谢！

大家好 请问一下既然荧光寿命的测定能够准确判断荧光猝灭类型，那么为什么很少见使用此法呢，其他方法麻烦还有争议，现在的仪器不是已经可以测得荧光寿命了么？回答最好有文献支持，急写毕业论文用!谢谢大家了 ，帮帮我吧。[em09501]

我现在遇到一个问题，不知道荧光猝灭法的检出限怎么算。用分光光度法的算法感觉不对，请教各位大侠！

快过年了，今儿中午突然接到领导一个电话，有个黄曲霉B1的突发事件，让回家后随时待命。。。挂了电话后http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gif。正赶上月初的时候单位新购置了一台沃特世的液质，居然有加荧光检测器。早在以前的比对中就被黄曲霉虐待过，这次趁着液质检测人员回家过年的机会（羡慕嫉妒恨啊）刚好能偷偷搬过来用用。额正题来了：为什么UPLC的大体积流通池可以避免黄曲霉B1的荧光猝灭呢？原来只记得看过文献上说是因为黄曲霉B1在反相中遇水猝灭，可是这跟流通池体积大有关系么？

荧光分析中的荧光结合常数和猝灭常数表示的什么意思啊？它们是怎么计算出的？请教各位大虾，急用！！！

都有哪些物质导致荧光猝灭啊，如何避免，谢谢

如何用荧光猝灭法测定银离子？？？实验设计 （实验原理 步骤 ） 谢谢！！！

请问氢化物发生器的原理？还有什么是荧光猝灭？

看到有的人说荧光猝（cu）灭，有人说荧光淬（cui）灭到底哪个对阿？

想必有些人做过用汞去猝灭金团簇的荧光实验，或者利用荧光猝灭来检测汞的实验。请问在开始尝试时，Hg应该用多大的浓度呢？还有如果我用氯化亚锡去还原Hg2+来得到汞再去还原金团簇，又该配多大的浓度合适呢？想得出一个线性关系，但是连一个基准都没有，不好开始实验，还请大神指教！感激不尽！

关于纳米材料和蛋白相互作用的荧光动态猝灭数据如何处理？

各位大虾，我想请教在做荧光淬灭检测物质浓度时，具体的应该怎么做啊？是配制好荧光物质溶液，然后每次滴加不同浓度的淬灭物质，那这个加都少量啊？还是如有些文献上所说，先在1个10ml的容器里加入一定量的荧光物质，再加不同浓度的淬灭物质（检测物质）来定容?究竟这个该怎么做？最后就是那个淬灭线性区间怎么选,有什么要求？谢谢各位不吝赐教！

请教:一种物质在酸性下荧光较强,在碱性条件下荧光淬灭,仅仅是因为不同酸碱环境不同造成的么?谢谢

1. 内滤效应导致的荧光淬灭是属于能量转移不？ 2. 由于内滤效应导致的荧光下降会使荧光峰位改变不？3. 能量共振转移导致的荧光下降会使荧光峰位改变不？

有没有人知道如何计算荧光淬灭效率？需要计算荧光量子产率吗？

荧光淬灭怎么办？怎么解决？再可以做样

最近在检测黄曲霉毒素时，为何要衍生，好多文献只是提到水可以猝灭，但是对于原因却不清楚，所以产生了疑问，B1、G1为何在水中会猝灭，衍生的机理是什么，请教下各位老师，有没有相关的文献或者出处。

转自；成都速佳仪器维修中心论坛一）荧光的产生一此化学物质能从外界吸收并储存能量（如光能、化学能等）而进入激发态，当其从激发态再回复到基态时，过剩的能量可以电磁辐射的形式放射（即发光）。荧光发射的特点是：可产生荧光的分子或原子在接受能量后即刻引起发光；而一旦停止供能，发光（荧光）现象也随之在瞬间内消失。　　可以引起发荧光的能量种类很多，由光激发所引起的荧光称为致荧光。由化学应所引起的称为化学荧光，由X线或阴极射线引起的分别称为X线荧光或阴极射线荧光。荧光免疫技术一般应用致荧光物质进行标记。　　（二）荧光效率荧光分子不会将全部吸收的光能都转变成荧光，总或多或少地以其他形式释放。荧光效率是指荧光分子将吸收的光能转变成荧光的百分率，与发射荧光光量子的数值成正比。荧光效率＝发射荧光的光量分子数（荧光强度）／吸收光的光量子数（激发光强度）发射荧光的光量子数亦即荧光强度，除受激发光强度影响外，也与激发光的波长有关。各个荧光分子有其特定的吸收光谱和发射光谱（荧光光谱），即在某一特定波长处有最大吸收峰和最大发射峰。选择激发光波长量接近于荧光分子的最大吸收峰波长，且测定光波量接近于最大发射光波峰时，得到的荧光强度也最大。　　（三）荧光的猝灭荧光分子的辐射能力在受到激发光较长时间的照射后会减弱甚至猝灭 ，这是由于激发态分子的电子不能回复到基态，所吸收的能量无法以荧光的形式发射。一些化合物有天然的荧光猝灭作用而被用作猝灭剂，以消除不需用的荧光。因此荧光物质的保存应注意避免光（特别是紫外光）的直接照射和与其他化合物的接触。在荧光抗体技术中常用一些非荧的色素物质如亚甲蓝、碱性复红。伊文思蓝或低浓度的过锰酸钾、碘溶液等对标本进行得当复染，以减弱非特异性荧光本质，使特异荧光更突出显示。物质的激发光谱和荧光发射光谱，可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用作定量分析。荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法或比色法为高，浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用，以及由于在液面附近溶液会吸收激发光，使发射光强度下降，导致发射光强度与浓度不成正比，故荧光分析法应在低浓度溶液中进行。 所用的仪器为荧光计或荧光分光光度计，按各药品项下的规定，选定激发光波长和发射光波长，并配制对照品溶液和供试品溶液。 由于不易测定绝对荧光强度，故荧光分析法都是在一定条件下，用对照品溶液测得浓度的线性范围后，再在每次测定前，用一定浓度的对照品溶液校定仪器的灵敏度；然后在相同的条件下，读取对照品溶液及其试剂空白与供试品溶液及其试剂空白的读数，用下式计算供试品浓度： R-R C＝──×C R－R 式中 C为供试品溶液的浓度； C为对照品溶液的浓度； R为供试品溶液的读数； R为供试品溶液试剂空白的读数； R为对照品溶液的读数； R为对照品溶液试剂空白的读数。 因荧光分析法中的浓度与读数的线性较窄，故(R－R)/(R－R)应为0.50～2.0；如有超过，应在调节溶液浓度后再测。 对易被光分解的品种 ,可选择一种激发光和发射光波长与之近似而对光稳定的物质溶液，例如蓝色荧光可用硫酸奎宁的稀硫酸溶液，黄绿色荧光可用荧光素钠水溶液，红色荧光可用罗丹明B水溶液等,先与对照品溶液比较测定其读数关系，并在测定供试品溶液时用以代替对照品溶液，以校定仪器的灵敏度。 荧光分析法因灵敏度高，故干扰因素也多。溶剂不纯会带入较大误差，应先作空白检查，必要时，应用玻璃磨口蒸馏器蒸馏后再用。溶液中的悬浮物对光有散射作用，必要时，应用垂熔玻璃滤器滤过或用离心法除去。所用的玻璃仪器与测定池等也必须保持高度洁净。温度对荧光强度有较大的影响，测定时应控制温度一致。溶液中的溶氧有降低荧光作用，必要时可在测定前通入惰性气体除氧。

本人用RF-5301测荧光，开机半个销售后突然光源灭了，啥信号都没有了，并伴有一股浓烈的烧焦气味，高人指点这是什么问题啊，才换光源不到一个月。

大家好，有个问题亟待求教。我做藻类（固体粉末）吸附试验的时候，震荡48h后，离心过滤后提取上清液来测定As的含量，上清液经还原后用原子荧光测定，结果每次都会把火焰熄灭。不知道是不是上清液成蓝色的缘故？上清液呈蓝色。应该如何处理这种现象呢？使用硝酸破坏上清液中的蓝色物质？请大家指导一下。