[font=宋体]在生物学和医学领域,抗原与抗体之间的结合反应是极为重要且复杂的过程。这种反应不仅关乎免疫系统的正常运作,而且在诊断、治疗等多个领域具有广泛的应用。本文将详细探讨抗原抗体结合反应的原理及其背后的生物学意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一、抗原与抗体的基本概念[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原,通常是指能够刺激机体产生特异性免疫应答的物质。它们可能是外来的微生物、毒素,也可能是机体自身的异常成分。抗体,则是免疫系统在受到抗原刺激后产生的特异性免疫球蛋白,能够与抗原发生特异性结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、抗原抗体结合的结构基础[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体之间的结合,依赖于它们分子间的结构互补性和亲和性。这种互补性主要源于抗原的表位和抗体的结合部位之间的匹配。抗原的表位,即其表面能够与抗体结合的区域,通常是特定的化学基团或空间构象。而抗体的结合部位,即其能够与抗原结合的区域,由重链和轻链上的可变区组成,形成了特定的空间结构,能够与抗原表位进行精确的结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]三、抗原抗体结合的动力学过程[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应通常可以分为两个阶段。第一阶段是抗原与抗体发生特异性结合的阶段,此阶段反应速度极快,仅需几秒钟即可完成。这是因为抗原抗体之间的结合是高度特异性的,一旦找到合适的配对,它们会迅速结合形成抗原抗体复合物。第二阶段是可见反应阶段,此时抗原抗体复合物在环境因素的影响下,进一步交联和聚集,表现为凝集、沉淀、溶解等肉眼可见的反应。这一阶段的反应速度较慢,往往需要数分钟至数小时。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]四、抗原抗体结合反应的意义[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应在生物学和医学领域具有广泛的应用。在免疫学中,它是机体免疫系统识别和清除外来抗原的基础。在医学诊断中,利用抗原抗体反应可以进行疾病的快速、准确诊断。例如,利用单克隆抗体技术可以检测乙型肝炎等病毒。此外,抗原抗体反应还被广泛应用于治疗领域,如利用载药单克隆抗体进行肿瘤的靶向治疗等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]五、总结[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应是生物学和医学领域的重要反应之一,其原理涉及到分子间的结构互补性和亲和性、反应动力学等多个方面。对这一反应的研究不仅有助于我们深入理解免疫系统的运作机制,也为疾病的诊断和治疗提供了新的方法和手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]
影响抗原[url=https://www.tw-reagent.com/category.php?id=34]抗体[/url]反应的因素有两方面,一是反应物自身的因素;二是反应环境条件。 (一)反应物自身的因素 1.抗体:不同来源的抗体,反应性各有差异,抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应,为提高试验的可靠性,应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂。等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成,单克隆抗体不适用于沉淀反应。 2.抗原:抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。颗粒性抗原出现凝集反应,可溶性抗原出现沉淀反应,单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。 (二)反应环境条件 1.电解质:抗原与抗体发生特异性结合后,虽由亲水胶体变为疏水胶体,若溶液中无电解质参加,仍不出现可见反应。为了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。 2.酸碱度:抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行。蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH6~9进行,有补体参与的反应pH为7.2~7.4,pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应。 3.温度:在一定范围内,温度升高可加速分子运动,抗原与抗体碰撞机会增多,使反应加速。一般为15℃~40℃,常用的抗原抗体反应温度为37℃,温度如高于56℃,可导致已结合的抗原抗体再解离,甚至变性或破坏。此外,适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触,加速反应。
实验室常用的ELISA方法可以用来测定抗体,也可以用来测定抗原。我们可以根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。下面就让上海劲马ELISA试剂盒为您分享其中关于双抗体夹心法检测抗原的操作步骤。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:1) 将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2) 加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3) 加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。劲马ELISA试剂盒小提示:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
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现在不管 国外 还是国内,在生物原料方面,成品的抗原抗体以及定制的抗原抗体等都发展得越来越好。抗体抗原种类可谓是五花八门,琳琅满目,而且非技术人员选择采购也很麻烦。这里列举少数最热门的一部分
因实验原因,需要买一对抗原/抗体,什么抗原/抗体都可以,效价要高一些,抗体要纯一些,谁那里有在下面电子邮件发个信息吧happybsky@163.com
[font=宋体]抗体和抗原是生物学中重要的概念,它们在免疫学、医学和生物学等领域都有广泛的应用。抗体和抗原具有一些显著的区别,这些区别主要体现在化学结构、产生方式、溶解性、特异性和效应功能等方面。本文将对这些差异进行详细的阐述。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]首先,让我们了解一下抗体的化学结构。抗体是一种免疫球蛋白,具有两条相同的抗原结合簇。抗原决定簇是抗体与抗原结合的关键部位,它们在空间结构上呈现出一定的形状和大小,能够与抗原的特定部位精确结合。然而,抗原通常具有多个抗原决定簇,这使得抗原能够与多种抗体结合,从而在免疫反应中发挥重要作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]接下来,让我们了解一下抗原的产生方式。抗原是能够诱发免疫应答的分子,通常是由病原微生物产生的一种外源物质。例如,细菌的细胞壁、病毒的包膜蛋白等都可以作为抗原。与此相反,抗体是由淋巴细胞产生的,特别是浆细胞。在接受抗原的刺激后,浆细胞会分化为能够产生抗体的浆细胞,从而在体内产生大量的抗体,以应对抗原的侵袭。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]此外,抗体和抗原在溶解性上也存在显著差异。抗原的溶解性通常受到[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]和电解质浓度的 影响,而抗体的溶解性则与抗原无关。这一差异在生物学和医学领域具有重要的意义。例如,在疫苗研发中,科学家需要了解抗原的溶解性,以确保疫苗的有效性。而在抗体治疗中,医生需要了解抗体的溶解性,以确保抗体能够有效地发挥作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]另外,抗体和抗原的特异性也存在明显的差异。抗原的特异性取决于抗原决定簇的立体构型和间距,这意味着不同的抗原决定簇可以激发不同的免疫应答。与此相反,抗体的特异性取决于抗体的独特型。独特型是指抗体的抗原结合部位的空间结构,它决定了抗体与抗原的特异性结合。因此,不同的抗体可以与不同的抗原结合,这使得抗体在免疫应答中具有多种不同的作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]最后,抗体和抗原在效应功能上也存在显著的差异。抗原主要是刺激免疫系统产生抗体,从而在体内产生免疫应答。然而,抗体在与抗原结合后,能够激活补体系统,促进吞噬细胞对病原微生物的吞噬,从而发挥效应功能。此外,抗体还可以通过调理作用促进吞噬细胞的吞噬,以及通过[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]作用(抗体依赖的细胞毒性作用)诱导细胞对靶细胞的杀伤作用。这些效应功能使得抗体在免疫防御和免疫治疗中具有广泛的应用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述,抗体和抗原在化学结构、产生方式、溶解性、特异性和效应功能等方面存在显著的区别。这些区别决定了抗体和抗原在免疫应答中的不同作用和应用。在生物学、医学和免疫学等领域中,了解抗体和抗原的区别对于理解免疫应答的机制、疫苗研发、抗体治疗等方面都具有重要的意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]随着抗体制备技术的发展,现在已有多种方法可用于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-production][b]抗体制备[/b][/url]。可使用体外杂交瘤细胞制备单克隆抗体。一般在兔体内[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-production][b]制备多克隆抗体[/b][/url]。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发,义翘神州已成为行业领先的抗体制备公司。我们可提供克级数量的定制抗体生产,交货迅速,价格优惠。从基因序列到纯化抗体([/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克),只需几周时间,成品产品即可送到您家门口。详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-production[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]
[em14] 证明抗原与抗体特异性结合的常用方法是什么?
有用CE做抗原和抗体分离分析的吗?大家可以交流讨论我的QQ是441874556
目前我们公司已经开发出兽药残留方面的小分子抗原抗体,但是远远不能满足市场需求,请问各位同行大侠,哪里能买到相关的抗原抗体。
免疫是机体识别自我物质和排除异己物质的复杂的生物学反应,是动物长期进化中所形成的一种生理功能。其作用包括防御传染、自身稳定和免疫监视3种方式。----防御传染--当病原微生物侵入时,机体即迅速动员全身防御力量,将该侵入者消灭、清除,从而免除感染。此种由机体对病原微生物侵入所表现的不同程度的低抗力,称为抗传染免疫。人们对于抗传染免疫本质的认识,是从19世纪末开始的,半个世纪以来,人们对传染病的特异预防、治疗和诊断进行了广泛深入的研究,为防治和消灭人畜传染病做出了巨大的贡献。----自身稳定--这一功能在于维持体细胞的均一性,其方式是不断清除衰老的和受损伤的细胞。如此功能失常,可能出现自身免疫性疾病。----免疫监视 -正常机体具有识别及清除经常出现的突变细胞功能。这些突变细胞可以自发产生,也可以由病毒感染或理化因素诱变产生。如免疫监视功能失调,这些突变细胞就有可能无限地增生而形成肿瘤。----研究免疫和免疫反应在理论和实践上都有重大意义。免疫学过去主要研究抗传染免疫,因此,一直作为医学微生物的一部分。现在看来,免疫学己远远超越了任何微生物学的范围而成为一个有多个分支的独立学科,包括临床免疫学、免疫生物学、免疫化学、分子免疫学、免疫血液学、免疫生理学、免疫病理学、免疫药理学和免疫遗传学等。本章则着重介绍临床免疫学的基础知识和血清学诊断技术。----免疫分子主要指抗原及抗体,是现代分子免疫学的主要研究对象,近年来有关研究进展很快。自从上世纪末Emil Von Behring发现抗体以来,历经K.Landsteiner(1917)对抗原特性的研究,N.Jerne和M.Burnet(50年代)对抗体形成克隆选择学说的提高,R.R.Porter和G.M.Edelmam(60年代)对抗体分子及其酶解片段分子结构的研究,G.Kohlev和C.Milstein(1975)创造了获得单克隆抗体的淋巴细胞杂交瘤技术,以及近期利根川进(1980)提出的抗体结构多样化的基因结构理论等的重大发展阶段,使得免疫分子的研究已成为现代免疫学甚至现代生命科学中发展最快,影响最大的领域之一。 ----异体大分子蛋白质或其它物质,进入或存在于动物体,能刺激机体增生丙球蛋白或致敏细胞。前者称抗原,所增生的丙球蛋白称为抗体。抗原与抗体能在动物体内或动物体外( 试管内)发生特异性反应。
[font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]高可能是有过感染史或者现症感染,还需综合其他数据分析。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒是一种很常见的疱疹病毒,多见于不明原因发烧患者,[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原可刺激人体产生两种抗体,一种是[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体],还有一种是[/font][font=Calibri]IGM[/font][font=宋体]。一般如果只是[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]指标上升,[/font][font=Calibri]IGM[/font][font=宋体]保持在正常范围内,则表示患者有过[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒感染病史,现已康复 ;如[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri]IGG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IMG[/font][font=宋体]都处于升高范围,则表示患者近期感染[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒,可能还会伴随有发热、淋巴结肿大、皮疹等症状表现。下面对几个常见概念进行科普:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]阳性[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]阳性并不是[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒检测专有的检测,如单纯疱疹病毒、风疹病毒等多种疾病,都需要进行[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]的检测。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]当病原体等感染机体后,免疫系统会产生[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]等不同的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体:[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫应答中首先分泌的具有保护性的抗体;一般在机体收到感染时快速产生,经过一段时间[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体量逐渐减少而消失;[/font][/font][font=宋体][font=宋体]所以检测[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体阳性,在临床上是提示为目前体内存在感染的情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体:[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]当[/font][font=Calibri]igM[/font][font=宋体]抗体出现后,随后会出现[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体;但[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体在机体内持续的时间会比较长;[/font][/font][font=宋体][font=宋体]所以检测[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]抗体检测阳性,在临床上是提示患者存在既往感染等的情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒[/font][font=Calibri](EBV)[/font][font=宋体]是一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]又称人类疱疹病毒[/font][font=Calibri]4(HHV-4)[/font][font=宋体];主要通过唾液等传染,是传染性单核细胞增多症的病原体;因[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]一旦入侵机体,可能会对[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞进行诱导,使其转化为恶性肿瘤细胞,所以[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]感染与鼻咽癌、胃癌、淋巴瘤等疾病的发生、发展有密切关系。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]编码多种结构抗原,如病毒衣壳抗原([/font][font=Calibri]VCA[/font][font=宋体])、早期抗原([/font][font=Calibri]EA[/font][font=宋体])、膜抗原([/font][font=Calibri]MA[/font][font=宋体])、核抗原([/font][font=Calibri]NA[/font][font=宋体])等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在机体感染[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]后针对不同的抗原会产生相应的抗体,如抗[/font][font=Calibri]VCA[/font][font=宋体]—[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]、抗[/font][font=Calibri]VCA[/font][font=宋体]—[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]、抗 [/font][font=Calibri]EBNA[/font][font=宋体]—[/font][font=Calibri]igG[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过对这些[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]特异性抗体进行检测,可以明确目前机体的情况,如对帮助判断是否是原发性[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]感染、或是既往感染等的情况。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒衣壳抗原[/font][font=Calibri](igG)[/font][font=宋体]、抗[/font][font=Calibri]EBV[/font][font=宋体]核抗原[/font][font=Calibri](EBVNA[/font][font=宋体]一[/font][font=Calibri]igG)[/font][font=宋体]呈阳性,即提示存在既往有[/font][font=Calibri]EB[/font][font=宋体]病毒感染,但要明确目前的身体的情况,需要配合[/font][font=Calibri],igM[/font][font=宋体]等其他的结果分析,以明确后续的方向。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前利用[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]细胞分选平台[/b][/url],义翘神州可向全球客户提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]细胞抗体制备服务[/b][/url],整个过程涉及单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分离、测序、克隆和单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体筛选等步骤。详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
[font=宋体]在免疫学的世界中,抗原的选择是至关重要的。近年来,许多研究者提出了各种不同的抗原类型以供选择,其中最引人注目的两种是蛋白抗原和多肽抗原。这两种抗原各有其独特的优势和特点,那么,如何在这两者之间做出选择呢?本文将为您详细解析两者的差异以及应用场景,帮助您在免疫学研究中做出最佳的选择。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]①为什么选择蛋白抗原免疫?[/font][/b][font=宋体]您需要一种适用于多种应用的抗体[/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白的序列相似性低,易于表达和纯化,且无毒[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用于以下应用:[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IP/ChIP[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]……[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②为什么选择多肽抗原免疫?[/b][/font][font=宋体][font=宋体]您的预期抗体应用仅包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]或翻译后修饰检测。[/font][/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白具有高度的序列相似性,很难或不可能表达和纯化。[/font][font=宋体]适用于以下应用:[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PTM Detection[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。[/font] [font=宋体]当目标蛋白的获取受限时,多肽是一种合适的解决方案。[/font] [font=宋体]它们也是检测靶蛋白翻译后修饰([/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体])位点的理想抗原,因为它们限制了潜在表位的数量。 虽然潜在表位少对于大多数抗体项目和应用来说是缺点,但是当产生[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]抗体时,有限数量的表位使得发现仅针对[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]位点的反应性抗体更易。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]多肽抗原的局限性:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原由于其价格低和周期短而具有吸引力,但更重要的是要考虑它的局限性。蛋白质抗原能够诱导针对构象表位的抗体,而针对肽抗原的抗体只能识别线性表位。尽管多肽产生的抗体可以在其他应用中起作用。但多肽抗原的价值主要体现在翻译后修饰检测抗体的制备。例如,抗多肽抗体可以应用于[/font][font=Calibri]Western blots[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]。然而,线性化蛋白必须包括用于免疫的固有线性多肽抗原的表位,以确保阳性结果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services][b]蛋白抗原和多肽抗原制备服务[/b][/url],有需求可以直接咨询,详情请看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services[/font][/font]
毛细管电泳在乙肝病毒表面抗原和抗体分离分析的资料
为获得某蛋白(A)的特异性抗体,你用该蛋白免疫家兔,你将如何监控针对蛋白(A)抗原产生抗体的动态过程?(简述所选择方法的原理及步骤)期待您的解答,非常感谢。
[font=宋体][font=宋体]多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。当目标蛋白的获取受限时,多肽是一种合适的解决方案。它们也是检测靶蛋白翻译后修饰([/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体])位点的理想抗原,因为它们限制了潜在表位的数量。[/font][/font][font=宋体][b]为什么选择蛋白抗原免疫?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]您需要一种适用于多种应用的抗体[/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白的序列相似性低,易于表达和纯化,且无毒[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]适用于:[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IP/ChIP[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Sandwich ELISA[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IF/Flow cytomety[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Functional Assay[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IHC[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Direct Bind ELISA[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白抗原成功率高,此外多克隆抗体服务保证免疫原蛋白检测[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]阳性,且快至[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]周交付。更重要的是,我们可以从您的目标序列开始,服务包含蛋白抗原生产。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]为什么选择多肽抗原免疫?[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]您的预期抗体应用仅包括[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]或翻译后修饰检测。[/font][/font][font=宋体]您的目标蛋白与其他蛋白具有高度的序列相似性,很难或不可能表达和纯化。[/font][font=宋体]适用于以下应用:[/font][font=宋体][font=Calibri]Western Blot[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]PTM Detection[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。[/font] [font=宋体]当目标蛋白的获取受限时,多肽是一种合适的解决方案。[/font] [font=宋体]它们也是检测靶蛋白翻译后修饰([/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体])位点的理想抗原,因为它们限制了潜在表位的数量。 虽然潜在表位少对于大多数抗体项目和应用来说是缺点,但是当产生[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]抗体时,有限数量的表位使得发现仅针对[/font][font=Calibri]PTM[/font][font=宋体]位点的反应性抗体更易。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]多肽抗原的局限性:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]多肽抗原由于其价格低和周期短而具有吸引力,但更重要的是要考虑它的局限性。蛋白质抗原能够诱导针对构象表位的抗体,而针对肽抗原的抗体只能识别线性表位。尽管多肽产生的抗体可以在其他应用中起作用。但多肽抗原的价值主要体现在翻译后修饰检测抗体的制备。例如,抗多肽抗体可以应用于[/font][font=Calibri]Western blots[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]。然而,线性化蛋白必须包括用于免疫的固有线性多肽抗原的表位,以确保阳性结果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services][b]蛋白抗原和多肽抗原制备服务[/b][/url],详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antigen-preparation-services[/font][/font]
[font=宋体][font=宋体]目前,用细胞工程制备人单抗在技术上和伦理上都存在一些难题,治疗性抗体的开发就集中在具有治疗前景的鼠源单抗上。但是鼠源单抗对人体具有异源性反应,可诱发人抗鼠抗体效应[/font][font=Calibri](Humananti-mouseantibodies,HAMA[/font][font=宋体]反应[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体],使得单抗的治疗效果明显滞后。随着基因重组技术的发展和人们对抗体结构认识的深入,研究者们尝试对鼠源性抗体进行改造,致力于在保留与抗原结合的高亲和力的基础上,减少异源性抗体的免疫原性,推动抗体人源化研发的进程。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]人源化抗体主要指以用基因克隆及[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术对鼠源单克隆抗体改造,重新表达产生的抗体。其大部分氨基酸序列被人源序列取代,基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性,又降低了其异源性,有利应用于人体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]根据人源化程度不同,单抗又可分为[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/chimeric-monoclonal-antibody][b]嵌合抗体[/b][/url][/font][font=Calibri](60%-70%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CDR(complementarity-determiningregion)[/font][font=宋体]移植抗体[/font][font=Calibri](90%-95%[/font][font=宋体]人源化氨基酸序列[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体:[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体[/font][font=Calibri](chimericantibody)[/font][font=宋体]:第一代人源化抗体。其是在基因水平上将鼠源单克隆抗体的[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区和人抗体的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](variableregion,[/font][font=宋体]可变区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]连接,在合适的宿主细胞内表达可得到人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]鼠嵌合抗体。嵌合抗体用于人体所产生的[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应比鼠源单抗明显减弱[/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]另外,人源[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]区[/font][font=Calibri](constantregion[/font][font=宋体],恒定区[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]可更有效地介导人体一些免疫反应,如[/font][font=Calibri]CDC(complement-dependentcytotoxicity,CDC,[/font][font=宋体]依赖补体的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ADCC(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity,[/font][font=宋体]抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]嵌合抗体虽然可以部分解决异种蛋白的排斥问题,但由于其还含有鼠源[/font][font=Calibri]V[/font][font=宋体]区,依然有可能会诱发[/font][font=Calibri]HAMA[/font][font=宋体]反应,干扰抗体疗效,诱发超敏反应,在临床上其应用会受到一定限制。因此人们进一步研究鼠源可变区的改造,研发出了[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植的人源化抗体,即第二代人源化抗体也是现在普遍所说的人源化抗体[/font][font=Calibri](humanizedantibody)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植抗体是研究者们在嵌合抗体的基础上进一步用人源框架区[/font][font=Calibri](Frameworkregion,FR)[/font][font=宋体]替代鼠源框架区[/font][font=Calibri](FR)[/font][font=宋体],仅保留了[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个鼠源性[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体],其他全部为人源结构,人源性可达[/font][font=Calibri]90%[/font][font=宋体]以上。但对于特定的抗原分子,[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]并不能随意替换。多方面研究均证实,具有支持作用的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]不仅为[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的构象提供了环境,有时还参与抗体结合。因此简单的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植往往明显降低抗原[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗体结合的亲和力,甚至是丧失抗原抗体结合的能力。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]针对这种状况,目前主要有四种策略:[/font][font=宋体][font=宋体]①同源替换,使用与鼠源对应部分具有较大同源性的[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]进行替换[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]②表面重塑,对鼠源[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]表面氨基酸残基进行重塑,以使其类似于人抗体[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]的轮廓或者[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]型式[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]③补偿变化,改编关键位置氨基酸残基,以补偿完全的[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]移植[/font][font=Calibri] [/font][/font][font=宋体][font=宋体]④定位保守,人源化单抗以[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]保守序列为模板进行人源化,但保留鼠源单抗可变区的关键氨基酸残基。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、全人源抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]为了彻底消除异源性抗体的不良影响,[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]年代以后,人们将噬菌体展示技术应用到抗体的表达和克隆上,产生了噬菌体抗体库技术。由此,抗体工程技术进入到了一个新的发展阶段,全人源化抗体的生产和应用也逐渐走向成熟。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]全人源化抗体是指将人类抗体基因通过转基因或转染色体技术,将人类编码抗体的基因全部转移至基因工程改造的抗体基因缺失动物中,使动物表达人类抗体,达到抗体全人源化的目的。目前已建立多种方法生产完全人源性抗体,主要有噬菌体展示技术、转基因小鼠技术、核糖体展示技术和[/font][font=Calibri]RNA-[/font][font=宋体]多肽技术。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]人源化抗体的应用[/b][/font][font=宋体]目前,人源化抗体在肿瘤,器官移植排斥反应,病毒感染,血液性疾病,自身免疫性疾病等方面的治疗和临床诊断中显示出越来越大的应用前景。[/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、在肿瘤治疗中的应用[/font][/font][font=宋体]近年来,兴起的分子靶向治疗,是根本意义上的肿瘤特异性治疗手段,是以肿瘤抗原特异性结合的单抗为载体,连接放射性核素,化疗药物等对肿瘤有杀伤作用的负载而成的抗体导向疗法。其靶向性好,毒性小等特点,非常适合肿瘤的内放射治疗。采用该技术用于临床的人源性抗体有治疗转移性乳腺癌的赫赛汀,用于治疗结直肠癌的西妥昔单抗等。[/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、自身免疫性疾病治疗[/font][/font][font=宋体]自身免疫疾病多于自身抗体异常增多有关。很多临床研究发现,一些具有免疫疾病的病毒感染患者,体内病毒水平常伴随某些免疫分子水平的升高而升高,因此很多免疫分子的人源化抗体在此类病毒的治疗中显示出很好的效果。[/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、病毒感染中的应用[/font][/font][font=宋体]病毒感染几乎无特效药,现有的核苷酸类抗病毒药物效果并不理想,且毒副作用大,单抗治疗因其针对性强,和相对比较安全,已越来越多研究者将其应用于抗病毒的治疗中。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化服务[/b][/url],详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service[/font][/font]
[font=宋体][b]什么是纳米抗体?[/b][/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody][b]纳米抗体[/b][/url]([/font][font=Calibri]nanobody, Nb[/font][font=宋体])是一种人工设计的抗体分子,又称为单域抗体([/font][font=Calibri]single-domain antibodies, sdAbs[/font][font=宋体])、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体或[/font][font=Calibri]camelid[/font][font=宋体]抗体,是发现于羊驼、单峰驼等驼科以及鲨鱼、鳐鱼等软骨鱼中的一种天然缺失轻链的重链抗体([/font][font=Calibri]heavy-chain antibodies, HCAbs)[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]1993[/font][font=宋体]年,比利时的科学家在骆驼的血清中发现了一种天然轻链缺失的重链抗体,分子量约[/font][font=Calibri]95 kDa[/font][font=宋体],其中包括两个恒定区([/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体])、一个铰链区和一个重链可变区([/font][font=Calibri]variable heavy chain domain, VHH[/font][font=宋体]),接着克隆得到只包含一个重链可变区的单域抗体,即[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体。[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]抗体的晶体结构为[/font][font=Calibri]4 nm[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]2.5 nm[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]3 nm[/font][font=宋体]的椭圆形,分子量大小仅普通抗体的[/font][font=Calibri]1/10[/font][font=宋体],约[/font][font=Calibri]12-14 kDa[/font][font=宋体],是最小的完整抗原结合片段,因此又被称为纳米抗体。纳米抗体可用于肿瘤等疾病的治疗、疾病的检测、疫苗的研发等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体特性:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]高耐热性和稳定性[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]将不同的纳米抗体在[/font][font=Calibri]37[/font][font=宋体]℃放置[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周,结果其抗原结合活性均在[/font][font=Calibri]80%[/font][font=宋体]以上,表明纳米抗体在室温下保存相当稳定,这使其比常规抗体更易于储藏和运输。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]比较了鼠单抗和纳米抗体在高达[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]℃高温长时间处理的抗原结合活性,发现纳米抗体都保持了较高的活性仍能重新获得抗原结合能力,而所有常规抗体在[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]℃处理后都丧失了活性,发生了不可逆的聚合。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在恶劣条件,如在高热、离液剂、存在蛋白酶和极度[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值变性的条件下(如胃液和内脏中),正常抗体会失效或分解,而纳米抗体仍具有高度的稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]高抗原结合性:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体独特的结构决定了其高抗原结合特性:纳米抗体较长的[/font][font=Calibri]CDR3[/font][font=宋体],可形成一稳定的暴露的凸环结构(凸环中具有稳定结构的二硫键),能够深入抗原内部以更好的结合抗原从而提高了其抗原特异性和亲和力。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]而传统抗体[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段及单链抗体[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]的抗原结合表面常形成凹形拓扑结构[/font][font=Calibri], [/font][font=宋体]通常只能识别位于抗原表面的位点,因此纳米抗体[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]单域具有更加广泛的抗原结合力,甚至当靶蛋白紧密包裹隐藏了普通抗体识别的位点时[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]纳米抗体也可以对其进行表位识别。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]较强的组织穿透力:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]纳米抗体具有强而快的组织穿透能力,可以进入致密的组织如实体瘤发挥作用;并且多余未结合的纳米抗体能够很快的被清除,这相对于单克隆抗体组织穿透力差,不易被清除的不足,更有利于疾病的诊断。另外,纳米抗体能够有效的穿透血脑屏障,这样的特性为脑部给药提供了新方法,有望成为治疗老年痴呆症的新药。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]高水溶性、高表达性[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]正常抗体[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]结构域单独表达时通常形成包涵体,或者暴露的疏水域相互黏附;而纳米抗体[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]由于其[/font][font=Calibri]FR2[/font][font=宋体]中的疏水残基被亲水残基所取代,使得纳米抗体的水溶性增加,聚合性减少;而且即使以包涵体形式表达,也很容易复性,这样可以大大提高作为药物的利用率。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]因纳米抗体分子量小、结构简单,由单一的基因编码,所以它很容易在微生物中合成,能在噬菌体、酵母等微生物中大量的表达,而且其相对价格低廉、可进行大规模生产,易于普及和应用。有报道,可通过酵母反应器酿造将纳米抗体的产量提高,每公升可达[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]克的产量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]纳米抗体的应用优势[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①用于生物医药研发(基因工程药物研发、[/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体]药物研发);[/font][/font][font=宋体]②用于临床体外诊断(胶体金法、酶联免疫吸附法、电化学发光法);[/font][font=宋体]③用于肿瘤研究、免疫学研究等基础研究;申请具有自主知识产权的发明专利及科研奖项;[/font][font=宋体]④拓展研究思路、发表国际知名学术刊物。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纳米抗体是一种非常有前景的下一代治疗性抗体技术,受到越来越多的研究机构和制药公司的关注。为支持纳米抗体药物的早期发现,义翘神州利用噬菌体抗体库技术自主研发了纳米抗体开发平台,已成功开发了多个纳米抗体候选分子。另外,我们的高通量纳米抗体表达平台,已成功表达和生产了多种纳米抗体形式,包括单价、多价或多特异性[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体],满足客户的各种定制需求。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/nanobody[/font][/font][font=Calibri] [/font]
[font=宋体]抗体经过酶标记、铁蛋白标记或通过胶体金标记获得标记抗体,是免疫电镜样品制备的一种方法,用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上,通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。抗体标记主要是用于抗原的定位分析,在某些情况下,也可以对混杂有大量其他分子的样本中的抗原进行定量检测。由于抗体与其相应抗原具有很高的亲和力,因此带有易识别标记物的抗体可以定位分析抗原,并且是一种理想的快速价廉的定量测定方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]荧光素标记[/b][/font][font=宋体]荧光色素是最常用于标记抗体的标记物之一。荧光素经恰当的激发可发光,从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平精确定位的方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]酶标记[/b][/font][font=宋体]酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成,其应用范围非常广泛,结果即时可见、敏感性高,但较难应用于定量分析。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]生物素标记[/b][/font][font=宋体]生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州开发了丰富的[url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记蛋白[/b][/url]产品,拥有[/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]定点标记和化学标记两种类型的生物素标记蛋白,覆盖细胞治疗、抗体药、疫苗等热门靶点。产品具有高批间一致性、高活性等优势,适用于[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Biopanning[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SPR / BLI[/font][font=宋体]等实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]除了为客户提供抗体开发,义翘神州还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url],可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]
[align=left][font='calibri'][size=13px]抗体的类型有哪些?不同类型的抗体结构和功能介绍[/size][/font][/align]抗体的类型有哪些?不同类型的抗体结构和功能有什么不同,[url=https://cn.sinobiological.com/]义翘神州[/url]为您细细讲解:五种不同类型的抗体分别是什么?血清中发现的抗体分子存在五种免疫球蛋白:IgG、IgM、IgA、IgE和IgD,通过重链类型进行区分。IgG抗体结构和功能免疫球蛋白G(IgG)抗体是一种大分子球蛋白,分子量约为150kDa,由四条肽链组成。它包含两条相同的γ(伽马)重链,约50kDa,以及两条相同的轻链,约25kDa,因此属于四聚体结构。IgG提供长效的保护作用,持续存在数月或数年。IgG可阻止细菌、病毒的侵害,中和细菌毒素,触发补体蛋白系统,结合抗原提高吞噬作用的效果。IgM抗体结构和功能免疫球蛋白M(IgM)由五个或六个单体构成(即大多数为五聚体,但也有六聚体),由两条重链(μ-链)和两条轻链构成,通过二硫键和J链结合在一起。IgM与红细胞(RBC)表面的ABO血型抗原有关。IgM通过吞噬作用增强细胞的摄取。IgA抗体结构和功能免疫球蛋白A(IgA)抗体由重链(H)和轻链(L)构成。每条H链由恒定区(Cα1、Cα2、Cα3)、铰链区和可变区(V)构成。轻链由CL和Vκ或Vλ构成。IgA的主要功能是在微生物入侵组织之前将抗原与微生物相结合。它聚集抗原并将其保存在分泌物中,因此当分泌物被排出时,抗原也会被排出。IgA也是黏膜表面(例如肠、鼻和肺)的第一道屏障。IgE抗体结构和功能免疫球蛋白E(IgE)抗体仅存在于哺乳动物体内。IgE由浆细胞合成。IgE单体由两条重链(ε链)和两条轻链构成,ε链包含4种类Ig恒定区(Cε1-Cε4)。IgE与参与免疫应答的肥大细胞和嗜碱性粒细胞相结合。一些科学家认为IgE能够阻止寄生虫的侵入。IgD抗体结构和功能免疫球蛋白D(IgD)抗体可在未成熟的B淋巴细胞的质膜上表达。IgD同样以分泌体形式产生,少量存在于血清中。IgD在诱导抗体产生中起重要作用。更多抗体定制服务尽在:https://cn.sinobiological.com/services/custom-antibody-services
本公司因发展需要考虑研发生产抗原、抗体,想问一下这样公司需要先拥有何种资质才可以顺利进行生产?
[font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体是一种能够特异性结合另一抗体独特位的抗体。独特型由多个抗原决定簇([/font][font=Calibri]Antigenic determinant[/font][font=宋体])组成,每个抗原决定簇都是一个独特位。抗原决定簇或独特位可存在于重链可变区,也可存在于轻链可变区,或者存在于两条链组成的表面。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体三种类型:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①抗原非中和型[/font][font=宋体]不具有抗体结合区特异性,治疗性抗体仍可与其目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体可用于检测抗体药物总量。[/font][font=宋体]②抗原中和型[/font][font=宋体]具有抗体结合区特异性,与其目标抗原相互竞争,因此,此类型可用于检测游离型抗体药物。[/font][font=宋体]③药物靶标复合物型[/font][font=宋体][font=宋体]仅特异性地识别抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]靶标复合物,不与未结合的抗体或未结合的目标抗原相结合。这种类型的抗独特型抗体仅能检测结合型抗体药物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]抗独特型抗体的不同应用[/b][/font][font=宋体]①免疫原性分析[/font][font=宋体][font=宋体]免疫原性分析对于生物药物开发具有重要的意义。几乎所有的生物制药产品(如蛋白、抗体、多肽偶联药物或寡核苷酸等)都会诱导机体内免疫应答,从而导致抗药抗体([/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体])的产生。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体属于高度特异性[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]。多克隆抗体能较大限度地模拟血样中的真实情况,还具有制备周期较短和成本低的优势。因此,大多数情况下,在分析患者样本中是否存在[/font][font=Calibri]ADA[/font][font=宋体]时,抗独特型多克隆抗体通常用作阳性对照。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])分析[/font][/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型抗体也是药代动力学([/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体])分析的关键工具试剂之一。 在临床前研究和临床研究中,[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析可用于评估抗体药物的用药剂量和毒性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗独特型单克隆抗体特异性强,可作为[/font][font=Calibri]PK[/font][font=宋体]分析的检测试剂,用于检测人或动物血清中的抗体药物含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service][b]抗独特型抗体制备服务[/b][/url],同时拥有综合性的抗独特型抗体开发平台,涵盖兔多抗、杂交瘤、噬菌体、流式单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和[/font][font=Calibri]Beacon[/font][font=宋体]单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术,为客户提供更多选择。详情可以关注抗独特型抗体制备服务[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/anti-idiotype-antibody-service[/font][/font]
[font=宋体]抗体标记是一种生物技术,通过将标记物(如酶、荧光素、生物素等)共价连接到抗体上,使其与待检测物(如特定抗原)特异性反应,形成多元复合物。随后,借助相关仪器,可以直接观察试验结果或进行自动化测定,从而对抗原、抗体反应进行定性和定位研究,或进行定性和定量测定。下面为大家介绍几种高质量的标记抗体:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]①荧光色素标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]这种标记方法是将荧光素与相应的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]结合,将荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]与标本中相应的抗原形成荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原复合物,用荧光显微镜观察。在显微镜若存在荧光则意味着存在抗原抗体复合物,因此可根据已知的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]推断出另一种未知抗原[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗体[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②[/b][url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记抗体[/b][/url][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高!这种方法可使抗体或其它蛋白质的[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基与酰化的生物素共价结合,生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]③放射性碘标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质的碘标记方法有很多种,比如我们常用的化学法或酶促法通过氧化对蛋白质分子进行碘化等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]④[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体是指将[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料与特定抗体结合而成的复合物,这种技术常用于生物医学研究中的荧光标记。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料是从红藻属藻类中提取得到的一种特殊色素,具有较高的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体主要应用在流式细胞术和免疫组化等实验中。在流式细胞术中,[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞表面标记物的表达情况,如[/font][font=Calibri]CD4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CD8[/font][font=宋体]等,可以实现对免疫细胞亚群的研究。在免疫组化和免疫组织化学等实验中,[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞内标记物的表达,如细胞因子、转录因子等,可以深入研究细胞内信号传导通路及相关的生物学功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑤[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体是一种荧光标记的二抗,通常是在单抗上进行标记,具有很强的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体可以与细胞或细胞组分中的特定抗原结合,用于细胞表面标记、蛋白质定量分析、细胞周期和细胞凋亡研究等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑥[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体是将[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体](异硫氰酸荧光素)与特异性抗体经适当方法连接而成的复合物。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]是一种荧光染料,能够与各种抗体蛋白结合,并产生强烈的荧光信号。这种标记技术常用于生物医学研究中的荧光标记,特别是在免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州除了为客户提供抗体开发,还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url],可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。更多关于抗体标记及抗体标记方法详情可以参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]
[font='calibri'][size=13px]抗体fc段和Fab段什么意思?抗体的功能有哪些?[/size][/font]抗体(antibody),是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。Fab段:抗原结合片段(fragment of antigen binding,Fab),相当于抗体分子的两个臂,由一个完整的轻链和重链的VH和CH1结构域组成。Fc段:可结晶段(fragment crystallizable,Fc)相当于Ig的CH2和CH3结构域,是Ig与效应分子或者细胞相互作用的部位。由以上信息可以看出:Fab段包含完整的可变区,以及恒定区的CH1区域。Fc段仅指Ig恒定区CH2和CH3的区域,相当于Y字结构下面那一部分。抗体的功能有哪些?(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。(7)通过与细胞Fc受体结合发挥多种生物效应。①调理作用 IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、FcμR结合,增强其吞噬能力,通常将抗体促进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理作用 (opsonization)。②发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。义翘神州在重组抗体表达方面具有丰富的经验,除了表达全长抗体外,还可以表达各种形式的抗体片段,如单链抗体 (scFv)、抗原结合片段(Fab)、纳米抗体 (VHH) 和抗体融合蛋白 (antibody-fusion proteins)等。基于优化的哺乳动物蛋白平台,义翘神州可在HEK293或CHO细胞中的表达和生产Fab抗体片段。 利用此技术生产的Fab片段较酶切全长抗体获得的Fab片段具有更好的质量。scFv可以在微生物系统如E. coli中表达, 也可以通过瞬转技术在哺乳动物细胞中表达。义翘神州具备在不同系统中表达不同抗体片段的能力,您可以根据实际需求进行选择。您只需将抗体片段的基因序列发送给我们,义翘神州负责完成从基因合成到最终纯化抗体片段的整个过程。更多抗体片段生产服务可以参看:https://cn.sinobiological.com/services/fab-scfv-antibody-production-service
[font=宋体]抗体,作为一类特殊的蛋白质,在免疫系统中发挥着至关重要的作用,它们能够特异性地识别并中和外来病原体,如细菌和病毒。而蛋白质,作为生命活动的基础分子,具有多种多样的功能,从酶催化到结构支撑,无所不包。抗体与蛋白的区别在于,抗体是一类具有特定功能的蛋白质,而蛋白质则是更广泛的一类生物分子。本文将深入探讨抗体与蛋白的具体区别,并详细解析抗体蛋白的结构与功能,为读者提供一个全面而深入的理解。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体与蛋白的区别?[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]定义:[/font][font=宋体][font=宋体]抗体([/font][font=Calibri]antibody[/font][font=宋体])是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体),如血型[/font][font=Calibri]ABO[/font][font=宋体]型中的抗[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]和抗[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]的抗体,和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体,异嗜性抗体,同种抗体和自身抗体。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]和不完全抗体[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]等。抗体在医疗实践中应用甚为广泛。如用于疾病的预防、诊断和治疗方面都有一定的作用。临床上用丙种球蛋白预防病毒性肝炎、麻疹、风疹等,国际上用抗[/font][font=Calibri]Rh[/font][font=宋体]免疫球蛋白预防因[/font][font=Calibri]Rh[/font][font=宋体]血型不合引起的溶血症。诊断上如类风湿因子用于类风湿性关节炎,抗核抗体([/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体])、抗[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]抗体用于系统性红斑狼疮,抗精子抗体用于原发性不孕症的诊断等;治疗上如毒素中毒用抗毒治疗以及免疫缺陷性疾病的治疗等。[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical][b]抗体相关资源[/b][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白:[/font][font=宋体][font=宋体]蛋白质是生命的物质基础,是有机大分子,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的[/font][font=Calibri]16%~20%[/font][font=宋体],即一个[/font][font=Calibri]60kg[/font][font=宋体]重的成年人其体内约有蛋白质[/font][font=Calibri]9.6~12kg[/font][font=宋体]。人体内蛋白质的种类很多,性质、功能各异,但都是由[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]多种氨基酸([/font][font=Calibri]Amino acid[/font][font=宋体])按不同比例组合而成的,并在体内不断进行代谢与更新。点击查看:[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]蛋白相关资源[/b][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]区别与联系:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]蛋白质还是有一定的区别以及关联性的,虽然说抗体是蛋白质,但是蛋白质不一定是抗体。[/font] [font=宋体]主要是因为抗体是通过人体内的浆细胞所产生的,而且还可以喝相应的抗原特异性相互结合,这样在一定程度上就能发挥出蛋白质。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体[/font][font=宋体]蛋白[/font][font=宋体]结构[/font][font=宋体]解析[/font][font=宋体]:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]抗体是一种免疫球蛋白,由[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞产生。抗体的单体是一个[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]形的分子,有[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]条多肽链组成。其中包括两条相同的重链,以及两条相同的轻链,之间由双硫键连接在一起。每条重链[/font][font=Calibri]50kDa[/font][font=宋体],每条轻链[/font][font=Calibri]25kDa[/font][font=宋体],轻重链间存在二硫键链接。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]轻链[/font][font=宋体][font=宋体]轻链包括可变区和恒定区,可变区约占轻链的[/font][font=Calibri]1/2[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]重链[/font][font=宋体][font=宋体]重链包括可变区和恒定区。根据重链的不同,可以将抗体分为不同的种类,例如哺乳动物[/font] [font=Calibri]Ig [/font][font=宋体]的重链有α、δ、ε、γ和 μ 五种[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]相对应可以将哺乳动物[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]分为 [/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]IgM [/font][font=宋体]五类。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]可变区[/font][font=宋体][font=宋体]抗体分子的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端存在一段氨基酸序列变化较大的区域,该区域称为可变区。可变区中存在可以与抗原特结合的部位,即抗原结合位点。一个抗体有两个抗原结合位点,可以同时结合两个抗原分子。在可变区中有三个区域的序列高度变化,成为高变区([/font][font=Calibri]hypervariable region[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]HVR[/font][font=宋体])又称为抗原互补决定区([/font][font=Calibri]complementarity determining region[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体])。可变区主要通过其[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个[/font][font=Calibri]CHR[/font][font=宋体]区形成[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个环状结构与抗原特异性结合。可变区中非[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]部分成为骨架区([/font][font=Calibri]framework region[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]),其氨基酸组成和排列变化相对[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]较少。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]恒定区[/font][font=宋体][font=宋体]抗体分子[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端氨基酸序列相对稳定,该区域称为恒定区。同一种抗体的恒定区是相同的。抗体轻链的恒定区由一个[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]结构域构成;重链的恒定区由[/font][font=Calibri]3-4[/font][font=宋体]个串联的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]结构域及一个用于增加灵活性的铰链区构成。[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]有三个结构域([/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]),[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]有四个结构域([/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH4[/font][font=宋体])。不同种类抗体的铰链区存在一定的差异,[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]的铰链区较短,[/font][font=Calibri]IgD [/font][font=宋体]的铰链区较长,[/font][font=Calibri]IgM [/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgE [/font][font=宋体]无铰链区。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]分子在木瓜蛋白酶的作用下可以被降解为两个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]段及一个[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]段由抗体轻链的可变区、轻链的恒定区、重链的可变区及重链恒定区构成。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段包含了所有抗体分子共有的蛋白质序列以及各个类别独有的决定簇。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段有多种生物学活性,具有结合补体、结合[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体、通过胎盘等作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]详情:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
[font=宋体]本文主要介绍了单克隆抗体与多克隆抗体的定义,并介绍单抗、多抗在制备流程、特点及应用上的区别。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单抗与多抗的定义:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体(单抗)。而由多个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体(多抗)。从某种角度而言,多抗是多种单抗的混合物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单抗和多抗制备上的区别:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]经过特定抗原处理过的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]培养基筛选、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物(一般为[/font][font=Calibri]balb/c[/font][font=宋体]小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]腹水纯化后就能得到单克隆抗体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越高越好)直接注入到动物体内进行免疫,经过[/font][font=Calibri]3~4[/font][font=宋体]次免疫,[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]测其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体。因此多抗制备周期比单抗的短,多抗首次制备价格也比单抗要低。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单抗多抗应用上的区别:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。单克隆抗体的特异性高,一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的单克隆抗体,因此可以对其特异性进行全面、系统地验证。但如果所识别的抗原表位被破坏,实验的结果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一。而多克隆抗体的特异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限。所以在用多抗做免疫检测时,更容易造成背景,例如在[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]中有杂带,在[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]中背景较深等等。虽然还存在着交叉反应[/font][font=Calibri]*[/font][font=宋体]的问题,但由于多抗识别多个抗原表位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结果也不会受到影响。在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]如果对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多([/font][font=Calibri]WB/IP/IF/ICC[/font][font=宋体]等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体],可以选择制备单克隆抗体。若对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测,可以选择制备多克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商,目前已成功交付了数以万计的抗体项目,客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。目前提供单克隆抗体定制服务和多克隆抗体定制服务。想了解更多关于单抗和多抗区别详情可以查看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体][font=宋体]多克隆抗体定制服务:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/polyclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体制备:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]
[font=宋体]抗体标记技术是一种广泛应用于生物学、医学及免疫学等领域的重要技术。它通过将特定的标记物与抗体结合,实现对抗体及其所识别的抗原的检测、定位和定量等操作。本文将介绍抗体标记技术的原理、方法及实际应用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]一、抗体标记技术的原理[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体标记技术是将特定的标记物与抗体结合,使抗体带上示踪基团,从而实现对抗体及其所识别的抗原的检测、定位和定量等操作。根据标记物的性质,抗体标记技术可分为放射性标记、荧光标记、化学发光标记和生物发光标记等。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、抗体标记技术的方法[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]放射性标记[/font][font=宋体][font=宋体]放射性标记是将放射性核素与抗体结合,通过放射性衰变产生的射线实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的放射性核素包括[/font][font=Calibri]3H[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]14C[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]35S[/font][font=宋体]等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点,但存在放射性污染的问题。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记[/font][font=宋体][font=宋体]荧光标记是将荧光染料与抗体结合,利用荧光信号实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的荧光染料包括异硫氰酸荧光素([/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体])、藻红蛋白([/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体])和罗丹明等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点,但存在光漂白和光干扰等问题。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]化学发光标记[/font][font=宋体]化学发光标记是将化学发光剂与抗体结合,利用化学反应产生的光信号实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的化学发光剂包括吖啶酯类、过氧化物酶和碱性磷酸酶等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点,但存在化学反应的不稳定性等问题。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]生物发光标记[/font][font=宋体]生物发光标记是将生物发光物质与抗体结合,利用生物发光产生的光信号实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的生物发光物质包括萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点,但存在生物发光的不稳定性等问题。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三、抗体标记技术的应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫组化染色[/font][font=宋体]免疫组化染色是一种用于检测组织中特定抗原的定位和定量技术。通过抗体标记技术将特异性抗体与组织中的抗原结合,再利用组织化学方法显示抗原的位置和分布。该技术可用于诊断疾病、研究组织结构和功能等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]流式细胞术[/font][font=宋体]流式细胞术是一种用于检测细胞表面抗原的表达水平的技术。通过抗体标记技术将特异性抗体与细胞表面抗原结合,再利用流式细胞仪对细胞进行计数和分选。该技术可用于研究细胞分化、免疫应答和肿瘤发生等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫沉淀[/font][font=宋体][font=宋体]免疫沉淀是一种用于分离和纯化特异性抗原的技术。通过抗体标记技术将特异性抗体与抗原结合,再利用蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]或蛋白[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]等亲和层析方法将抗原与抗体分离。该技术可用于研究抗原的性质、结构和功能等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总之,抗体标记技术是一种广泛应用于生物学、医学及免疫学等领域的重要技术。它通过将特定的标记物与抗体结合,实现对抗体及其所识别的抗原的检测、定位和定量等操作。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]同时义翘神州还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url],可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]
[font=宋体]抗体是体液免疫应答的主要效应因子,存在与血液和组织中,它们能特异性的结合或识别入侵的病原体,一次构成机体预防系统的重要组成部分。抗体具有相似的结构,由两条相同的重链和和轻链组成的对称结构。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体的生产目前最常用的两种方式是利用哺乳动物细胞生产的重组抗体和免疫动物生产的普通抗体。传统的免疫动物生产的抗体,是获取动物血清纯化得到的,如果用于药用人体往往会产生排异反应。利用重组技术生产抗体不仅能够满足抗体的大规模生产需求,同时,重组抗体药物的发展已成为目前生物制药的主流。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组抗体的发展经历了鼠源单抗([/font][font=Calibri]McAb[/font][font=宋体]),人鼠嵌合抗体,人源化抗体和全人抗体四个阶段。下面从抗体生产和抗体技术两方面入手,系统的阐述重组抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]重组抗体技术:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]Fab[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production][b]Fab[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production][b]片段[/b][/url]([/font][font=Calibri]Fragment of antigen binding[/font][font=宋体])也叫做抗原结合片段,是抗体结构中可以与抗原结合的区域。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段由一条完整的轻链与重链的[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]结构域([/font][font=Calibri]Fd[/font][font=宋体]段)组成,分子量约[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]×[/font][font=Calibri]104[/font][font=宋体]。轻链与重链均存在一个恒定区与一个可变区,轻重链间存在二硫键链接。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]scFv[/font][/font][font=宋体][font=宋体]单链抗体([/font][font=Calibri]single-chain variable fragment[/font][font=宋体], [/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体])是由抗体重链的下载可变区与轻链的可变区在一段肽链的连接下构成的小分子,是具有抗体活性的最小功能结构单位。单链抗体可以由表达系统进行表达,也可以用噬菌体展示技术进行制备。由于其分子质量小,穿透力强,半衰期短,免疫原性低等特点,在疾病临床诊断、治疗、预防等方面具有重要作用和广阔的应用前景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③双特异性抗体[/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体([/font][font=Calibri]bispecific monoclonal antibody, BsAb[/font][font=宋体])是一种人工制作出来的可以同时结合两种不同抗原的特殊抗体。双特异性抗体在自然状态下不存在,只能通过人工制备。研究双特异性抗体,对于癌症的免疫治疗有着重大的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fusion-protein][b][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白是指利用基因工程技术将免疫球蛋白([/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]等)的下载[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段与某种具有生物学活性的功能蛋白分子融合而产生的新型蛋白。具有生物学活性的功能蛋白可以是细胞因子、毒素、受体、酶、抗原肽等。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]融合蛋白不仅可发挥所融合蛋白的生物学活性,还具有一些抗体的性质,如可引起抗体依赖细胞介导的细胞毒作用([/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体])、补体依赖的细胞毒作用( [/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体])与抗体依赖细胞介导的吞噬作用([/font][font=Calibri]ADCP[/font][font=宋体])等。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]蛋白类药物在血浆内半衰期较短,为了达到治疗效果需要大剂量给药,这样会造成严重的副作用,给患者造成巨大的负担。将功能蛋白与免疫球蛋白的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段融合,可以延长药物在血浆内的半衰期,降低药物的免疫原性,在疾病的诊断与治疗方面有重要的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-humanization-service][b]抗体人源化[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]抗体人源化的发展经过三个阶段,从人鼠嵌合[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]人源化抗体和全人抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥[url=https://cn.sinobiological.com/services/antibody-affinity-maturation-service][b]抗体亲和力成熟[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]抗体亲和力成熟[/font][font=Calibri](antibody affinity maturation)[/font][font=宋体]下载是指机体正常存在的一种免疫功能状态。在体液免疫中,再次应答所产生抗体的平均亲和力高于初次免疫应答。这种现象称为抗体亲和力成熟。机体的这种功能状态是长期进化和对外界环境不断适应的结果,对机体防御和维持自身免疫监控有着十分重要的意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑦抗体亲和力测定[/font][font=宋体]抗体与抗原表位或抗原决定簇之间的结合力称为抗体亲和力,下载其本质是一种非共价作用力,包括对氨基酸之间的吸引力,氢键,疏水性作用力等。抗体亲和力体现了一个抗体分子和一个半抗原分子或抗原分子的一个决定簇起反应的能力。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑧[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/phage-display][b]噬菌体展示技术[/b][/url][/font][font=宋体][font=宋体]噬菌体展示技术[/font][font=Calibri](phage display technology)[/font][font=宋体]的本质是一种筛选技术。下载将不同的外源基因分别插入噬菌体载体中,随着噬菌体的传代,外源蛋白会展现在噬菌体表面,形成噬菌体文库。随后用特定蛋白对噬菌体文库进行筛选,便可快速的得到与该蛋白具有高度亲和力的抗体。筛选出的抗体可以进一步用于生物学功能研究。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注义翘神州[/font][font=Calibri]CRO[/font][font=宋体]服务详情。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/custom-services-cro[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font]
1 两者的内涵不同抗原是指能刺激机体的免疫系统产生抗体或效应细胞,并且能够和相应的抗体或效应细胞发生特异性免疫反应的物质;而过敏原则是指引起机体产生过敏反应的物质。机体只要接触抗原就要发生免疫反应,而过敏反应只有当过敏原再次接触时才会发生。2 两者的外延不同作为抗原具备两种性能:一是能刺激机体产生抗体或效应细胞,这叫免疫原性;二是能和相应的抗体或效应细胞发生特异性免疫反应,叫做反应原性。免疫学上把兼备两种性能的物质叫完全抗原,如病原体、异体动物血清等;只有反应原性而无免疫原性的物质,叫半抗原,如青霉素、磺胺等。过敏原是指引起机体过敏反应的物质,因此过敏原可能既有免疫原性,又有反应原性,如免疫血清等;也可能只有反应原性,即半抗原,但半抗原进入机体与组织蛋白结合后,即成为完全抗原,如青霉素进入机体后,它的降解产物中的青霉烯酸能与体内的组织蛋白结合成为完全抗原,刺激机体产生相应的抗体。3 两者的性质不同3. 1 抗原一般具有异物性,进入组织内的抗原物质必须与机体组织细胞的成分不同,表现在:一是异种间的物质,如马的血清对马而言是自体物质,不能引起马产生抗体,对兔而言则是异体物质,能引起兔产生抗体;二是同种异体间的不同成分,如不同人之间红细胞表面的凝集原等;第三是自体内的隔绝成分,如甲状腺球蛋白等,在正常情况下是固定在某一部位的,与产生抗体的细胞不接触,因此不会引起自体产生抗体,但是,当受到外伤或感染时,这些成分就会进入血液[font=Times New
1891年10月,抗体(antibody)一词首次出现在保罗·埃尔利希公布的《免疫力的试验性研究》这篇文章中,德语的抗体"Antikörper"出现在该文章的结论部分。从此,科学家们开始了对抗体的探索和研究。二十世纪三四十年代,人们已经认识到抗体是一种蛋白质,并且可以识别抗原的空间结构。六十年代,罗德尼·罗伯特·波特和杰拉尔德·埃德尔曼揭示了抗体的化学结构,并因此获得1972年的诺贝尔生理学或医学奖。同一时期,人们发现了IgA, IgD, IgE等亚型的抗体。1975年,分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦建立杂交瘤技术,这是第一代单克隆抗体技术。他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠脾细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。基于杂交瘤的单克隆抗体技术一经问世,迅速被应用于疾病诊断,治疗等用途中,使用中人们发现,鼠源的单克隆抗体很容易在人体内产生免疫反应,随后,1988年,Greg Winter等人率先提出了人源化抗体的方法,解决了这一问题。这是第二代单克隆抗体技术。而近来流行的兔单克隆抗体,是一种新型的技术,它基于杂交瘤或者噬菌体展示技术,这种方法产生的抗体在保持特异性的同时,具有更高的亲和力和灵敏度,实际使用时,工作浓度更低,背景更低,用作免疫组化等用途时,有时甚至可以免去抗原修复的步骤。时至今日,抗体的生产技术已经非常成熟。单克隆抗体已经应用于临床诊断,肿瘤治疗,自身免疫病治疗等诸多方面,日渐成为治疗各种顽疾的终极武器。