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从来没做过柱层析的实验,这次有机会自己亲手做一次柱层析,哎呀,这个填装层析柱真是令我感触颇深啊。大家就听我慢慢道来我这填装层析柱的纠结过程吧……http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09503.gif这个装柱啊,那可有了学问了,那不是一般人能装的好的。就为这,我咨询了好几个有过装层析柱经验的同事,然后开始了我那悲催的装柱历程……第一根柱子,先给大家见个图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307261050_453809_2669029_3.jpg先跟大家说个事儿:我买的这种柱管,是带500ml储液球的,这是国标上要求的。它带着储液球的原因就是为了能够将洗脱液全部放入,不用分次放入,但是……其实根本用不到这样的,35g硅胶装出来的柱床其实很矮,口呢离着柱床很高,放入洗脱液的时候如果不小心,海砂和硅胶就会被冲起来http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09507.gif,这根柱子就算是废掉了,所以大家在选择层析柱管的时候千万根据条件好好挑选,不然的话,后果真的是不堪设想……下面开始装柱啦http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif:把硅胶称到烧杯里称好了,然后倒入洗脱液,咳咳咳咳……呛死了http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09512.gif,往里面一倒那洗脱液啊,就会有少许硅胶飞出来啊,烧杯里的硅胶冒着泡,用玻璃棒搅拌,并不时的敲敲烧杯,把气泡弄碎,把硅胶搅拌的均匀了,然后倒进柱管里。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09503.gif哎呀,纠结的我呀!就怕硅胶不均匀,搅了又搅啊,终于是把硅胶倒进去了,沾得壁上哪都是,然后快速的用洗脱液去洗,气泡倒是不怎么有,但是硅胶装的平不平也是影响分离度的关键啊,结果我装的就是不平,人家都说用玻璃棒敲敲就平了,可是我左敲右敲就是没办法弄平,算了,今天只当练习了,就这么滴吧~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09506.gif然后就开始放洗脱液至硅胶面10cm左右,我放着放着突然想起来海砂还没称呐!!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09507.gif就赶紧去称海砂4g,您别说,这海砂还真沉……等洗脱液放的差不多了,拧上活塞,倒入海砂,结果发现……这也太不平啦啊~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gif都跑偏到哪去了啊……玻璃棒还是左敲右敲,没反应,唉,就这么滴吧~放洗脱液至与海砂面平齐,装的第一根试验柱算是悲悲催催完成……http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif下面是见图时间:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647361_2669029_3.jpg大家看见了吗?硅胶都歪到姥姥家去了~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gifhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2013072409294410_01_2669029_3.jpg来个近点的~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09510.gifhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2013072409311536_01_2669029_3.jpg大家看见那个坑了吗?没装好造成的~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09508.gif最后给大家来个厉害的,就是我上面提到过的硅胶被洗脱液冲起来的现象。大家往下看http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09501.gif:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307261046_453806_2669029_3.jpg就是这样哒~悲剧不?所以选好柱管也是柱层析的一个关键啊~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif好在我做了个预实验,不过这次很失败,下次继续……http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gif
请问关于“离子交换层析”中的问题,在玻璃层析柱中阳离子交换层析剂——羧甲基纤维素是以什么状态存在?凝胶状还是颗粒状?其在装柱的时候容易产生气泡,请问如何除泡?
大家好,因为做有机实验需要用到层析柱,填充层析柱的药品分别为玻璃棉、硅胶和无水硫酸钠。国标上说装好的层析柱需要先后用二氯甲烷和正己烷进行冲洗和洗脱,现在不明白用二氯甲烷和正己烷冲洗和洗脱那些有机成分和杂质???望各位贤人异士能多多指教啊。。。。。